Med Legal Trabajo (2)

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<p>FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE MEDICINA</p><p>Aprobada por ley 3153 del 14/12/06</p><p>Aprobado por el CONES resolución N.577/18</p><p>Sede II Ciudad Del Este</p><p>UNIVERSIDAD CENTRAL DEL PARAGUAY</p><p>FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD</p><p>CARRERA DE MEDICINA</p><p>TRABAJO DE MEDICINA LEGAL</p><p>POLIMORFISMOS GENETICOS</p><p>Trabajo apresentado al Curso de</p><p>Grado en Medicina, la Universidad</p><p>Central Del Paraguay Facultad de</p><p>Ciencias de la Salud Carrera de</p><p>Medicina, sob la orientación del</p><p>Profesor Cesar Alum.</p><p>Ciudad Del Este</p><p>Paraguay 2024</p><p>UNIVERSIDAD CENTRAL DEL PARAGUAY</p><p>FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD</p><p>CARRERA DE MEDICINA</p><p>POLIMORFISMOS GENETICOS</p><p>AUTORES:</p><p>Paraguassu Chaves Junior, Alvaro Humberto</p><p>De Castro Mineto, Gabriela</p><p>Soares Morais, Fernando</p><p>Perrone Negreiros Da Silva, Leila</p><p>De Lima Stehlgens, Amanda</p><p>Almeida Sampaio, Bruna</p><p>De Oliveira Coraça, Mariana Caroline</p><p>Chagas De Oliveira, Marlon Dowglas</p><p>Santos Feitosa, Meryelle</p><p>Cunha Messias, Stephane</p><p>Ciudad Del Este</p><p>Paraguay 2024</p><p>Resumen</p><p>Por supuesto. Los polimorfismos genéticos son variaciones en la secuencia del ADN</p><p>que ocurren naturalmente dentro de una población. Estas variaciones pueden ser</p><p>observadas en una gran cantidad de formas, como cambios de una sola base</p><p>(llamados SNPs, por sus siglas en inglés, Single Nucleotide Polymorphisms),</p><p>inserciones o deleciones de fragmentos de ADN, duplicaciones genéticas, entre</p><p>otros. Estos polimorfismos son la base de la variabilidad genética entre individuos y</p><p>poblaciones.Además, los polimorfismos genéticos son importantes en la</p><p>investigación forense, donde se utilizan para identificar individuos y establecer</p><p>relaciones de parentesco. En biología evolutiva, permiten entender cómo las</p><p>poblaciones cambian con el tiempo y se adaptan a diferentes ambientes.</p><p>En resumen, los polimorfismos genéticos son una parte esencial de la diversidad</p><p>genética y juegan un papel crucial en la determinación de características biológicas</p><p>y en la comprensión de la salud y la enfermedad.</p><p>ÍNDICE</p><p>1.0 Introduccion ............................................................................................. 5</p><p>2.0 Objetivos .................................................................................................. 5</p><p>2.1 Concepto de Polimorfismos ..................................................................... 5</p><p>2.2 Aplicación de los Polimorfismos………………………………………..........7</p><p>2.3 Aplicación médico legal de los polimorfismos en investigación de</p><p>parternidad.………………………………………………………….…………8</p><p>2.4 Aplicación médico legal de los polimorfismos en investigación de la</p><p>identificación en restos óseos…………………………………………....…..8</p><p>2.5 Aplicación médico legal de los polimorfismos en investigación de la</p><p>criminalística…………………………………………………………………..10</p><p>2.6 Concepto de ADN………………………………………………….………...11</p><p>2.7 ADN repetitivo en tandem…………………………………………………...12</p><p>2.8 Los polimorfismos de ADN mitocondrial…………………………………. 13</p><p>2.9 Concepto de Prueba de ADN……………………………………………….16</p><p>3.0 Etapas de la prueba de ADN en el Laboratorio Forense…………………17</p><p>4.0 Conclusión……..………………………………………………………………19</p><p>5.0 Referencias Bibliográficas .......... ……………………………………………20</p><p>1.0 INTRODUCCIÓN</p><p>El polimorfismo genético se refiere a la variación en la secuencia de ADN entre</p><p>individuos de una especie. Esta variabilidad puede manifestarse en diferentes</p><p>formas, como SNP (polimorfismos de un solo nucleótido), CNV (variaciones en</p><p>el número de copias) y microsatélites. El polimorfismo genético es fundamental</p><p>para la evolución y la adaptación de las especies, y también puede influir en la</p><p>susceptibilidad a enfermedades y la respuesta a fármacos.</p><p>2.0 OBJETIVOS</p><p>El objetivo general del trabajo sobre polimorfismos genéticos podría ser</p><p>investigar y entender la variabilidad genética dentro de una población, identificar</p><p>asociaciones entre variantes genéticas y enfermedades o características</p><p>fenotípicas, y contribuir al desarrollo de la medicina personalizada y la</p><p>prevención de enfermedades.</p><p>Los objetivos específicos del trabajo:</p><p>1. Identificar polimorfismos genéticos relevantes dentro de una población</p><p>específica mediante técnicas de genotipo y secuenciación de ADN. 2. Analizar</p><p>la asociación entre polimorfismos genéticos identificados y fenotipos de interés,</p><p>como enfermedades, rasgos clínicos o respuesta a tratamientos. 