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8 5BIOT-NT1 Biotecnologia Profª. Drª Natássia Ribeiro Unidade 01 Biotecnologia: conceito, definições, abrangência, impacto e importância; biotecnologia e engenharia genética; biotecnologia tradicional versus molecular; marcos históricos do desenvolvimento da biotecnologia moderna. “É O USO DE CONHECIMENTOS SOBRE PROCESSOS BIOLÓGICOS E SOBRE AS PROPRIEDADES DOS SERES VIVOS, COM O FIM DE RESOLVER PROBLEMAS E CRIAR PRODUTOS DE UTILIDADE” Convenção sobre Diversidade Biológica – CDB , ONU Biotecnologia • Multidisciplinaridade Histórico e conceitos em Biotecnologia • Química de produtos naturais • Tecnologia de enzimas • Microbiologia • Cultura de células de animais/plantas • Bioquímica • Biologia molecular • Genética • Bioreatores • Sistemas de controle • Engenharia química • Bioengenharia Profa. Rebeca Vale “Biotecnologia significa, qualquer aplicação tecnológica que utilize sistemas biológicos, organismos vivos, ou seus derivados, para fabricar ou modificar produtos ou processos para utilização específica.” (ONU, Convenção de Biodiversidade 1992, Art. 2) Apesar de ter surgido como objeto de estudo nas últimas décadas, a Biotecnologia é uma tecnologia milenar. A partir dos anos de 1970, com as técnicas de DNA recombinante, a Biotecnologia ganhou mais ênfase. Biotecnologia Moderna O Brasil possui a maior biodiversidade do mundo, e detém cerca de 20% das espécies do planeta. Portanto, possui um grande potencial biotecnológico. Um pouco de história ... Primeira Geração: Idade Nova (2000 a.C.) Fatos: - cruzamento de espécies animais e plantas - leveduras para fermentação de pão e álcool Segunda Geração: Fim do século XIX Teoria de Louis Pasteur Fatos: - microrganismos causam doenças humanas - ação dos microrganismos anaeróbios nas fermentações láctea e alcoólica Terceira Geração: Início de 1970. Biologia Molecular Fatos: 1o – isolamento e manipulação de genes (DNA) 2o – fusão e multiplicação de células Biotecnologia • Histórico Histórico e conceitos em Biotecnologia Período Profa. Rebeca Vale Acontecimento 6.000 a.C. Produção de bebidas alcóolicas (Suméria e Babilônia) • Cerveja e vinho Produção de vinagre, iogurte e queijos 2.000 a.C. Panificação (Egito) 1875 d.C Pasteur mostra que a fermentação é causada por microrganismos 1880 - 1910 Surgimento da fermentação industrial • Ácido lático, etanol, vinagre 1910 – 1940 Síntese de glicerol, acetona e ácido cítrico 1940 – 1950 Produção de antibióticos em larga escala • Fermentação Biotecnologia • Histórico Histórico e conceitos em Biotecnologia Período Profa. Rebeca Vale Acontecimento 1953 Estabelecida a estrutura do DNA • James Watson e Francis Crick 1967 Síntese química de DNA • Arthur Kornberg 1973 Início da Engenharia Genética 1982 Produção de insulina humana A Era da Biotecnologia Moderna Manipulação do material genético e reprogramação de microrganismos “fábricas” para produção de vários bens úteis Química Farmacêutica Alimentos Agrícola Papel & celulose Inovação de produtos Bioplásticos Evita o uso de fontes não renováveis (combustíveis fosseis) Plantas transgênicas Resistentes a insetos Microrganismos transgênicos com capacidade de biorremediar inúmeros poluentes Biotecnologia ajudou a produzir NOVOS MATERIAIS com menos impacto para o ambiente Biotecnologia: impacto e importância A biotecnologia promove impactos em diversos setores industriais: por meio de técnicas inovadoras; pela revolução no tratamento de doenças; no uso de novos medicamentos para aplicação em humanos e animais; na multiplicação e reprodução de espécies vegetais e animais; Biotecnologia: impacto e importância no desenvolvimento e melhoria de alimentos; promove o desenvolvimento sustentável; recuperação e tratamento de resíduos químicos Dentre outras áreas que possam