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Impresso por Samuel Bonamichi, E-mail bau_piquete@hotmail.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 03/10/2023, 12:13:55 BIOTECNOLOGIA E REPRODUÇÃO DO MACHO- EXAME ANDROLÓGICO EXAME ANDROLÓGICO É um exame andrológico específico do trato genital masculino. Função do trato genital masculino: produção e maturação e condução dos gametas, hormônios, liquido seminal, cópula. No exame andrológico é avaliado se todas essas funções são exercidas. - O exame andrológico é requerido em várias situações especificas, sejam de origem obrigatória, ou por solicitação do produtor mesmo. Origem obrigatória: seleção de reprodutores, touros em centrais de IA, criopreservação de espermatozoides, venda de reprodutores. *os touros para entrar em centrais é necessário um laudo andrológico afirmando que ele é fértil. *garanhões que vão criopreservar o sêmen também tem a necessidade de fazer o exame andrológico, para saber se é apto para reprodução (fértil) e se a qualidade do sêmen é suficiente para o processo de criopreservação. *além disso, toda venda de reprodutores é necessário que proprietário que está vendendo permita que ele tenha o laudo do exame andrológico para comprovar que o animal de fato está apto para reprodução e tem as características mínimas que o Conselho de Reprodução Animal exija para que seja um reprodutor. É UM MÉDICO VETERINÁRIO QUE FAZ E ASSINA O LAUDO DO EXAME ANDROLÓGICO. GCP Gota Citoplasmática Proximal; GCD Gota Citoplasmática Distal.– – *na cabeça do epidídimo começa a sofrer a maturação espermática ; Da cauda do epidídimo quando o animal realiza a monta/cópula e acontece a ejaculação esses – – espermatozoides eles vão seguir pelo ducto deferente até a pelve do animal, chegando na uretra pélvica o espermatozoide é diluído pelo liquido seminal (que é produzido pelas glândulas sexuais acessórias que – tem substratos metabólicos importante para o metabolismo e sobrevivência do espermatozoide e também contém proteínas que vão aderir a membrana plasmática do espermatozoide para evitar a capacitação precoce). O sêmen segue pela uretra peniana e durante a ereção o macho realiza a cópula e ejacula no trato reprodutivo da fêmea. EXAME ANDROLÓGICO: - Identificação do animal ; - Exame físico geral; - Exame físico específico; - Espermiograma; Impresso por Samuel Bonamichi, E-mail bau_piquete@hotmail.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 03/10/2023, 12:13:55 - Diagnóstico/conclusão. Identificação do animal: dados do proprietário, nome/registro, idade, espécie, raça. Exame físico específico: inspeção e palpação. Genitália externa: - Escroto mobilidade, sensibilidade, ectoparasitas, dermatites, lesões/cicatrizes. *as dermatites devem ser contidas, pois a inflamação causa calor e aquece o escroto e consequentemente o testículo, causando degeneração testicular que afeta a qualidade seminal/fertilidade do reprodutor. *as lesões e cicatrizes antigas devem ser anotadas pois fisicamente pode estar normal e na avaliação seminal encontrar alguma anormalidade e pode ser justificada por lesões ou cicatrizes antigas. - Testículos, epidídimos presentes no escroto criptorquidia, simetria biometria, consistência tenso- – – – elástica, mobilidade, temperatura, dor. *animal criptorquida deve ser descartado do programa de reprodução pois é característica hereditária. *a simetria testicular é muito importante mensurar, pois é comum a hipoplasia testicular que é uma característica hereditária portanto, não é bem vinda ao programa de reprodução. e, - Prepúcio, pênis; Genitália interna: palpação. - Gl. Bulbouretrais, - Próstata, - Gl. Vesiculares. 