3. Investigar los</p><p>mecanismos moleculares subyacentes a las asociaciones observadas entre</p><p>polimorfismos genéticos y fenotipos, para comprender mejor la base genética de</p><p>las enfermedades y los rasgos complejos.</p><p>2.1 CONCEPTO DE POLIMORFISMOS</p><p>Los polimorfismos del ADN, variaciones genéticas que ocurren naturalmente en</p><p>la población, son un campo de gran interés en la medicina debido a su influencia</p><p>en la salud y la enfermedad. Estas variaciones pueden afectar la susceptibilidad</p><p>a enfermedades, la respuesta a los medicamentos y otros aspectos relacionados</p><p>con la salud de un individuo. En medicina, entender cómo estos polimorfismos</p><p>influyen en la biología humana es fundamental para personalizar tratamientos,</p><p>prevenir enfermedades y mejorar el bienestar general de las personas.</p><p>5</p><p>La genómica y la medicina personalizada están revolucionando la forma en que</p><p>abordamos la salud y la enfermedad. Los avances en tecnología de</p><p>secuenciación del ADN han permitido identificar una gran cantidad de</p><p>polimorfismos en el genoma humano, lo que nos brinda una comprensión más</p><p>profunda de la variabilidad genética dentro de la población. El polimorfismo del</p><p>ADN es la variación en la secuencia de nucleótidos del ADN entre individuos.</p><p>Estas variaciones pueden ocurrir en diferentes niveles, como en genes</p><p>específicos o en regiones no codificantes del genoma. Pueden tener una</p><p>importancia significativa en medicina legal por varias razones, como utilizan en</p><p>pruebas de identificación, como la huella genética o perfil genético, que son</p><p>fundamentales en la resolución de casos de identificación de personas en</p><p>medicina forense. La singularidad del perfil genético de un individuo permite su</p><p>identificación con una alta certeza, lo que es crucial en casos de desastres</p><p>naturales, accidentes o delitos. Los polimorfismos se emplean en pruebas de</p><p>paternidad para determinar la relación biológica entre un padre y un hijo. Estas</p><p>pruebas son fundamentales en casos de disputas de paternidad, herencia y</p><p>custodia legal. En casos de muerte donde la identificación o la causa de la</p><p>muerte están en duda, el análisis de polimorfismos del ADN puede ayudar a</p><p>determinar la identidad de la víctima y proporcionar información sobre la relación</p><p>entre el fallecido y los sospechosos. En la investigación criminal, el análisis de</p><p>polimorfismos del ADN puede ayudar a vincular evidencia biológica encontrada</p><p>en la escena del crimen con un sospechoso o a exonerar a personas inocentes.</p><p>Los polimorfismos del ADN también se utilizan en estudios de población para</p><p>comprender la variabilidad genética entre diferentes grupos étnicos y</p><p>geográficos.</p><p>Estos estudios pueden proporcionar información importante para la medicina</p><p>forense en la identificación de restos humanos en casos de desastres o en la</p><p>reconstrucción de la historia genética de una población. Los polimorfismos del</p><p>ADN desempeñan un papel crucial en la medicina legal al proporcionar</p><p>herramientas para la identificación de individuos, la determinación de la</p><p>paternidad, el establecimiento de la causa de la muerte, la investigación de</p><p>delitos y los estudios de población. Su alta variabilidad y capacidad para</p><p>distinguir entre individuos los convierten en una herramienta invaluable en la</p><p>6</p><p>resolución de casos forenses y en la administración de justicia.</p><p>2.2</p><p>APLICACIÓN DE LOS POLIMORFISMOS</p><p>El polimorfismo de ADN se refiere a las variaciones genéticas que ocurren</p><p>naturalmente en las secuencias de ADN entre individuos de la misma especie.</p><p>Estas variaciones pueden incluir sustituciones de nucleótidos, deleciones o</p><p>inserciones de segmentos de ADN. Estos polimorfismos genéticos son</p><p>fundamentales para la diversidad genética dentro de una población y tienen</p><p>varias aplicaciones en genética y biología molecular. Estas son algunas de las</p><p>principales aplicaciones de los polimorfismos de ADN:</p><p>1. Estudios de Genética Poblacional: Los polimorfismos de ADN se utilizan</p><p>para estudiar la diversidad genética entre poblaciones humanas o de otras</p><p>especies. Esto es útil para comprender la evolución, la migración y la historia de</p><p>la población.