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SÍNTESE DE RNA EM EUCARIOTOS: TRADUÇÃO TRADUÇÃO DO RNA RECORDAR É VIVER! Transcrição e Tradução Transcrição - Tradução PROTEÍNAS PROTEÍNAS São Polímeros de aminoácidos Unidos por ligações Peptídicas Cadeias Polipeptídicas Aminoácidos Mais de 150 existentes Somente 20 em proteínas celulares Estrutura –L Grupo Amino (-NH2) + Grupo Carboxila (-COOH) PEPTÍDEOS Aminoácidos = 20 diferentes Peptídeo = 2 ou + aá Polipeptídeo = Longas sequências de aá Diversidade de Proteínas Ex. 7 aa diferentes 1,28 Bilhões de sequências peptídicas possíveis Imagine uma proteína com uma sequência de 100 aá Aminoácido Peptídeo Polipeptídeo Estrutura Primária É a sequência linear de aminoácidos da proteína Especificada pela sequência de nucleotídeos do DNA (gene que codifica tal proteína) PROTEÍNAS Estrutura Secundária Relações espaciais entre os aá em segmentos do polipeptídeo; Produz ao menos dois tipos de estruturas: Hélice Folha PROTEÍNAS Estrutura Secundária PROTEÍNAS Folha Hélice PROTEÍNAS Estrutura Terciária Refere-se ao dobramento geral no espaço tridimensional Ex. Polipeptídeo da -Globina PROTEÍNAS Estrutura Terciária Interações entre as cadeias laterais dos diferentes aminoácidos: Ligações Covalentes Ligações e não Covalentes PROTEÍNAS Estrutura Quaternária Associação de dois ou mais polipeptídeos em uma proteína multimérica Ex. Hemoglobina Exemplo: ENZIMAS Proteínas com propriedades de acelerar reações químicas de Síntese ou Degradação de moléculas Responsáveis pela eficiência da maquinaria química celular: Rapidez Rendimento Ação Enzimática: Substrato ---- Enzima ----> Produto Centros Ativos = dependentes da forma tridimensional PROTEÍNAS ATP + Glicose --> ADP + Glicose-6-fosfato TRADUÇÃO (mRNA->Proteína) TRADUÇÃO Processo de transformação da informação contida no mRNA (códons) para uma sequência de aminoácidos na Proteína COMPONENTES NECESSÁRIOS 1) mRNA 2) Ribossomos (Proteínas + rRNA) 3) tRNA A U G Metionina Início Treonina Glutamina Leucina Arginina Serina Término TRADUÇÃO 1) mRNA Produzido durante a Transcrição Contém: 3 Bases = 1 Codon = 1 Aminoácido Correspondência: Código Genético Sequência ou Estrutura para montagem do Ribossomo CÓDIGO GENÉTICO Correspondência entre Codons do mRNA (3 bases) e o aminoácido na proteína Não é Sobreposto TRADUÇÃO CÓDIGO GENÉTICO: Correspondência entre Codons do mRNA (3 bases) e o aminoácido na proteína Iniciação (AUG) Término (UGA, UAA e UAG) TRADUÇÃO TRADUÇÃO 2) Ribossomos Maquinaria responsável pela produção das Proteínas Composto por 2 Subunidades (Maior e Menor) formadas por: Proteínas Ribossômicas rRNAs (RNAs Ribossômicos) Eucariótico: Menor = 40S Maior = 60S TRADUÇÃO 2) Ribossomo Formado por 2 subunidades: Maior Local onde a cadeia Polipeptídica é formada Menor Local de interação com o mRNA Sítios: A: Aminoacil (entrada de tRNA com novos Aminoácidos) P: Peptidil (formação da cadeia polipeptídica) E: (Exit) Saída do tRNA sem aminoácido TRADUÇÃO 3) tRNA (RNA Transportador) Responsável pelo Transporte dos Aminoácidos até os Ribossomos Funcionais como RNA Formam estrutura Tridimensional (pareamentos internos) Aminoácidos ligados a sua ponta 3’ Contém: ANTICODON 3 bases --- Complementares ---> Codon (mRNA) AMINO ÁCIDO Aonde acontece a tradução? 