1-dermatite testicular; 2, 3 e 6-assimetria testicular pode ser que um deles apresente alteração na – consistência; 5-prepucio e escroto edemaciado; 4-ausência de um testículo e está pendiculoso o que não é muito normal para a espécie equina. Biometria testicular: - Perímetro escrotal (PE): herdabilidade, repetibilidade, correlações. seleção de touros jovens; produção espermática e concentração espermática; morfologia espermática; precocidade sexual (macho e fêmeas); peso ao nascimento, desmame; longevidade de fêmeas (stayabilite). *mede a circunferência do testículo na maior circunferência do testículo. – Impresso por Samuel Bonamichi, E-mail bau_piquete@hotmail.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 03/10/2023, 12:13:55 - Comprimento e largura | Altura em equinos e cães: é feito com o paquímetro. Serve para ver se realmente os testículos são simétricos ou assimétricos. Causas de assimetria testicular: hipoplasia testicular (hereditária); degeneração testicular; orquite; neoplasias; hérnia. *no comprimento, é excluído a calda do epidídimo. - Altura em equinos e cães: nesses animais é mensurado o comprimento, largura e altura e não se mensura PE. *é importante lembrar que no equino, o testículo assume sua posição horizontal e o epidídimo se encontra dorsalmente. Em animais que visualmente tem testículos assimétricos ele são descartados da reprodução independente do motivo que levou a essa assimetria e não pode ser vendido como reprodutor. Nos bovinos, tem se uma margem em que os animais são considerados normais de acordo com a mensuração do PE, para serem aptos para reprodução. - essa mensuração varia de autor para autor, de raça para raça. Os animais são avaliados normalmente aos 18 meses de idade: PE > 28cm : ideal. 26 > PE <28cm: reavaliação aos 24 meses. PE <26cm: descarte. Impresso por Samuel Bonamichi, E-mail bau_piquete@hotmail.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 03/10/2023, 12:13:55 Epidídimos: faz a inspeção e palpação da cabeça, corpo e cauda do epidídimo. Avalia o tamanho, simetria, consistência e dor. *se o animal está em serviço a cauda do epidídimo vai estar maior, porem a consistência deve estar normal. Prepúcio: é avaliado o tamanho, angulação (45°) e patologias como parasitas, abcesso, edemas, aderências, inflamação-postite, papilomas. *o tamanho depende da raça: os zebuínos tem o prepúcio mais alongado, enquanto os taurinos têm o prepúcio mais curto. E durante o exame deve ser anotado se o prepúcio do animal é longo, médio ou curto. (abaixo da linha do jarrete longo; colado ao ventre curto). Sendo que os animais de prepúcios – – longos são mais propícios a lesões. Em alguns casos em que há muito edema pode obstruir o óstio prepucial fazendo com que acumule urina no interior do óstio. Pênis: realizar a exposição do pênis. Verificar se há presença de lesões, parasitas, edema, neoplasias, má formações. Impresso por Samuel Bonamichi, E-mail bau_piquete@hotmail.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 03/10/2023, 12:13:55 Em animais jovens é normal ter o frênulo peniano que na primeira monta já deve ter sumido, porém, se persistir diz-se então que o animal é tardio sexualmente. Glândulas sexuais acessórias: é responsável pela produção do plasma seminal. São elas: glândulas bulbouretrais, próstata, glândulas vesiculares, ampolas. São avaliadas através da palpação transretal, principalmente as glândulas vesiculares. *as glândulas vesiculares estão susceptíveis à inflamação vesiculite principalmente em animais de – – confinamento porque dentro do confinamento sempre tem a formação de hierarquia entre os touros, – tendo o animal dominante e o submisso e o animal dominante tenta cobrir o animal submisso, e nessa tentativa de cobertura podeintroduzir o pênis no ânus do outro animal e as fezes contaminam. Pois a vesiculite se dá de forma ascendente (de fora para dentro) e há a formação de pus dentro da glândula vesicular e durante a coleta, dependendo do tamanho da infecção o sêmen podem vir com traços de pus. A palpação deve ser feita antes da coleta do sêmen. MÉTODO DE COLHEITA DE SÊMEN Eletroejaculador: ruminantes e grandes felinos. usadas quando tem muitos animais para ser coletado. É introduzido no reto do animal e libera