</p><p>2. Identificación de marcadores genéticos: Ciertos polimorfismos de ADN,</p><p>como Single Nucleotide Polymorphisms (SNP), se utilizan como marcadores</p><p>genéticos en estudios de asociación genética, mapeo genético y estudios de</p><p>herencia de características.</p><p>3. Diagnóstico genético: Los polimorfismos de ADN pueden estar asociados a</p><p>enfermedades genéticas o a la susceptibilidad a ciertas condiciones. Las</p><p>pruebas genéticas que identifican polimorfismos específicos se utilizan para</p><p>diagnosticar condiciones genéticas.</p><p>4. Determinación del parentesco: Los análisis de polimorfismos de ADN, como</p><p>las pruebas de ADN para determinar la paternidad o la maternidad, utilizan</p><p>variaciones genéticas para establecer relaciones familiares.</p><p>5. Farmacogenética: Ciertos polimorfismos de ADN influyen en la respuesta de</p><p>los individuos a los medicamentos. Estudios farmacogenéticos utilizan estas</p><p>variaciones para personalizar el tratamiento médico.</p><p>6. Evolución molecular: El estudio de los polimorfismos de ADN en diferentes</p><p>especies ayuda a comprender la evolución molecular y la relación genética entre</p><p>organismos. Estas son solo algunas de las muchas aplicaciones de los</p><p>polimorfismos de ADN en la genética y la biología molecular, lo que demuestra</p><p>7</p><p>la importancia de estas variaciones genéticas en la comprensión de la diversidad</p><p>biológica y la aplicación de conocimientos en diferentes áreas de la ciencia.</p><p>2.3 APLICACIÓN MEDICO LEGAL DE LOS POLIMORFISMOS EN</p><p>INVESTIGACION DE LA PATERNIDAD.</p><p>El análisis de los polimorfismos de ADN ha supuesto un cambio radical en las</p><p>posibilidades del laboratorio de Genética forense. En la investigación de la</p><p>paternidad antes del desarrollo de esta nueva metodología, se solucionaban la</p><p>casi totalidad de los casos con los marcadores clásicos. Sin embargo, el uso de</p><p>polimorfismos del ADN ha simplificado la prueba, la ha hecho más barata y</p><p>ofrece, además, mayor posibilidades en casos difíciles como aquellos en los que</p><p>el presunto padre ha fallecido y hay que realizar la investigación de la paternidad</p><p>a través de restos cadavéricos o de familiares directos del mismo, o en los</p><p>diagnósticos prenatales de paternidad (en casos de violación, por ejemplo).</p><p>Todos estos casos eran difícilmente abordables con la metodología anterior al</p><p>descubrimiento de los polimorfismos de ADN repetitivo.</p><p>2.4 APLICACIÓN MEDICO LEGAL DE LOS POLIMORFISMOS EN</p><p>INVESTIGACION DE LA IDENTIFICACIÓN DE RESTOS OSEOS.</p><p>La aplicación médico-legal de los polimorfismos en la investigación de la</p><p>identificación de restos óseos ofrece una gran herramienta para la resolución de</p><p>casos forenses, proporcionando información crucial sobre la identidad,</p><p>ascendencia, características físicas y relaciones familiares de individuos</p><p>fallecidos. Esta información puede ser fundamental en la investigación de casos</p><p>criminales, la identificación de víctimas de catástrofes y la resolución de disputas</p><p>legales relacionadas con la identidad y el parentesco. La rama de la Medicina</p><p>Forense responsable de la identificación de cadáveres o restos cadavéricos es</p><p>la Antropología Forense. El uso de la identificación antropológica se torna</p><p>necesario de forma secundaria, cuando la comparación por medio de huellas</p><p>digitales no es viable o es dificultada por diversas razones, como cuerpos en</p><p>avanzado estado de descomposición, casos en que el autor haya contribuido de</p><p>alguna forma para dificultar la identificación del cadáver, muchas veces</p><p>8</p><p>mutilando áreas útiles para comparaciones de identificación, cuerpos</p><p>momificados o esqueléticos, entre otros.</p><p>La recuperación y el análisis de material genético de tejidos esqueléticos</p><p>humanos, como dientes y huesos, se ha convertido en la herramienta de</p><p>investigación central en campos científicos que van desde el estudio del ADN</p><p>antiguo hasta las ciencias forenses y médicas (ADLER et al., 2011). En este</p><p>contexto, la fase más crucial de un examen de identificación genética humana</p><p>es la extracción y purificación del ADN. Durante esta etapa del examen, el</p><p>objetivo principal es separar el material genético de las demás moléculas</p><p>presentes en el interior de la célula y en el núcleo celular, garantizando así su</p><p>aislamiento. Mediante este proceso, se eliminan todas las macromoléculas y el</p><p>contenido celular, lo que permite el aislamiento del ADN y garantiza la obtención</p><p>de la cantidad, calidad y pureza de ADN necesarias para el éxito del genotipado,</p><p>que es el objetivo final del análisis (BUDOWLE & BROW, 2001).