Grátis: A eletroforese em gel é uma técnica muito eficiente para separar, identificar e purificar diferentes fragmentos de moléculas. A migração das partíc... – Questões Respondidas

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A eletroforese em gel é uma técnica muito eficiente para separar, identificar e purificar diferentes fragmentos de moléculas. A migração das partículas no gel tamponado ocorrerá pela formação de um campo elétrico formado pelos dois polos da técnica, indo do polo negativo para o positivo. Diferentes tipos de géis podem ser utilizados para a confecção da técnica. O tamanho dos poros formados por cada um deles será o ponto chave para a análise de diferentes tamanhos das partículas.
Um corante intercalante de DNA muito utilizado para visualização das bandas de eletroforese é:
Brometo de etídio.
Fucsina.
Hematoxilina.
Eosina.
Giemsa.

Praticando Para o Saber

há 3 meses

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há 3 meses

Biologia Molecular - Unidade II

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Respostas

Ed

há 3 meses

O corante intercalante de DNA mais utilizado para visualização das bandas de eletroforese é o brometo de etídio. Ele se liga ao DNA e emite fluorescência sob luz ultravioleta, permitindo a visualização dos fragmentos de DNA separados no gel.

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A técnica de western blotting consiste na detecção de proteínas específicas em amostras de lisados celulares ou amostras de tecidos. Com base nessa técnica, julgue as afirmativas e marque a alternativa CORRETA.
Apenas II e IV são incorretas.
I- Os passos para a elaboração dessa técnica podem ser resumidos em cinco etapas: (1) extração e quantificação das proteínas; (2) fracionamento das proteínas da amostra em um gel de poliacrilamida; (3) transferências dessas proteínas para uma membrana; (4) incubação da membrana com um anticorpo para detectar a proteína específica a ser analisada; e (5) revelação dessa membrana para análise dos dados.
II- Diversos métodos espectroscópicos são utilizados para quantificar proteínas em uma solução. O ensaio de Bradford é o mais utilizado e apresenta diversas vantagens em relação aos demais, como a rapidez, a não exigência de aquecimento e a alta sensibilidade para baixas concentrações de proteínas. O método de Bradford se baseia na mudança de cor do corante Coomassie Blue G-250, em solução ácida (cor azulada) para cor avermelhada na presença de proteínas. As interações hidrofóbicas e iônicas estabilizam o complexo proteína-corante.
III- Para separar as proteínas de uma amostra homogênea, a técnica mais utilizada é a eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE). Inicialmente, prepara-se o gel de SDS-poliacrilamida, que será uma matriz inerte através da qual as proteínas poderão migrar. O gel é preparado pela polimerização de monômeros de acrilamida e o tamanho dos poros do gel pode ser ajustado variando a concentração da acrilamida adicionada para retardar a migração da sua proteína de interesse. As proteínas podem possuir cargas positivas ou negativas, dependendo das cargas dos aminoácidos que as compõem.
IV- Para visualizar uma proteína de interesse, é utilizado um anticorpo específico que vai reagir com um epitopo da proteína, formando um complexo anticorpo antígeno. Esse anticorpo é denominado anticorpo primário, que pode ser policlonal (reconhece mais de um epitopo) ou monoclonal (reconhece apenas um epitopo da proteína de interesse) e é geralmente obtido apenas em camundongo ou em coelho.
Apenas II e IV são incorretas.
Apenas IV é incorreta.
Todas são incorretas.
Apenas I e II são corretas.
Todas são corretas.

As técnicas de biologia molecular têm sido muito úteis no diagnóstico de vírus e bactérias. Em relação a essas técnicas, leia as afirmativas:
Somente as alternativas I, II e III estão corretas.
I – O PCR multiplex representa uma abordagem recente no diagnóstico de vírus respiratórios.
II – O PCR em tempo real é muito utilizado na quantificação de carga viral do HIV (vírus da imunodeficiência humana).
III – Os métodos moleculares não são frequentemente utilizados para diagnóstico de infecções causadas por eucariotos.
IV – O diagnóstico laboratorial rápido e específico é muito útil para o rápido diagnóstico e a Biologia Molecular não é uma ferramenta muito útil nesse sentido.
Somente as alternativas I, II e III estão corretas.
Somente as alternativas I e II estão corretas.
Somente as alternativas I e IV estão corretas.
Todas as alternativas estão corretas.
Todas as alternativas estão erradas.