pequenos choque elétricos que vão estimular a contração de toda musculatura do períneo e toda a musculatura que envolve as glândulas sexuais e essas contrações promove a ejaculação e devido a essa estimulação constante há maior liberação do liquido seminal e o sêmen fica um pouco mais diluído que o natural o que não ocorre com a vagina artificial. – Vagina artificial: ruminantes, equinos. mais utilizada nas centrais de reprodução e o que mais se assemelha com o natural. Oferece conforto maior para os animais e a amostra seminal é o mais parecido com a monta natural. *Em equinos pode ser utilizada a ejaculação através de fármacos opioides também, porém é pouco utilizada. Mão enluvada: suínos e cães. coloca-se uma luva e faz estimulo digital no pênis do animal e com a excitação o animal ejacula. Massagem das glândulas acessórias: bovinos. através de palpação retal. Porém é inviável em lotes grandes. É utilizado em animais que tem algum problema e não pode realizar a monta, assim como o eletroejaculador. MATERIAL PARA COLETA DO SÊMEN Deve-se lembrar que o sêmen é sensível a luz solar, temperatura. Impresso por Samuel Bonamichi, E-mail bau_piquete@hotmail.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 03/10/2023, 12:13:55 E por isso todos os materiais devem estar na temperatura do testículo para que não mate os espermatozoides. - Material aquecido evita que os espermatozoides sofram choque térmico. - Temperatura entre 35 e 37ºC. Mesa aquecedora, câmara aquecida com luz incandescente. Material utilizado para coleta com eletroejaculador: funil, tubo falcum de 15ml, papel, mesa aquecedora, lâminas, lamínulas, ponteira de pipeta, pipeta para manipulação do sêmen, ependorf com solução salina, microscópio e o eletroejaculador. ESPERMOGRAMA - Características físicas: - Volume quantos ml o toura ejaculou; depende do método de coleta, frequência de ejaculação e fração gel (em equinos e suínos). - Aspecto coloração do sêmen tem relação com a concentração espermática e quanto mais é – – translúcido menos concentrado está e quanto mais cremoso/esbranquiçado mais concentrado tem; pode ser aquoso, opalescente, leitoso, cremoso e anormal sangue, urina e sujeira. – - Turbilhonamento movimento em massa dos espermatozoides. É avaliado sem a lamínula por tanto é o primeiro a ser avaliado. Aumento de 10-20x; gota de sêmen sem lamínula; MOT + VIG + Concentração; escore 0 a 5; ruminantes. o foco é a borda da gota. *em turbilhonamento escore 5 é possível ver a olho nu os espermatozoides se movimentando. - Motilidade percentagem de espermatozoides vivos. É avaliado no aumento de 10-40x; é a 5 de espermatozoides moveis; lâmina + lamínula; 0 a 100%. sempre é avaliado vários campos, em zigue- zague. - Vigor força que os espermatozoides se locomovem velocidade; escore de 0 a 5. - Concentração contagem espermatozoides/ml. luição em formol-salina. Homogeneização; e pode – Di ser feita em 2 formas: Câmara de Neubauer: decantar 5min e pela Espectrofotometria/microcell couter; a concentração depende do método de coleta, frequência de ejaculação, PE. É importante para calcular dose inseminante, nº de palhetas para congelamento. - Tanto a concentração, quanto a avaliação morfológica pode ser avaliada posteriormente. - Características morfológicas: avalia patologia do espermatozoide. Métodos: Esfregaço corado lâmina corada. Impresso por Samuel Bonamichi, E-mail bau_piquete@hotmail.