Aula de PCR

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Aula de PCR
Exercício 1:
A PCR se constitui hoje no método de rotina para isolar rapidamente sequências específicas a partir de uma mistura complexa de seqüências genômicas ou de cDNAs. Qual dos materiais ou reagentes abaixo relacionados não fazem parte de uma reção de PCR? 
A) DNA ou cDNA. 
B) Enzima polimerase 
C) desoxirribonucleótideos (dNTPs) 
D) Tampão
 E) RNA de alta qualidade 
Exercício 2:
A PCR é um processo iterativo, consistindo de três elementos ou três partes importantes durante os ciclos, são elas: 
A) Iniciação, alongamento e terminção 
B) replicação, transcrição e tradução. 
C) Ciclos contendo desnaturação, pareamento e alongamento. 
D) Ciclos contendo desnaturação, pareamento e extensão. 
E) Nenhuma das anteriores 
Exercício 3:
As seguintes etapas constituem a reação em cadeia da polimerase (PCR), onde milhões de cópias do fragmento de DNA que se quer amplificar são gerados,
 I. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 30s).
 II. Anelamento dos iniciadores no DNA genômico (30-60ºC, 30s). 
III. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 5min).
IV. Síntese do DNA pela polimerase (72ºC, 2-5 min). 
A sequência correta da reação apresentada está na opção: 
A) I – II – III – IV
 B) III – IV – II – I 
C) III – II – IV – I 
D) I – III – IV – II 
E) II – I – IV – III 
Exercício 4:
Em relação à técnica de PCR convencional, analise as alternativas abaixo e assinale a que contém os reagentes utilizados para o seu preparo: 
A) Tampão, zinco, nucleotídeos, DNA ligase, Gel Red. 
B) Água, tampão, cloreto de magnésio, dNTPs, primers, Taq polimerase. 
C) Tampão, zinco, ddNTPs, primers, DNA ligase. 
D) Água, cloreto de magnésio, dNTPs, primers, Taq polimerase. 
E) Taq polimerase, dNTPs, primers, tampão, água. 
Exercício 5:
A PCR é uma técnica de biologia molecular que completa agora mais de 30 anos de existência, tornando-se uma pedra fundamental da genética moderna. Tendo como ponto de partida a amplificação do DNA via PCR, uma gama imensurável de outros procedimentos, estudos, análises e processos pode ser conduzida no laboratório. Por meio dela, é possível identificar bactérias que contenham seu vetor/inserto de interesse; amplificar DNA antigo; executar análises forenses, a partir de amostras biológicas residuais; detectar novas mutações em tecidos de biópsia, e determinar a porcentagem de OGMs em alimentos, entre inúmeras outras aplicações. Em relação à essa técnica, analise as afirmativas a seguir: 
I – A enzima Taq polimerase é na verdade uma DNA polimerase extraída de uma bactéria termo resistente, chamada Thermus aquaticus.
 II – Os nucleotídeos utilizados na PCR são compostos por base nitrogenada (Timina, Adenina, Guanina e Citosina), uma desoxirribose e um fosfato. 
III – Os primers são comercializados em pares, sendo um forward no sentido 5’-3’ (fita contínua) e um reverse no sentido 3’-5’ (fita descontínua). IV – Os primers são comercializados em pares, sendo um forward no sentido 3’-5’ (fita contínua) e um reverse no sentido 5’-3’ (fita descontínua). 
V – Para análise da PCR convencional, a leitura do gel de agarose é feita por um software em um comptador. 
VI – Para análise da PCR convencional, o gel de agarose é submetido à eletroforese e revelado em um fotodocumentador.
 É correto o que se afirma em: 
A) Apenas em II, IV e VI. 
B) Apenas em I, II, III e VI. 
C) Apenas em III e VI. 
D) Apenas em I, II, IV e V. 
E) Apenas em I, III e VI.