1) INÍCIO DA CADEIA POLIPEPTÍDICA 2) ALONGAMENTO DA CADEIA 3) TÉRMINO DA CADEIA TRADUÇÃO EUCARIONTES 1) INÍCIO DA CADEIA FATORES DE INICIAÇÃO Subunidade Menor Metionina-tRNA Cap 5’ do mRNA Complexo de Iniciação Deslocamento pelo mRNA até o 1º AUG TRADUÇÃO EUCARIONTES 1) INÍCIO DA CADEIA Complexo de Iniciação Deslocamento pelo mRNA até o 1º AUG Recrutamento da Subunidade Maior Montagem do Ribossomo TRADUÇÃO E P A 2) ALONGAMENTO DA CADEIA Leitura dos Codons do mRNA Inserção de tRNA com Aminoácidos correspondentes Formação de ligações Peptídicas entre aminoácidos = Cadeia Polipeptídica TRADUÇÃO 2) ALONGAMENTO DA CADEIA 1º t-RNA (MET) => Sítio P Fatores de Alongamento (EF) Auxiliam no transporte do demais t-RNAs até o sítio A TRADUÇÃO 2) ALONGAMENTO DA CADEIA Formação da Cadeia Polipeptídica Transferência do Aminoácido do t-RNA no sítio P para o t-RNA do sítio A Formação de Ligação Peptídica (aá - aá) TRADUÇÃO Peptidil-Transferase 2) ALONGAMENTO DA CADEIA Deslocamento do Ribossomo por 1 Codon Gasto de GTP (em GDP + Pi) = Translocação Ribossomo “anda” 1 códon no mRNA t-RNA com a cadeia polipeptídica => Sítio P tRNA sem aá => Sítio E Sítio A = Livre para entrada de um novo t-RNA TRADUÇÃO E P A 2) ALONGAMENTO DA CADEIA Saída do t-RNA sem aá do Sítio E Entrada de um novo t-RNA com aá no sítio A Repetição dos passos até encontrar um Códon de Término de Tradução TRADUÇÃO 3) TÉRMINO DA CADEIA Encontro de um códon de Término de Tradução UGA, UAA e UAG Não há entrada de t-RNA Entrada do FATOR DE LIBERAÇÃO (RF) Eucariontes: eRF => UAA, UAG e UGA TRADUÇÃO 3) TÉRMINO DA CADEIA Fator de Liberação no sítio A Altera a atividade da Peptidil-Transferase Inserção de molécula de água Liberação da Cadeia Polipeptídica Liberação do mRNA Desmontagem do Ribossomo TRADUÇÃO Iniciação, elongação e término Iniciação, alongamento e término 1. CBP se liga a Cap 5’ do RNAm quando este sai do núcleo; 2. FI-4 reconhece Cap 5 + CBP e liga o conjunto ao códon de iniciação (AUG), com gasto de ATP; 3. Simultaneamente FI-2 posiciona metionil RNAt no sítio P do ribossomo menor; 4. FI-3 e FI-4 posiciona a extremidade 5’ do RNA na subunidade menor do ribossomo; 5. A subunidade menor desliza pelo RNAm e detecta o códon de iniciação (sítio P); 6. FI-5 posiciona a subunidade maior após o desprendimento dos demais fatores. Iniciação da Tradução 1. FA-1 posiciona o segundo RNAt com seu aminoácido no Sítio A; 2. FA-2 transloca o RNAt da posição P para E 1. O aminoácido desse RNAt se desprende e se liga ao aminoácido do próximo RNAt acondicionado no sítio P; 2. O RNAt se desprende do códon e abandona o sítio E; 3. FA-2 transloca o RNAt da posição A para P Alongamento da Tradução 1. Quando a tradução atinge a sequência UAA, UGA ou UAG (códon de finalização), a tradução se encerra; 2. O sítio A será preenchido pela eRF-1; 3. eRF-3 desprende o RNAt do sítio P 4. As proteínas são liberadas; 5. As subunidades do ribossomo se separam do RNAm Finalização da Tradução Códons – três nucleotídeos; Existem 61 códons diferentes para os aminoácidos; Três códons de “parada” – UAA, UGA e UAG; Um códon AUG é um sinal de “início” – aminoácido metionina. O que acontece agora? Antibióticos Antibiótico ➢Se associa a moléculas fundamentais para a tradução de célula bacteriana ➢Subunidade 50S do ribossomo; ➢Inativando a produção de proteínas; ➢ A bactéria para de funcionar e morre; ➢ Motivo pelo qual várias infecções são curadas quando tratadas com antibióticos. Estreptomicina ❖ Liga-se à subunidade 30S e distorce sua estrutura inibindo a iniciação. Cloranfenicol Impede uniões peptídicas na subunidade 50S dos ribossomos Tetraciclina Impede a entrada do aminoacil tRNA no sítio A pelo bloqueio do receptor na unidade 30S do ribossomo Quirromicina Inibe a atividade dos fatores de alongamento (EF-Tu-GDP) DÚVIDAS?