</p><p>Las etapas de la aplicación de los pleomorfismos genéticos en la identificación</p><p>del ADN incluyen:</p><p> Obtención de la muestra: En primer lugar, es necesario obtener una</p><p>muestra de tejido óseo. Esto puede hacerse en casos forenses, cuando</p><p>se recuperan huesos de escenas de crímenes, desastres naturales, en</p><p>escenarios de crímenes o en situaciones en las que se encuentran restos.</p><p> Extracción de ADN de muestras de tejido óseo: Consiste en eliminar</p><p>el material mineralizado del hueso y descomponer las células para liberar</p><p>el ADN. La descalcificación se basa en eliminar la parte inorgánica del</p><p>tejido óseo para extraer el calcio y permitir el acceso a la parte orgánica</p><p>del hueso. Para ello, las técnicas más utilizadas incluyen el uso de ácidos</p><p>fuertes, que dan lugar a la formación de sales de calcio solubles, y</p><p>agentes quelantes, que se unen a los iones de calcio, haciendo que la</p><p>parte orgánica del hueso sea más flexible y fácil de extraer (BALAYAN et</p><p>al., 2015).</p><p> Amplificación de regiones: Tras la extracción, las regiones específicas</p><p>del ADN que contienen los polimorfismos genéticos de interés se</p><p>amplifican mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Estas</p><p>regiones pueden incluir marcadores genéticos utilizados para la</p><p>9</p><p>identificación individual, la determinación de la ascendencia o las</p><p>características físicas.</p><p> Análisis de polimorfismos: Una vez amplificados, los fragmentos de</p><p>ADN se analizan para identificar los polimorfismos genéticos presentes.</p><p>Para ello se pueden utilizar diversas técnicas, como la secuenciación del</p><p>ADN, el análisis de fragmentos de ADN (como la electroforesis en gel) o</p><p>técnicas más avanzadas, como el genotipado mediante arrays de ADN.</p><p> Comparación e interpretación: Los resultados de los polimorfismos</p><p>genéticos se comparan con bases de datos genéticos para la</p><p>identificación individual o para determinar características ancestrales.</p><p>También pueden compararse con muestras de referencia de posibles</p><p>parientes para investigaciones de parentesco.</p><p> Interpretación forense: Por último, los resultados del análisis genético</p><p>se interpretan en el contexto del caso forense en cuestión. Esto puede</p><p>implicar la confirmación de la identidad de una persona, la determinación</p><p>de características físicas relevantes para la investigación o el</p><p>establecimiento de relaciones familiares.</p><p>La aplicación de polimorfismos genéticos en la identificación de restos óseos</p><p>sigue una serie de etapas, desde la obtención de la muestra hasta la</p><p>interpretación de los resultados en un contexto forense. Este enfoque</p><p>multidisciplinar y tecnológicamente avanzado ofrece una herramienta</p><p>prometedora para la resolución de casos forenses y contribuye</p><p>significativamente a la obtención de justicia y al esclarecimiento de diversas</p><p>situaciones.</p><p>2.5 APLICACIÓN MÉDICO LEGAL DE LOS POLIMORFISMOS EN</p><p>LA INVESTIGACIÓN CRIMINALÍSTICA</p><p>La criminalística biológica es la aplicación médico legal más transcendente</p><p>(significativa) del polimorfismo del ADN. Sobre todo, mediante la prueba de PCR</p><p>donde un individuo puede ser identificado con un alto grado de seguridad</p><p>(posibilidad media de coincidencias de 1 en 10 billones de personas) a través de</p><p>pequeños vestigios como un pelo o un simple esperma.</p><p>10</p><p>Con el incremento de la aplicación médico legal en la investigación criminalística</p><p>hoy, a partir de un único cabello o de un mínimo número de espermatozoides</p><p>recogidos en la cavidad bucal o hasta una mancha ya envejecida y minúscula de</p><p>sangre se puede encontrar datos de gran valía sobre el origen de ese vestigio,</p><p>lo que era poco probable hace pocosaños.</p><p>Sabemos que el genoma mitocondrial contiene información de gran utilidad. Y</p><p>para las ocasiones jurídicas juega papel decisivo (judicialmente) para el</p><p>establecimiento de la identidad o fuente de un determinado espécimen biológico,</p><p>sea la sangre, saliva, semen ,piel o pelo. Siendo así, el ADN tiene un papel</p><p>crucial en la identificación criminal. En el campo forense se utiliza básicamente</p><p>STRs de 4bp y 5bp en la unidad de repetición.