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 03/10/2023, 12:13:55 Preparação úmida microscópio de contraste de fase. verifica com mais detalhes a morfologia dos espermatozoides. CONCENTRAÇÃO ESPERMÁTICA - CONTAGEM CÂMARA DE NEWBAUER *A contagem é realizada nos dois quadradinhos que existe na câmara, e é feito média entre os dois; por exemplo em um deu o total de 11 e no outro 13, é somado esses dois valores que da 24(11+13=24), então esse total é dividido por 2 que da um total de 12 (24/2=12), esse resultado(12) é a media entre o quadrante de cima e o de baixo. ¨106 *são contados 5 quadradinhos no quadrante, porém para evitar a contagem de mais um espermatozoide é delimitado um “L” na lateral de cada quadradinho que será contado para que um mesmo espermatozoide ñ seja contado duas vezes, os quadradinhos podem ser contados na horizontal e na vertical mas o L deve sempre ser delimitado *Deve contar todos os espermatozoides com a cabeça dentro do quadrante, por exemplo esse laranja ñ é contado pq ele esta fora do L que foi delimitado, ou seja nesse primeiro quadradinho se conta 4 esptz, observa que alguns estão dentro do quadradinho(com a cabeça na linha mais precisamente) porem como ñ é o linha que foi delimitada com o L ele ñ é contado 12(N) 1/10(altura da câmara de newbauer) 5/25(são os quadradinhos contados no quadrante de 25) 1/100(diluição)*pode alterar Como o resultado esta em mm ele precisa passar para ml Impresso por Samuel Bonamichi, E-mail bau_piquete@hotmail.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 03/10/2023, 12:13:55 ESPERMOGRAMA Avaliações microscópicas Características morfológicas dos espermatozoides:*quais sptz tem morfologia correta Lâmina corada: Giemsa -Panótico -Eosina-nigrosina -Vermelho-congo (são corantes) 200 células no aumento de 1.000 X sob óleo de imersão microscópio de luz *são contadas 200 celulas espermáticas e dentro dessas quais são anormais Preparação úmida: Microscopia de contraste de fase 200 células no aumento de 1.000 X sob óleo de imersão Microscópio de contraste de fase CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DOS ESPERMATOZOIDES Maior correlação com fertilidade *por isso ñ se deve enviar um laudo andrológico apenas com o PE e dizer que o animal esta apto. CLASSIFICAÇÃO DAS ANORMALIDADES/PATOLOGIAS: • DEFEITOS MAIORES: afetam a fertilidade (defeitos de acrossoma, cabeça) • DEFEITOS MENORES: tem menos efeito sobre a fertilidade e as taxas de fertilização DEFEITOS MAIORES -Defeitos de acrossoma -GCP -Subdesenvolvido -Cabeça Isolada Patológica -Cauda enrolada na cabeça -Estreito na base -Piriforme -Pequeno anormal -Coloração anormal -Contorno anormal -Cauda fortemente enrolada -Cauda fortemente enrolada c/ Gota -Defeito de PI - Teratológicos -Pouch formation DEFEITOS MENORES - Cauda enrolada; - GDC; - Gigante; - Abaxial; - Cabeça isolada normal Total de defeitos: maiores + menores Padrão para qualidade espermática de reprodutor bovino: - Defeitos maiores: <10%; - Defeitos menores: <20%; - Defeitos totais: <30%. *ñ pode ultrapassar DIAGNÓSTICO CONCLUSÃO – Impresso por Samuel Bonamichi, E-mail bau_piquete@hotmail.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 03/10/2023, 12:13:55 Depois de todas essas avaliações: clínica, inspeção, palpação de órgãos internos e externos, coleta de sêmen e avaliação seminal, aspectos microscópicos e macroscópicos e das avaliações de concentração e morfologia é possível dar um diagnostico daquele animal em relação à reprodução. E o resultado dessa avaliação podem ser:Aptos à reprodução: - Em regime de monta natural; - Doador de sêmen. Inaptos: - Exame físico; podem ter algum problema de locomotor. - Espermograma; tem algum problema testicular, como hipoplasia testicular, assimetria testicular, problema no prepúcio ou pênis. Ou ainda alguma patologia no espermograma que não é compatível a reprodução. Aptos à MN: - Padrões insuficientes para doador. para o animal ser doador de sêmen ele tem que ter uma condição excelente de concentração espermática, de motilidade e vigor e que as vezes não tão necessário a animais que são apenas para monta natural. * o animal que é doador de sêmen passa por congelamento e depois descongelamento e, portanto, as células espermáticas sofrem mais e por isso devem ser excelentes. Inaptos temporariamente: - Pré-puberes; - Reavaliação. Diagnóstico temporário: - Duração da espermatogênese: 60 dias; - Reavaliar após 60 dias; - Validade do exame: 60 dias. *o passado do animal pode interferir no sptz