ser exploradas. Biotecnologia • Aplicações – AGRICULTURA • Cultura de tecidos • Fixação de nitrogênio • Controle biológico de pragas • Melhoria de sementes Histórico e conceitos em Biotecnologia Profa. Rebeca Vale Biotecnologia • Aplicações – MINERAÇÃO • Lixiviação bacteriana de minérios Histórico e conceitos em Biotecnologia Profa. Rebeca Vale Biotecnologia • Aplicações – PECUÁRIA • Inseminação artificial • Transferência de embriões Histórico e conceitos em Biotecnologia Profa. Rebeca Vale Biotecnologia • Aplicações – SAÚDE • Antibióticos • Hormônios • Vacinas Histórico e conceitos em Biotecnologia Profa. Rebeca Vale Biotecnologia • Aplicações – PROCESSOS FERMENTATIVOS • Enzimas • Ácidos orgânicos • Aminoácidos • Vitaminas Histórico e conceitos em Biotecnologia • Biopolímeros • Bebidas alcoólicas • Microrganismos • Alimentos Profa. Rebeca Vale Biotecnologia e Engenharia genética A Biotecnologia consiste em um conjunto de práticas relacionadas à interações biológicas que possam originar substâncias, formas de produção ou até mesmo novas espécies. No que diz respeito à criação de novas espécies, podemos citar a engenharia genética como o grande pilar dessa área da biotecnologia. Engenharia Genética é o ramo da ciência que consegue reunir diversas técnicas para fins de manipulação dos genes de qualquer organismo a partir de experimentos artificiais. Esse processo de manipulação faz com que tais elementos seja duplicados, transferidos ou mesmo isolados dos genes originais. Biotecnologia e Engenharia genética O que é biotecnologia tradicional? Biotecnologia pode ser definida como uso das tecnologias que utilizam organismos vivos, ou produtos elaborados a partir deles, para criar ou modificar produtos para fins específicos. O que é Biotecnologia moderna? Biotecnologia moderna está ligada às ciências biológicas, além de apresentar características na agricultura, na ciência de alimentos e na medicina. É definida pelo uso dos conhecimentos tecnológicos para manipular seres vivos, e produzir produtos de consumo, estes agentes biológicos são manipulados através do uso do DNA. O que é Biotecnologia? Biotecnologia Tradicional: Fermentação – atuação de enzimas ( isoladas ou in vivo) Álcool Combustível Antibióticos Biotecnologia Moderna: Material Genético DNA (Ácido Desoxirribonucleico) Biotecnologia Moderna Engenharia Genética Conjunto de técnicas que envolvem a manipulação de genes de um determinado organismo artificialmente com o objetivo de produzir organismos geneticamente melhorados para desempenharem melhor suas funções e produzir substâncias úteis ao homem. Diabetes Melito I Bactérias: organismos fáceis de cultivar Implantação de um Fragmento de DNA desejado em seus cromossomos Síntese de Proteínas determinadas junto a suas proteínas Deficiência de Insulina Gene para produção de Insulina incorporado ao material genético de bactérias Obtenção de Insulina em meio de cultura PROBLEMA DNA Recombinante Tecnologia do DNA Recombinante A- Gene de interesse obtido por meio de Endonucleases de Restrição B- Extração do plasmídio e corte do DNA circular pelas Endonucleases de Restrição C- Fragmento de DNA unido ao plasmídio bacteriano por ligases D- Fragmento de DNA veiculado pelo plasmídio é incorporado pelas células bacterianas e passa a controlar a síntese da substância de interesse. O que podemos fazer a partir da Tecnologia do DNA Recombinante? Solução de Problemas Ambientais e de Saúde Melhoramento Genético Medicamentos Vacinas Gênicas Organismo Geneticamente Modificado (OGMs) OGMsTransgênicos Um organismo geneticamente modificado foi submetido a técnicas laboratoriais que, de alguma forma, modificaram seu genoma. Um organismo transgênico foi submetido a técnica específica de inserção de um trecho de DNA de outra espécie o transgênico é um tipo