</p><p>La aplicación del polimorfismo del ADN es fundamentalmente importante en los</p><p>delitos contra la libertad sexual. Crímenes que poseen una gran tasa de</p><p>reincidencia y en los que ante la negativa del sospechoso no suelen existir más</p><p>pruebas indiciarias que las que ya están disponibles a través de posibles restos</p><p>de esperma en prendas y en cavidad vaginal o anal. El esperma recolectado de</p><p>manera adecuada en la escena del hecho es un vestigio idóneo para el análisis</p><p>de ADN y los marcadores clásicos adoptados, son de utilidad en los procesos de</p><p>acceso carnal abusivo.</p><p>Una de las grandes ventajas de la aplicación de los polimorfismos del ADN es la</p><p>posibilidad de su estudio a cualquier tipo de muestra biológica donde haya</p><p>presencia de células de sangre, pelos, saliva, esperma, huesos, dientes, etc.; y</p><p>a partir de cantidades muy pequeñas. La utilización de bancos de datos de</p><p>potenciales delincuentes con polimorfismos ADN, ha permitido reducciones</p><p>espectaculares de las cifras de criminalidad y del número de delitos resueltos en</p><p>países como el Reino Unido.</p><p>2.6 CONCEPTO DE ADN</p><p>El ADN (ácido desoxirribonucleico) es un ácido nucleico que se relaciona con la</p><p>herencia, pues presenta información genética de cada individuo y garantiza su</p><p>transmisión, es esencial para transmitir nuestras características a nuestra</p><p>descendencia. Es lo que determina el fenotipo de los individuos. En los</p><p>organismos eucariotas, esta molécula se almacena en el núcleo, donde se</p><p>11</p><p>organiza en cromosomas, y también en las mitocondrias.</p><p>El ADN está formado por varios nucleótidos unidos entre sí mediante enlaces</p><p>fosfodiéster establecidos entre el azúcar de un nucleótido y el fosfato del otro.</p><p>Cada nucleótido tiene una constitución básica, estando formado por:</p><p> Un azúcar pentosa (azúcar de cinco carbonos)</p><p> Una base nitrogenada</p><p> Un radical fosfato</p><p>El ADN fue descubierto en el siglo XIX por Johann Friedrich Miescher, pero la</p><p>estructura de esta molécula recién fue anunciada por James D. Watson y Francis</p><p>H. Crick, en 1953, en la revista Nature. Sin duda, este fue uno de los mayores</p><p>descubrimientos de la Biología.</p><p>El modelo propuesto por Watson y Crick describe el ADN como una molécula</p><p>formada por dos largos filamentos que se enrollan y forman una estructura similar</p><p>a una espiral. El modelo que propusieron se llama doble hélice.</p><p>2.7 ADN REPETITIVO EN TANDEM</p><p>El ADN repetitivo en tandem está formado por bloques de ADN que se repiten</p><p>consecutivamente y se suele dividir en ADN satélite, ADN minisatélite y ADN</p><p>microsatélite. El ADN minisatélite y microsatélite, que son los utilizados con fines</p><p>forenses, consisten en repeticiones de fragmentos de ADN de número variable,</p><p>por lo que genéricamente se denominan VNTR (&quot;variable number of</p><p>tandem repeats&quot;). La repeticiones en el ADN microsatélite son de tamaño</p><p>pequeño (de 2 a 6 pares de bases) por lo que se suelen denominar STRs</p><p>(&quot;short tandem repeats&quot;). Las repeticiones en un locus minisatélite</p><p>tienen un tamaño entre 15 y 50 pares de bases para un total de 300 bp hasta 20</p><p>12</p><p>Kb. El tamaño total de los STRs es de 50 bp a 500 bp. 3 Poniendo un ejemplo,</p><p>un STR puede tener una estructura como ACTT ACTT ACTT ACTT ACTT ACTT</p><p>ACTT ACTT...hasta un número n de repeticiones. Los individuos nos</p><p>diferenciamos por el número de repeticiones de esa secuencia. Un individuo 8-</p><p>12 para ese STR significa que tiene 8 veces la unidad de repetición (ACTT) en</p><p>un lugar específico de un cromosoma (locus génico) y 12 veces en el locus</p><p>correspondiente del cromosoma homólogo.</p><p>El polimorfimo en los microsatélites y minisatélites se basa principalmente en el</p><p>número de repeticiones. Los minisatélites y microsatélites además de ser</p><p>extraordinariamente polimórficos, poseen una herencia mendeliana simple. Esto</p><p>significa que el individuo 8-12, que antes pusimos de ejemplo, ha heredado uno</p><p>de los alelos de su madre y otro de su padre biológico. En el campo forense</p><p>utilizamos básicamente STRs de 4bp y 5bp en la unidad de repetición. Los de</p><p>menos repeticiones son muy propensos a artefactos (bandas tartamudas) lo que</p><p>dificulta la interpretación de perfiles de ADN obtenidos a partir de mezclas de</p><p>diferentes individuos.</p><p>Además de los STRs en cromosomas autosómicos son de gran importancia los</p><p>STRs de cromosoma Y particularmente para el caso de agresiones sexuales.