Considere uma reação de PCR com os seguintes primers: Primer forward (direto): 5’-ATGCGTACCTGA-3’ Primer reverse (reverso): 5’-TGCAGTCCATGA-3’
O fragmento amplificado terá qual orientação?
Ambas as fitas correrão no sentido 5’ → 3’ a partir do mesmo local.
A amplificação ocorrerá no sentido 3’ → 5’, pois é a direção da leitura do DNA.
A amplificação só será possível se os primers estiverem ligados à fita codificadora.
Não é possível determinar a direção da síntese apenas com a sequência dos primers.
Os primers são incorporados nas fitas opostas, orientados para dentro, e a síntese ocorre no sentido 5’ → 3’.

Durante a extração de DNA de sangue periférico utilizando um protocolo padrão com lise celular, remoção de proteínas e precipitação do DNA, qual dos seguintes componentes celulares é a principal fonte de DNA genômico?
Leucócitos, por conterem núcleo com DNA genômico.
Leucócitos, por conterem núcleo com DNA genômico.
Eritrócitos, por serem as células mais abundantes no sangue.
Plaquetas, por conterem fragmentos de DNA mitocondrial.
Plasma, por ser rico em proteínas transportadoras de DNA.
Hemoglobina, por conter códons de alta expressão genética.

Durante a montagem de uma reação de PCR para amplificar um fragmento específico de DNA genômico humano, um aluno observa que não há amplificação após 35 ciclos. Considerando os componentes e condições da reação, qual dos fatores abaixo mais provavelmente explicaria a ausência de produto?
O par de primers não apresenta complementaridade com a sequência-alvo.
A concentração de dNTPs está acima do necessário.
A Taq polimerase foi adicionada antes da desnaturação inicial.
A temperatura de elongação está ajustada corretamente para 72 °C.
O número de ciclos foi insuficiente para gerar produto detectável.

Mamutes lanosos são parentes extintos dos elefantes modernos. Os cientistas descobriram uma série de espécimes de mamutes lanudos preservados no Àrtico e extraíram DNA dos fios de cabelo desses animais. Este DNA foi estudado em laboratório usando as mesmas técnicas usadas para estudar o DNA dos organismos modernos.
Qual das seguintes técnicas poderia ter realizado a etapa de amplificação do processo dos cientistas?
Reação em cadeia da polimerase (PCR).
Eletroforese de DNA.
Transformação bacteriana.
Sequenciamento de DNA.
Minipreparação plasmidial.

O gene flavonoide 3′-hidroxilase (f3′h) influencia a cor da flor em plantas comuns de ipomeia. Um pesquisador coletou DNA de plantas comuns de ipomeia e usou o sequenciamento de DNA para identificar a ordem dos nucleotídeos no gene f3′h de cada planta.
Qual alternativa descreve os resultados mostrados na Figura 1?
A planta 1 e a 2 diferem em pelo menos dois nucleotídeos para o gene f3’h.
A planta 1 não produz uma proteína F3’H funcional, enquanto a planta 2 sim.
A planta 1 faz mais flores que a planta 2.
A planta 1 e a planta 2 têm genomas idênticos.
A planta 1 e a 2 diferem em somente um nucleotídeo para o gene f3’h.

Qual o papel da proteinase K no processo de extração do DNA e em que etapa ela é usada?
A proteinase K é uma enzima que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lise do DNA.
A proteinase K é uma enzima que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lise do DNA.
A proteinase K é uma nuclease que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lise do DNA.
A proteinase K é um ácido nucleico que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lise do DNA.
A proteinase K é uma enzima que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lavagem do DNA.
A proteinase K é uma enzima que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de precipitação do DNA.