de OGM, mas nem todo OGM é um transgênico! Utilizados de forma equivocada como sinônimos EX: EX: Organismo Geneticamente Modificado (OGMs) Vantagens (Agricultura): Redução do Uso de Agroquímicos; Redução dos Custos de produção; Tolerância a condições ambientais diversas; Aumento do valor nutritivo; Elevação da produtividade Milho Bt As lavouras comerciais sofrem o ataque de numerosas espécies de pragas agrícolas (lagartas) Requerem doses maciças de defensivos agrícolas: Inseticidas Essa variedade modificada recebeu da bactéria Bacillus thuringiensis (Bt) o gene para produção de toxinas capazes de matar lagartas, sem danos ao ser humano. Lagarta-do-cartucho O milho Bt é o milho que recebeu genes da bactéria Bacillus thuringiensis (Bt). A planta geneticamente modificada que possui essa característica expressa proteínas inseticidas a determinados grupos de insetos, a exemplo da ordem Lepidóptera, da qual fazem parte: Lagarta-do-cartucho-do-milho. Broca- do-colmo. Milho Bt Milho Bt A- Duplicação do plasmídio em cultura de células de milho B- Transferência do gene Bt para o cromossomo da célula do milho C – Divisões das células do milho D- Cultura de tecido vegetal - milho com gene Bt – produção de toxinas. Plantas Bt: o que são e para que servem (1 de agosto de 2017) biotecnologia, controle de pragas, culturas Bt As plantas Bt são desenvolvidas por meio da biotecnologia para serem capazes de resistir a determinados insetos-praga. Para que as plantas apresentem essa resistência, foi inserido em seu DNA um gene que expressa uma proteína tóxica para alguns insetos como lagartas, besouros, moscas etc. Essa inserção, entretanto, não tem efeito sobre outros organismos e nem sobre o ser humano. As proteínas do grupo Cry são algumas das que são expressas pelas plantas Bt. Essas proteínas são naturalmente produzidas pela bactéria Bacillus thuringiensis (Bt), encontrada no solo. Por conta desse efeito tóxico aos insetos, cientistas identificaram no DNA da bactéria os genes responsáveis pela expressão das proteínas inseticidas e os introduziram em plantas como a soja, o milho, o algodão e a cana. Os insetos-praga, então, ingerem a planta geneticamente modificada e a proteína Cry se liga a um receptor específico nas células do intestino deles. Isso faz com que os animais acabem morrendo. Disponível em: https://boaspraticasagronomicas.com.br/noticias/plantas-bt/ https://boaspraticasagronomicas.com.br/tag/biotecnologia/ https://boaspraticasagronomicas.com.br/tag/controle-de-pragas/ https://boaspraticasagronomicas.com.br/tag/controle-de-pragas/ https://boaspraticasagronomicas.com.br/tag/controle-de-pragas/ https://boaspraticasagronomicas.com.br/tag/controle-de-pragas/ https://boaspraticasagronomicas.com.br/tag/controle-de-pragas/ https://boaspraticasagronomicas.com.br/tag/culturas-bt/ https://boaspraticasagronomicas.com.br/tag/culturas-bt/ https://boaspraticasagronomicas.com.br/tag/culturas-bt/ Organismo Geneticamente Modificado (OGMs) Riscos Ambientais: Alteração de sabor ou aroma; Mortes de espécies não alvo; Morte de polinizadores; Transmissão horizontal (superpragas); Aos Seres Humanos e outros Animais: Organismo Geneticamente Modificado (OGMs) Riscos Aos seres humanos e outros animais: Reações alérgicas – Urticárias, Dermatite e Reações Respiratórias; Desconhecimento do efeito a longo prazo; Clonagem As células-tronco apresentam potencial para se transformar em qualquer célula ou tecido de um organismo, o que é especialmente promissor para o tratamento de doenças degenerativas. Uso de Células-Tronco Três tipos: Células-tronco embrionárias (embrião); Adultas (medula óssea e no cordão umbilical); Pluripotentes induzidas (obtidas por cientistas em laboratório em 2007). Aplicação: O estudo e a manipulação tecnológica de células-tronco poderão dar