</p><p>También, como ya veremos no sólo el ADN nuclear es interesante, sino que</p><p>desde el punto de vista forense es de gran importancia forense el análisis de</p><p>ADN mitocondrial (regiones hipervariables HV1 y HV2 en el bucle D) pues es</p><p>más eficaz en muestras degradadas y es el único polimorfismo que se puede</p><p>analizar en cabellos sin bulbo, que son vestigios que aparecen con mucha</p><p>frecuencia en la escena de delitos. Los SNPs (polimorfimos puntuales de</p><p>secuencia), tanto de cromosomas autosómicos, cromosoma Y y ADN</p><p>mitocondrial, tienen, como veremos, una enorme importancia en la práctica</p><p>forense.</p><p>2.8 POLIMORFISMOS DE ADN MITOCONDRIAL</p><p>El ADN mitocondrial (ADNmt) es un marcador genético de interés en estudios</p><p>forenses, especialmente debido a que una sola célula tiene más de 5.000 copias</p><p>de ADNmt, asociado a la resistencia del ADNmt de estructura circular a la</p><p>13</p><p>digestión enzimática. Por tanto, el análisis de este tipo de ADN resulta</p><p>excepcional en el estudio de tejidos antiguos e incluso arqueológicos, como</p><p>huesos, dientes y cabellos.</p><p>La mayor parte del ADN humano se encuentra en el núcleo celular, más</p><p>concretamente en los cromosomas. El ADNmt es de origen extranuclear y su</p><p>genoma circular se encuentra dentro de las mitocondrias (proveedoras de</p><p>energía) que se encuentran en el citoplasma de las células (Fig. 1). Debido a su</p><p>ubicación, está presente en grandes cantidades en las células (mucho más que</p><p>el ADN en el núcleo celular).</p><p>Figura 1 – Célula con mitocôndrias.</p><p>Este ADN ha sido secuenciado completamente y la región que tiene variaciones</p><p>de secuencia se llama región de control. Una de las características de interés es</p><p>su carácter monoclonal, teniendo prácticamente todo el ADNmt de un individuo</p><p>la misma secuencia. Sin embargo, puede existir una condición llamada</p><p>heteroplasmia cuando la misma persona tiene más de un tipo de ADNmt. Por lo</p><p>tanto, el análisis de las hebras de cabello puede arrojar resultados diferentes o</p><p>ambiguos.</p><p>El ADNmt es un patrón</p><p>de herencia materna, es decir, la secuencia es idéntica</p><p>para todos los miembros de la familia por parte de la madre (herencia matrilineal),</p><p>lo que significa que tenemos identidad con nuestros hermanos y parientes</p><p>cercanos a través del linaje materno.</p><p>La metodología utilizada en el análisis del ADN mitocondrial es la amplificación</p><p>del ADN mitocondrial (región control) mediante PCR, seguida de la</p><p>secuenciación automática (Fig. 2) de las regiones HV1 y HV2, que son las</p><p>regiones que varían de una persona a otra. permitiendo la identificación del</p><p>14</p><p>individuo.</p><p>Figura 2 – La secuenciación del ADN mitocondrial nos permite conocer el</p><p>genotipo del individuo mediante la lectura de cada base de ADN en las regiones</p><p>HV1 y HV2.</p><p>El interés del análisis de ADNmt radica en la identificación de personas, cuando</p><p>la sangre de los familiares puede ayudar en la investigación de laboratorio, como</p><p>en los casos de identificación de personas desaparecidas en comparación con</p><p>sus familiares.</p><p>Se utiliza para la identificación humana en casos forenses cuando el material</p><p>biológico está degradado (incendios, catástrofes aéreas), no presenta o tiene</p><p>poca cantidad de ADN nuclear (fragmentos de cabello sin bulbo), es muy antiguo</p><p>o se encuentra en estado avanzado grado de descomposición. Esta metodología</p><p>no ayuda a la investigación de paternidad.</p><p>El análisis del ADNmt ha ayudado a resolver varios casos de genética forense,</p><p>siendo utilizado con éxito por laboratorios de Estados Unidos y Europa. Además,</p><p>permitió esclarecer casos considerados imposibles de resolver.</p><p>Se utilizaron exámenes antropológicos forenses y análisis de ADN para resolver</p><p>los casos de soldados muertos en la Segunda Guerra Mundial y aún no</p><p>identificados.</p><p>Se utilizaron exámenes antropológicos realizados a restos humanos</p><p>15</p><p>encontrados en búsquedas de campo para establecer el número mínimo de</p><p>individuos y la descripción de enfermedades, tratamientos, anomalías o lesiones</p><p>de los esqueletos. Las pruebas de ADN se realizaron extrayendo ADN de huesos</p><p>pulverizados y muestras de sangre de familiares. Se utilizaron comparaciones</p><p>de secuencias de ADN, junto con pruebas circunstanciales, para conectar a los</p><p>miembros de la familia. Hasta la fecha, se han encontrado y repatriado los</p><p>esqueletos restantes de aproximadamente mil soldados.</p><p>2.9 CONCEPTO DE PRUEBA DE ADN</p><p>Se puede realizar una prueba de ADN mediante la técnica de la huella genética.</p><p>Esta técnica, también conocida como perfilado de ADN o huella genética, se</p><p>basa en el análisis de regiones específicas del ADN de un individuo que</p><p>contienen secuencias muy variables, conocidas como regiones polimórficas.