Soroneutralização Definitivo

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Soroneutralização
Jamille Pereira Teles
Julia cargnin silva
Kárian Beatriz Silvério
Diagnóstico laboratorial
Os diagnósticos laboratoriais incluem exames realizados em laboratórios de análises clínicas.
Auxiliam no diagnóstico ou confirmação de uma patologia.
Em conjunto com outros dados, define o diagnóstico definitivo de um organismo. 
Pode avaliar a eficácia de um tratamento ou vacinação. 
Diagnóstico Laboratorial
Para o sucesso do diagnóstico laboratorial é preciso de:
Conhecimentos de epidemiologia, patogenia e imunologia das doenças
Coleta, transporte e acondicionamento adequados do material a ser examinado
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL 
métodos de diagnóstico virológicos:
Diretos: identificação do antígeno, vírus ou ácidos nucleicos virais na amostra.
Identificação em cultivo celular
Identificação microscópica
Indiretos: detectam anticorpos específicos contra o vírus, ou seja, detectam a resposta do hospedeiro à infecção. 
Procedimentos sorológicos: 
Soroneutralização 
soroneutralização
O que é
O teste de Soroneutralização é utilizado para detectar anticorpos que possuem a capacidade de neutralizar a infectividade do vírus.
É feito geralmente com soro sanguíneo, mas pode ocasionalmente utilizar outros fluidos corporais que possuam anticorpos. 
Examina-se o soro suspeito frente a um vírus previamente conhecido e codificado.
COMO É FEITA
Antes de fazer a Soroneutralização, alguns procedimentos são necessários:
Amostra de sangue em um tubo sem anticoagulante.
Separação do soro da amostra de sangue total.
A amostra fica inclinada, em temperatura ambiente (20°C) durante 20-30 minutos;
Refrigeração (2-8°C) por 8 horas --> retração do coágulo;
Com uma pipeta de Pasteur, é feita a aspiração e liberação do soro em um novo tubo.
COMO É FEITA
1°passo:
Em microplacas de 96 cavidades são incubadas diluições crescentes do soro-teste com uma quantidade constante do vírus;
2°passo:
São adicionadas as células de cultivo;
Como é feita
3°passo:
As placas são incubadas a 37°C em atmosfera com 5% de CO2 por 48-96h;
4°passo:
Interpretação do resultado com a utilização de microscópio.
Presença de anticorpos
Tapete celular íntegro, o vírus não adere ao receptor celular (proteína bloqueada pelo anticorpo).
Ausência de anticorpos
Efeito citopático no tapete celular, o vírus infecta a célula e causa danos.
Análise do resultado
Vantagens e desvantagens
Vantagens
Avalia o título de anticorpos neutralizantes;
Determina nível de imunidade de uma população; 
Determina o poder imunogênico de vacinas; 
Sensível, específica, qualitativa e quantitativa.
Desvantagens 
Exige cultivo celular e cuidado com a toxidade do soro. 
Rabies virus: RAIVA
O que É?
Zoonose de infecção viral aguda transmitida pela saliva
Cães, gatos, humanos e morcegos hematófagos
Gênero Lyssavirus
Extrema importância para saúde pública
(taxa de mortalidade de quase 100%)
Atualmente controlada, com medidas eficientes de prevenção
(vacina, soro antirrábico)
Vacina e Soroneutralização
Pós-infecção (diagnóstico) ou pós-vacinação (eficácia)
Presente no Manual de Diagnóstico Laboratorial da Raiva do Ministério da Saúde
Indivíduos nos grupos de risco devem fazer o teste a cada 6 meses
Reforço vacinal administrado sempre que a titulação estiver abaixo de 0,5UI/mL
Resposta imune humoral + Resposta imune celular
Determinação de AcN feita após corridos, no mínimo, 10 dias desde a última vacinação
Em casos sem histórico de vacinação, a pesquisa de anticorpos no soro contribui para diagnóstico
Outros exemplos
IBR (Rinotraqueíte Infecciosa Bovina) -> BHVs tipos 1 e 5 (herpesvírus bovino)
Diagnóstico diferencial de Influenza A em suínos
Gênero Pestivirus:
	Febre suína/Peste suína clássica (VPSC)
	Diarreia viral bovina (VDVB)
	“Doença da fronteira” em ovinos (VDBO)
DÚVIDAS?
Referências bibliográficas
https://www.cesadufs.com.br/ORBI/public/uploadCatalago/10303804042012Microbiologia_Geral_Aula_10.pdf
https://www.lume.ufrgs.br/handle/10183/76955
https://www.scielo.br/scielo.php?pid=S1413-95962001000300010&script=sci_arttext&tlng=pt
http://bvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/manual_diagnostico_laboratorial_raiva.pdf
https://www.passeidireto.com/arquivo/26089217/virologia-veterinaria
http://bvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/manual_diagnostico_laboratorial_raiva.pdf
Referências bibliográficas
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24899440/
https://www.lume.ufrgs.br/handle/10183/76955
http://scielo.iec.gov.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1679-49742009000400008
https://www.scielo.br/pdf/cr/v34n6/a32v34n6.pdf
https://vetinlab.com.br/painel/arquivos/vetinlab_site/31_SEPARAR_SORO_SANGUE_TOTAL.pdf