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UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS CURSO: HEMATOLOGIA CLÍNICA DISCIPLINA: FARMÁCIA NOME DO ALUNO: Keite Lynketellyn Paris Galdino RA: 2103971 POLO DE MATRÍCULA: Bauru Centro POLO DE PRÁTICA: Bauru DATA DAS AULAS PRÁTICAS: 02/09/2023 ( Manhã e tarde) Jau, 17 DE SETEMBRO DE 2023 ATIVIDADES OBRIGATÓRIAS: RESULTADOS E DISCUSSÃO: Aula 1 Roteiro 1 Determinação do Hematócrito O Hematócrito é um exame de sangue que mede a porcentagem de hemácias no sangue, também chamadas de eritrócitos ou glóbulos vermelhos. O hematócrito pode fornecer informações valiosas sobre a saúde geral do indivíduo, incluindo a quantidade de células vermelhas e a quantidade de hemoglobina no sangue. No entanto, o exame de hematócrito sozinho não é suficiente para um diagnóstico preciso. Por isso, ele deve ser utilizado em conjunto com outros índices hematimétricos do sangue para avaliação das suas alterações. A hemoglobina contida nas hemácias carrega o oxigênio para os tecidos e o hematócrito dá uma indicação dela. É, pois, muito importante a normalidade do hematócrito para que a saúde pessoal seja normal.(PAEZ, 2023). Procedimento: Preenchemos com sangue um tubo de capilar até 3/4 de sua altura e em seguida limpamos a parede externa com gaze. Fonte própria Fechamos uma de suas extremidades com massa de modelar com massa de modelar para oclusão do capilar. Colocamos o capilar em uma centrífuga apropriada para micro- hematócrito onde centrifugou por 5 minutos em 10.000 rpm. https://www.rodrigopaez.com.br/procedimento/cirurgia-cardiaca-em-testemunha-de-jeova/ https://www.rodrigopaez.com.br/publicacoes/conheca-os-10-exames-laboratoriais-basicos-de-sangue/ https://www.rodrigopaez.com.br/publicacoes/conheca-os-10-exames-laboratoriais-basicos-de-sangue/ Fonte própria Fazer a leitura na tabela de leitura de micro-hematócrito que acompanha a centrifuga. Fonte própria Na mostra 2, o resultado da análise foi de 40% de Glóbulos vermelhos. Aula 1 Roteiro 2 Determinação de Hemoglobina Hemoglobina é uma proteína presente nos glóbulos vermelhos e a responsável pela coloração vermelha do sangue. Essa proteína, que tem como função o transporte de https://www.biologianet.com/histologia-animal/sangue.htm oxigênio pelo organismo, pode apresentar-se de diferentes formas, sendo a hemoglobina A a mais comum em indivíduos adultos. Uma queda na concentração dos níveis considerados normais de hemoglobina no sangue causa o que conhecemos como anemia. Uma concentração elevada, por sua vez, pode causar o que denominamos de eritrocitose. Também merece destaque a hemoglobina glicada, que é uma substância formada a partir da reação entre a hemoglobina A e algumas moléculas de açúcar. A sua dosagem ajuda tanto no monitoramento quanto no diagnóstico de diabetes mellitus. A hemoglobina é uma proteína presente nas hemácias, também chamadas de glóbulos vermelhos do sangue. Trata-se de uma proteína globular com estrutura quaternária que apresenta quatro subunidades polipeptídicas. Cada subunidade possui ainda um elemento não polipeptídico chamado de grupo heme. O grupo heme possui um átomo de ferro, ao qual se liga o oxigênio para que possa ser transportado até ser liberado nos tecidos. O grupo heme é o responsável pela coloração vermelha da hemoglobina e, consequentemente, do sangue, já que essa proteína está presente em grande quantidade nas hemácias. A hemoglobina apresenta-se como uma estrutura quaternária, com um arranjo tridimensional de suas cadeias polipeptídicas. A hemoglobina está presenta nas hemácias de diversos animais, inclusive no homem. A função dessa proteína é transportar o oxigênio dos pulmões para as mais diversas partes do organismo. O gás oxigênio que chega até os pulmões passa para a corrente sanguínea e se liga aos átomos de ferro presentes nos grupos heme, citados anteriormente. Essa ligação é reversível, assim o oxigênio é liberado ao chegar aos tecidos.(LEMOS, 2023) https://www.biologianet.com/biologia-celular/proteinas.htm https://www.biologianet.com/histologia-animal/hemacias.htm https://www.biologianet.com/histologia-animal/principais-tecidos-humanos.htm Para a dosagem de Hemoglobina, começar preparando dois tubos com 20,0ul sendo um com a solução padrão (que chamamos P) e outro com a amostra (chamamos de A2). Fonte própria Em ambos, acrescentar 5,0ml de reagente Drabkin e aguardar 5 minutos em temperatura ambiente. Fonte própria Decorrido o tempo, realizar a leitura a 540nm no espectrofotômetro, acertando o zero com água destilada. O resultado obtido na leitura da amostra foi 0,301 e o resultado da leitura do padrão foi 0,262. Fonte própria A partir dos resultados da leitura, realizamos o cálculo da Hb a partir de uma das fórmulas abaixo. 