</p><p>El proceso de creación de una huella digital de ADN implica los siguientes pasos:</p><p>Recolección de muestras: se recolecta una muestra de ADN del individuo,</p><p>generalmente a través de un hisopo de la mejilla, una muestra de sangre u otro</p><p>material biológico. En el caso de una prueba de paternidad, es necesario recoger</p><p>no sólo muestras de material genético del supuesto padre y del hijo, sino también</p><p>de la madre, ya que la mitad del material genético del hijo se hereda. de la madre.</p><p>Extracción de ADN: el ADN se extrae de la muestra recolectada, aislando el</p><p>material genético de otros componentes celulares.</p><p>Enzimas de Restricción: Luego de la extracción, el ADN de cada individuo se</p><p>pone por separado en contacto con enzimas de restricción ampliamente</p><p>utilizadas en Ingeniería Genética. Estas enzimas tienen la capacidad de escindir</p><p>(romper) la molécula de ADN al encontrar secuencias específicas de pares de</p><p>bases, formando así un conjunto de moléculas de ADN separadas en varios</p><p>trozos de diferentes tamaños.</p><p>PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa): La Reacción en Cadena de la</p><p>Polimerasa se utiliza para amplificar regiones específicas del ADN. Esta técnica</p><p>crea millones de copias del ADN objetivo, lo que facilita el análisis.</p><p>Electroforesis en gel: los fragmentos de ADN amplificados se separan por</p><p>tamaño mediante electroforesis en gel. Esta técnica separa los fragmentos</p><p>16</p><p>según su longitud, creando un patrón de bandas único.</p><p>Análisis de ADN: el patrón resultante de bandas de ADN se analiza y se</p><p>compara con otras muestras de ADN. El patrón es único para cada individuo,</p><p>excepto para los gemelos idénticos que comparten el mismo ADN.</p><p>Equipo de electroforesis en gel. (figura 1,2 Y 3).</p><p>Ejemplo de gel de electroforesis teñido. Las bandas ubicadas en la parte superior</p><p>del gel son fragmentos de ADN más grandes y las bandas ubicadas en la región</p><p>inferior del gel son fragmentos de ADN más pequeños. Ejemplo de gel de</p><p>electroforesis teñido. Las bandas ubicadas en la parte superior del gel son</p><p>fragmentos de ADN más grandes y las bandas ubicadas en la región inferior del</p><p>gel son fragmentos de ADN más pequeños. (figura 2).</p><p>Ejemplo de gel de electroforesis para pruebas de paternidad. En este gel, el hijo</p><p>recibió un alelo marcado en verde de su madre y recibió un alelo marcado en</p><p>verde de su padre. (figura 3).</p><p>3.0 ETAPAS DE LA PRUEBA DE ADN EN EL LABORATORIO</p><p>FORENSE</p><p>La prueba de ADN aplicada a criminalística tiene, como hemos visto hasta ahora,</p><p>cuatro etapas básicas:</p><p>1. Análisis laboratorial de la muestra, lo que incluye analizar el mayor número de</p><p>polimorfismos de ADN posible, obteniendo así un perfil genético de la muestra</p><p>objeto de análisis.</p><p>2. Comparación de los resultados con los obtenidos en el inculpado o en la</p><p>víctima. Ello implica que si aparece un vestigio biológico en la víctima la</p><p>comparamos con el análisis genético del agresor, o bien, si, por ejemplo, aparece</p><p>una mancha de sangre en el agresor la comparamos con la sangre de la víctima.</p><p>17</p><p>3. Puede entonces ocurrir que los patrones sean diferentes en uno o más grupos</p><p>con lo que concluiremos que ese vestigio biológico no se corresponde con el</p><p>individuo con el que lo comparamos.</p><p>Pero puede suceder que los polimorfismos de ADN analizados en el vestigio se</p><p>correspondan con el individuo con el que se compararan. Entonces hay que</p><p>valorar la probabilidad de que ese vestigio provenga de ese individuo lo que</p><p>depende de la frecuencia de esos grupos en la población. La tercera etapa del</p><p>análisis es pues la valoración probabilística de la prueba en el caso de</p><p>coincidencia de patrones.</p><p>4. Por último la emisión del correspondiente informe médico-legal y, en su caso,</p><p>la comunicación de los resultados en el juicio oral.</p><p>Estas etapas de análisis laboratorial que concluyen en el informe médico-legal</p><p>tienen un precedente básico que es la correcta recogida y envío del vestigio al</p><p>laboratorio médico-legal. Estos aspectos han cobrado una importancia</p><p>considerablemente mayor porque el valor de la prueba es, en ocasiones,</p><p>trascendente. Así, aspectos frecuentemente descuidados, como la denominada</p><p>"cadena de custodia" del vestigio, han pasado a tener una enorme</p><p>trascendencia.