origem a terapias para o tratamento de diversas doenças, para a recuperação de pessoas paralisadas em acidentes e, até, para a criação de tecidos para transplante. Uso de Células-Tronco *Células tronco pluripotente induzidas, são células de organismos adultos que, através da expressão de fatores de transcrição específicos, ganham uma característica bastante particular de célula embrionária, a pluripotência. Cérebro: Regeneração de neurônios; Ossos: Cicatrização de fraturas e tratamento da osteoporose; Pâncreas: Recuperação da produção adequada de insulina; Coluna: Tratamento de lesões, recuperando pacientes paraplégicos; Órgãos sexuais: - Tratamento contra a infertilidade para casais que não conseguem engravidar; Coração: Recuperação de áreas enfartadas e tratamentos de insuficiência cardíaca; Olhos: Recuperação da visão em idosos e pessoas com problemas de retina. Uso de Células-Tronco Unidade 02 Ácidos nucleicos e expressão gênica: processos de replicação, transcrição e tradução; universalidade do código genético - importância para a biotecnologia; noções de estrutura gênica e de regulação de expressão - em eucariotos versus procariotos. Conceitos Gerais DNA (Desoxyribonucleic Acid) RNA (Ribonucleic Acid) Conceitos Gerais Os Ácidos Nucléicos estão presentes em todas células vivas e são responsáveis pelo armazenamento e transmissão da informação genética e por sua tradução que é expressa pela síntese precisa das proteínas. São moléculas longas e complexas, de elevados pesos moleculares, constituídos por cadeias de unidades denominadas nucleotídeos. Conceitos Gerais São ácidos nucléicos: DNA (ácido desoxirribonucleico) e o RNA (ácido ribonucleico). Conceitos Gerais Unidades fundamentais dos Ácidos Nucléicos Nucleotídeos Presentes em ambos os Ácidos Nucléicos, são compostos por um carboidrato, uma base nitrogenada e a substância Fosfato. Atuam como componentes na estrutura de coenzimas importantes no metabolismo celular e ainda como ativadores e inibidores importantes em várias vias do metabolismo intermediário. Nucleotídeos Ácido Desoxirribonucleico Desoxyribonucleic Acid - DNA Ácido Desoxirribonucleico É um composto orgânico cujas moléculas contêm suas instruções genéticas que coordenam o desenvolvimento de todos os seres vivos. Ácido Desoxirribonucleico Está presente no núcleo das células eucarióticas, nas mitocôndrias, nos cloroplastos, e no citosol das células procarióticas. Ácido Desoxirribonucleico Nas células germinativas e no ovo fertilizado, dirige todo o desenvolvimento do organismo. É duplicado cada vez que a célula somática se divide. Ácido Desoxirribonucleico Os segmentos de DNA que contêm a informação genética são denominados genes. O restante tem importância estrutural. Estrutura - DNA O DNA é um polidesoxirribonucleotídeo formado por milhares destes e ligados entre si através de ligação fosfodiéster. Sua molécula é formada por uma fita dupla antiparalela e enrolada. Estrutura - DNA Uma ligação fosfodiéster é um tipo de ligação covalente que é produzida entre dois grupos hidroxila (–OH) de um grupo fosfato e duas hidroxilas de outras duas moléculas. Éster Estrutura - DNA Fosfodiéster Estrutura - DNA • Na dupla hélice do DNA, as cadeias se dobram em torno de umeixo comum. • No tipo mais comum de hélice, o esqueleto fica na parte externa, enquanto que as bases hidrofóbicas, ficam no lado de dentro da estrutura. Estrutura - DNA As bases nitrogenadas ordenam-se em: A-T (Adenina e Timina) C-G (Citosina com Guanina) Estrutura - DNA Existem 3 formas estruturais do DNA: Forma "B" - é a forma mais comum. A hélice é voltada para a direita e com 10 resíduos por volta, com planos de bases perpendiculares ao eixo helical. Estrutura - DNA Forma "A" - Obtida pela desidratação moderada da forma “B”, é voltada para a direita, mas possui 