10mg/dl – Abs Padrão [Hb] = Abs A x 10 X – Abs Amostra Abs P [Hb] = 11,48 Aula 2 Roteiro 1 Contagem de hemácias em câmara de Neubauer Um eritrograma é a porção do hemograma, ou exame de sangue, que avalia somente as células da série vermelha do sangue. Os eritrócitos, também conhecidos como hemácias ou glóbulos vermelhos, são contados e sua quantidade é comparada com valores de referência. Esses valores dizem respeito ao que se espera encontrar em uma pessoa saudável de mesmo sexo e idade que o paciente analisado. A contagem de hemácias pode ser feita manualmente, em um microscópio, ou em um contador automático. Seu aspecto normal é bicôncavo, sem núcleo, com coloração mais intensa nas bordas. Elas geralmente possuem um tamanho característico e regular entre si. Um homem adulto pode apresentar entre 4,5 e 6 milhões de hemácias por mm3 de sangue, enquanto que uma mulher adulta varia entre 4 e 5,5 milhões/mm3. https://www.infoescola.com/exames-medicos/hemograma/ https://www.infoescola.com/medicina/exame-de-sangue/ Além da contagem de glóbulos vermelhos, o eritrograma também avalia a concentração de hemoglobina, que é a proteína presente no interior das hemácias responsável por transportar as moléculas de oxigênio através da corrente sanguínea. Isso ocorre porque esta proteína possui em sua estrutura átomos de ferro que se ligam ao oxigênio. O ferro da hemoglobina também é responsável pela coloração vermelha do sangue. Quando a concentração de hemoglobina em uma amostra proveniente de um adulto registra valores inferiores a 12,5 gramas por decilitro pode-se considerar que esta pessoa apresenta um quadro de anemia. O eritrograma ainda informa sobre outros parâmetros relacionados às hemácias e a hemoglobina. O primeiro deles chama-se hematócrito, que é um índice expresso em porcentagem representando qual parcela do volume total do plasma é composto somente pelas hemácias. Os valores desejáveis variam de 40 a 50% do volume, sendo que para recém-nascidos esse valor é muito mais alto (podendo atingir 65%), reduzindo ao longo do crescimento. Existem outros 4 índices avaliados em um eritrograma: VCM, HCM, CHCM e RDW. O primeiro deles, VCM (volume corpuscular médio), diz respeito ao tamanho médio das hemácias, medido em femtolitros (fl, que equivale a 1000 mL). Para ser considerada normal, uma hemácia deve ter de 80 a 100 fl, sendo chamada de normocítica. Anisocitose é o nome dado quando há alteração no tamanho das hemácias, o que leva a quadros de anemia microcíticas (eritrócitos menores que 80 fl) ou macrocíticas (hemácias maiores que 100 fl). O HCM (hemoglobina corpuscular média) representa o peso médio da hemoglobina nas hemácias, em picogramas. Seus valores de referência variam, para adultos, de 27 a 32 pg. O terceiro índice é a concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM),ou seja, a concentração média da molécula de hemoglobina presente no interior de uma hemácia. As hemácias normocrômicas, que estão dentro da normalidade, apresentam entre 32 e 36g de hemoglobinas/dL. Por fim, o RDW, do inglês red cell distribution width (largura de distribuição das hemácias), informa a variação média do tamanho das hemácias entre si, cujo resultado esperado para adultos é de 11 a 15%. O eritrograma é especialmente importante para informar sobre quadros de anemia, que são uma condição caracterizada pela redução de hemácias e hemoglobina no sangue. Esta doença se caracteriza por cansaço, falta de ar, palidez e até mesmo desmaios, uma vez que a capacidade do sangue em transportar oxigênio se encontra reduzida. (WAGNER, 2005) Procedimento: Em um tubo de ensaio colocamos 4ml da solução de Gower, pipetamos no mesmo tubo 20 microlitros de sangue homogeneizado. https://www.infoescola.com/bioquimica/proteinas/ https://www.infoescola.com/elementos-quimicos/ferro/ https://www.infoescola.com/sangue/hemoglobina/ https://www.infoescola.com/matematica/porcentagem/ https://www.infoescola.com/quimica/molecula/ https://www.infoescola.com/sangue/hemoglobina/ https://www.infoescola.com/doencas/anemia/ https://www.infoescola.com/sangue/hemacias/ https://www.infoescola.com/elementos-quimicos/oxigenio/ Fonte: autoria própria Homogeneizamos a solução total por agitação manual por 30 segundos, aguardamos por 2 minutos Preenchemos a câmara de Neubauer com auxilio da pipeta e contamos as hemácias dos 5 quadrantes centrais. Fonte: autoria própria Resultado: Na contagem das hemácias dos 5 quadrantes foram encontradas 309 x 10.000 contagem total: 3090.000 Aula 2 Roteiro 2 Contagem de leucócitos em câmara de Neubauer Câmara de Neubauer também referida como hemocitômetro, é uma lâmina grossa de uso microscópico, com formato retangular e normalmente de vidro, com uma depressão no centro, utilizada para fazer contagem de células por unidade de volume de uma suspensão. Podem ser contadas as células sanguíneas, tais como as hemácias ou eritrócitos, os diferentes tipos de leucócitos (leucócitos granulócitos e agranulócitos) como também as plaquetas. Além disto, podem ser enumerados também alguns microorganismos. No centro desta lâmina existem várias linhas perpendiculares com marcações em quadrantes. Ao analisar em microscópico com a objetiva de imersão, pode-se perceber que existem três tipos de quadrantes, que juntos formam um quadrado maior. Estes quadrantes são usados para fazer as contagens e assim determinar a concentração de células em um determinado volume de fluido, para poder calcular a concentração de células no líquido global (do qual foi tirado à amostra analisada). (MARTINEZ) Os leucócitos, também conhecidos como glóbulos brancos, são as células responsáveis por defender o organismo contra infecções, doenças, alergias e resfriados, sendo parte da imunidade de cada pessoa. Essas células são transportadas no sangue para serem utilizadas sempre que um vírus, uma bactéria, ou qualquer outro organismo estranho entra no corpo humano, eliminando-os e impedindo que provoquem problemas de saúde. A presença de leucócitos altos ou baixos no sangue podem indicar que a pessoa tem uma infecção, estresse ou anemia, por exemplo. O valor normal dos leucócitos no sangue situa-se entre 4500 a 11000 leucócitos/mm³ de sangue nos adultos. No entanto, esse valor pode variar de um laboratório para outro, sendo importante que os exames sejam avaliados pelo médico.(LEMOS, 2023) Procedimento: Em um tubo de ensaio colocamos 0,4 ml da solução diluente e pipetamos 20 microlitros de sangue homogeneizado. Agitamos por 30 segundos e deixamos em repouso por dois minutos. Com a diluição pronta, preenchemos a câmara de Newbauer e levamos ao microscópio para analisar, contando as hemácias dos 4 quadrantes externos. https://www.infoescola.com/sangue/hemacias/ https://www.infoescola.com/citologia/leucocitos/ https://www.infoescola.com/sangue/plaquetas/ Resultado: Na contagem dos leucócitos dos 4 quadrantes foram encontradas 149 x 50 = contagem total: 7.450. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS PAEZ, Rodrigo. Diretor técnico-Médio. Hematócrito. Março de 2023. LEMOS, Marcela. Biomédica. Hemoglobina o que é, valores (porque está baixa ou alta). Setembro de 2023. Wagner, S. C., Silvestri, M. C., Bittar, C. M., Friedrisch, J. R., & Silla, L. M. D. R. (2005). Prevalência de talassemias e hemoglobinas variantes em pacientes com anemia não ferropênica. Revista brasileira de hematologia e hemoterapia= Brazilian journal of hematology and hemotherapy. São Paulo. Vol. 27, n. 1 (2005), p. 37-42. Weiss, G., & Goodnough, L. T. (2005). Anemia of chronic disease. New England Journal of Medicine, 352(10), 1011-1023. MARTINEZ, Marina. Disponível em : https://web.archive.org/web/20090306163117/http://www.icb.usp.br:80/~bmm/materi ais/P3a%20- %20Contagem%20de%20celulas%20em%20camara%20de%20Neubauer.pdf. Acesso Setembro 2023. LEMOS, Marcela. Biomédica. MAYO CLINIC. Low white blood cell count. Disponível em: <https://www.mayoclinic.org/symptoms/low-white-blood-cell- count/basics/causes/sym-20050615>. 2023. https://www.infoescola.com/medicina/hematologia/ https://www.infoescola.com/medicina/hemoterapia/ https://web.archive.org/web/20090306163117/http:/www.icb.usp.br:80/~bmm/materiais/P3a%20-%20Contagem%20de%20celulas%20em%20camara%20de%20Neubauer.pdf https://web.archive.org/web/20090306163117/http:/www.icb.usp.br:80/~bmm/materiais/P3a%20-%20Contagem%20de%20celulas%20em%20camara%20de%20Neubauer.pdf https://web.archive.org/web/20090306163117/http:/www.icb.usp.br:80/~bmm/materiais/P3a%20-%20Contagem%20de%20celulas%20em%20camara%20de%20Neubauer.pdf