</p><p>Del mismo modo, con la importancia que la prueba posee en los delitos contra la</p><p>libertad sexual, el que se analice el esperma en un porcentaje mínimo de los</p><p>delitos denunciados y que no llegue muchas veces en buenas condiciones a los</p><p>laboratorios forenses debería ser inmediatamente corregido.</p><p>18</p><p>4.0 CONCLUSIÓN</p><p>En conclusión, los polimorfismos genéticos son variaciones naturales en la</p><p>secuencia del ADN que ocurren dentro de una población. Estas variaciones son</p><p>la base de la diversidad genética y pueden influir en una amplia gama de</p><p>características biológicas, incluyendo rasgos físicos, susceptibilidad a</p><p>enfermedades y respuesta a medicamentos. El estudio de los polimorfismos</p><p>genéticos es fundamental en campos como la genética humana, la medicina</p><p>personalizada, la biología evolutiva. Comprender la naturaleza y el impacto de</p><p>estos polimorfismos es crucial para avanzar en nuestra comprensión</p><p>de la salud</p><p>y la enfermedad, así como para desarrollar estrategias de tratamiento y</p><p>prevención más precisas y efectivas.</p><p>19</p><p>5.0 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS</p><p>1. Exame de DNA: entenda o que é e como funciona [Internet]. [place</p><p>unknown]; 2023 Sep 15 [cited 2024 Apr 12]. Available from:</p><p>https://querobolsa.com.br/enem/biologia/exame-de-dna</p><p>2. GENÉTICA FORENSE [Internet]. [place unknown]; 2008 Mar 11.</p><p>GENÉTICA FORENSE; [cited 2024 Apr 12]; Available from:</p><p>https://www.um.es/biomybiotec/web/Seminarios/2008/papers/MV_Lareu</p><p>_clase_genetica_forense.p</p><p>3. de Freitas Rodolfo Barbosa. SISTEMAS DE IDENTIFICAÇÃO HUMANA</p><p>NO ÂMBITO CRIMINAL [Trabalho de conclusão de curso]. Campina</p><p>Grande - PB: UEPB - UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARAÍBA; 2013.</p><p>SISTEMAS DE IDENTIFICAÇÃO HUMANA NO ÂMBITO CRIMINAL;</p><p>CURSO DE PÓS – GRADUAÇÃO EM NÍVEL DE ESPECIALIZAÇÃO EM</p><p>SEGURANÇA</p><p>PÚBLICA.http://dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/11024</p><p>/1/PDF%20-%20Rodolfo%20Barbosa%20de%20Freitas.pdf</p><p>4. BUDOWLE, B. & BROWN, B. L. The use of DNA typing for forensic</p><p>identification.Forénsica, v.1, n. 1, p. 23-37, 2001</p><p>5. BALAYAN, Ajay.; KAPOOR, Abhilasha.; CHAUDHARY, Garima.; RAINA,</p><p>Anupuma. Evaluation of techniques for human bone decalcification and</p><p>amplification using sixteen STR markers. Egyptian Journal of Forensic</p><p>Sciences. (2015) 5, 30–35</p><p>6. ADLER, C. J.; HAAK, W.; DONLON, D.; COOPER, A.; Survival and</p><p>recovery of DNA from ancient teeth and bones. Journal of Archaeological</p><p>Science. 38 (2011) 956-964</p><p>7. Pierce B. Genética forense. 3ª ed. España: Ed. medica panamericana;</p><p>2009. Díaz M. Tesis para obtener el título de Químico Farmacéutico</p><p>Biólogo. Avances de la genética forense. Mexico: Universidad Nacional</p><p>Autónoma de México; 2011.</p><p>8. Bernarth V. El ADN como herramienta para la resolución de procesos</p><p>judiciales. Pasado, presente y futuro. Química Viva. 2008; 2, 7. 103-112.</p><p>9. Corella D, Ordovas JM. Conceptos básicos en biología molecular</p><p>relacionados con la genética y la epigenética. Revista Española de</p><p>Cardiología [Internet]. 2017 Sep [cited 2019 Sep 5];70(9):744–53.</p><p>20</p><p>https://querobolsa.com.br/enem/biologia/exame-de-dna</p><p>https://www.um.es/biomybiotec/web/Seminarios/2008/papers/MV_Lareu_clase_genetica_forense.p</p><p>https://www.um.es/biomybiotec/web/Seminarios/2008/papers/MV_Lareu_clase_genetica_forense.p</p><p>http://dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/11024/1/PDF%20-%20Rodolfo%20Barbosa%20de%20Freitas.pdf</p><p>http://dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/11024/1/PDF%20-%20Rodolfo%20Barbosa%20de%20Freitas.pdf</p><p>Available from: https://www.revespcardiol.org/es-conceptos-basicos-</p><p>biologia-molecular- relacionados-articulo-S0300893217302221</p><p>10. Carracedo A, Salas A, Lareu MV. Problemas y retos de futuro de la</p><p>genética forense en el siglo XXI. Cuadernos de Medicina Forense. 2010</p><p>Jun;16(1-2).</p><p>11. Luis Hombreiro Noriega. El ADN de Locard: genética forense y</p><p>criminalística. Madrid: Reus; 2013.</p><p>12. Pérez RM. Fundamentos de la medicina forense. Editorial UOC; 2016.</p><p>21</p><p>https://www.revespcardiol.org/es-conceptos-basicos-biologia-molecular-%20relacionados-articulo-S0300893217302221</p><p>https://www.revespcardiol.org/es-conceptos-basicos-biologia-molecular-%20relacionados-articulo-S0300893217302221</p><p>FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE MEDICINA</p><p>Aprobada por ley 3153 del 14/12/06</p><p>Aprobado por el CONES resolución N.577/18</p><p>Sede II Ciudad Del Este</p>