11 resíduos por volta e as bases estão em um ângulo de 20 graus em relação ao eixo helical. Estrutura - DNA Forma "Z" - A hélice nesta forma é voltada para a esquerda e contém cerca de 12 resíduos por volta. A transição entre as formas de DNA desempenha um papel importante na regulação da expressão genética. Ácido Ribonucleico Ribonucleic Acid - RNA Ácido Ribonucleico Atua como uma espécie de cópia de trabalho, criada a partir do molde de DNA e utilizada na expressão da informação genética. É o responsável pela síntese de proteínas da células, é um polímero de nucleotídeos e as moléculas formadas por RNA possuem dimensões muito inferiores às formadas por DNA. Ácido Ribonucleico A síntese de uma molécula de RNA a partir de um molde de DNA chama-se Transcrição. Ácido Ribonucleico O RNA é constituído por uma ribose, por um grupo fosfato e uma base nitrogenada. A composição do RNA é muito semelhante ao do DNA. Estrutura - RNA Os Ribonucleotídeos contêm as bases: Adenina (A), Guanina (G), Citosina (C) e Uracila (U) Esta está presente em lugar de timina. Estrutura - RNA O RNA, é como a proteína mas não como DNA, pode catalisar importantes reações biológicas. As moléculas de RNA que funcionam como proteínas enzimáticas são chamadas de ribozimas. Estrutura - RNA O Ácido Ribonucleico se divide em 4 classes: O RNA Mensageiro, Transportador, Ribossômico e Pequenos Nucleares. Estrutura - RNA Também chamado de RNAm é o intermediário chave na expressão gênica e atua na tradução do DNA em aminoácidos para "fazer" as proteinas de todos os seres vivos da terra. RNA Mensageiro O RNAt é um RNA de menor peso molecular que transporta os aminoácidos para a síntese proteica. Possui na sua molécula uma região chamada anticódon. RNA Transportador RNA Transportador Existe pelo menos um RNA transportador para cada aminoácido. A união entre o anti-códon e o códon forma a tradução. RNA Ribossômico O RNAr é o componente primário dos ribossomos. Estes são as organelas produtoras de proteínas das células, e existem no citoplasma. Pequeno RNA Nuclear São uma classe de pequenas moléculas de RNA que podem ser encontradas dentro do núcleo de células eucarióticas. São transcritos pela RNA polimerase II ou pela RNA polimerase III. Pequeno RNA Nuclear Estão envolvidos numa variedade de importantes processos tais como o splicing de RNA, a regulação de fatores de transcrição ou RNA polimerase II, e manutenção do telómero. Assista os vídeos https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene- expression-central-dogma/central-dogma- transcription/v/rna-transcription-and-translation Replicação: https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE Transcrição: https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w Tradução: https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYN M https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://pt.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-dogma/central-dogma-transcription/v/rna-transcription-and-translation https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE https://www.youtube.com/watch?v=gI0LsCZHqIE https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w https://www.youtube.com/watch?v=azAaNuUch3w https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNM https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNM https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNM https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNM https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNM https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNM https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNM https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNM https://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNMhttps://www.youtube.com/watch?v=uA1oLM_NYNM