quimica das proteinas

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UNIVERSIDADE DO EXTREMO SUL CATARINENSE
CURSO DE BIOMEDICINA
Bioquímica I
Acadêmicos: Maria Eduarda Magnus 
	
	QUÍMICA DAS PROTEÍNAS
A prática realizada no dia 02 de Julho de 2020 pela turma da 3º fase de biomedicina na matéria de Bioquímica I na ausência do Professor Ricardo Andrez, foi mediada pela Professora Bethina Steiner. O Objetivo principal do experimento é determinar a composição elementar das proteínas, indicar aminas livres e identificar ligações peptídicas. 
No primeiro procedimento denominado “Teste da composição elementar das proteínas” foi realizado em duas etapas. Na primeira colocou-se em um tubo de ensaio um pitada de caseína em pó, em seguida prendeu-se com fita um tira de papel tornassol vermelho no qual foi umedecido com agua destilada, e um tira de papel filtro umedecido com solução de acetato de chumbo. O tubo foi aquecido diretamente em chama fraca para obter os resultados. 
A segunda parte foi realizada com duas gotas de solução de glicina no tubo, utilizando uma tira de papel tornassol vermelho no qual foi umedecido com agua destilada, e um tira de papel filtro umedecido com solução de acetato de chumbo. O tubo foi diretamente aquecido em chama fraca para obter os resultados, no qual estão dispostos de ambos na tabela abaixo. 
	Observações
	Caseína
	Glicina
	Cor do resíduo após aquecimento
	Marrom
	Evaporou
	Cor do papel de tornassol
	Violeta
	Violeta
	Cor do papel de acetato de chumbo
	Amarelo queimado
	Branca
	Aparecimento de vapor d’agua?
	Sim
	Sim
Posteriormente foi realizado o “Teste de Ninhidrina” com a utilização de 6 tubos de ensaio com misturas de reagentes demostrados a seguir:
Tubo 1 recebeu: 5mL de H2O + 0,5mL de solução Ninhidrina 1g/100mL;
Tubo 2 recebeu: 5mL de Glicina + 0,5mL de solução Ninhidrina 1g/100mL;
Tubo 3 recebeu: 5mL de Glutamina + 0,5mL de solução Ninhidrina 1g/100mL;
Tubo 4 recebeu: 5mL de Arginina + 0,5mL de solução Ninhidrina 1g/100mL;
Tubo 5 recebeu: 5mL de Aminoácidos Livres + 0,5mL de solução Ninhidrina 1g/100Ml;
Tubo 6 recebeu: 5mL de Caseína + 0,5mL de solução Ninhidrina 1g/100mL. 
Todos os tubos foram aquecidos em banho-maria fervente durante 10 minutos, logos após pode-se observar os resultados que estão demostrados na tabela abaixo. 
	Tubos
	1
	2
	3
	4
	5
	6
	Resultado
	Incolor 
	Azul 
Forte
	Azul Violeta
	Azul Violeta 
	Azul
Violeta
	Vermelho
A partir dos resultados pode-se observar que no tubo 1 não ocorreu mudança na coloração pelo fato de que a adição de água junto Ninhidrina não tem reação sendo também que as duas são incolores. Foi observado também que o tubo 4 quando já misturado os dois reagentes sendo a Arginina e a Ninhidrina ficou com sua coloração amarela, a após 10 minutos em banho maria resultou na cor azul violeta. No tubo 6 foi possível observar que logo após a adição da solução de Ninhidrina a coloração mudou tornando-se amarela, e logo após os 10 minutos em banho maria ficou avermelhada. 
O Último experimento foi o “Teste do CuSO4” realizado em 6 tubos de ensaio com a adição de diferentes reagentes apresentados a seguir.
Tubo 1 recebeu: 2mL de H2O + 2mL de NaOH 2,5M + 0,5mL de CuSO4;
Tubo 2 recebeu: 2mL de Glicina + 2mL de NaOH 2,5M + 0,5mL de CuSO4;
Tubo 3 recebeu: 2mL de Glutamina + 2mL de NaOH 2,5M + 0,5mL de CuSO4;
Tubo 4 recebeu: 2mL de Arginina + 2mL de NaOH 2,5M + 0,5mL de CuSO4;
Tubo 5 recebeu: 2mL de Aminoácidos Livres + 2mL de NaOH 2,5M + 0,5mL de CuSO4;
Tubo 6 recebeu: 2mL de Caseína + 2mL de NaOH 2,5M + 0,5mL de CuSO4;
A adição do reagente Sulfato de Cobre (CuSO4) foi realizada gota a gota com o tubo sob agitação leve, sendo que 0,5% aproximadamente seria de 3 a 4 gotas. Em seguida já pode-se observar os resultados e as mudanças de coloração de cada tubo como demostrado no tabela abaixo.
	Tubos
	1
	2
	3
	4
	5
	6
	Resultados
	Azul Claro
	Azul Claro
	Azul Claro 
	Azul Claro
	Azul Claro 
	Roxo
Pode-se observar diante a adição dos reagente em cada tubo, que em todos os tubos houveram mudança de coloração seguida da adição do Sulfato de Cobre (CuSO4). Observa-se também que a única diferença através do resultado da coloração de cada tubo, foi obtida no tubo 6, que além de ter NaOH + CuSO4, tinha a presença da solução de Caseína na qual nem um outro tubo tinha, e mesmo os outros 5 tubos contendo reagentes distintos, obtiveram a mesma cor no resultado final. 
Interpretação dos resultados 
a) Qual a função do tubo 1 no teste de CuSO4.
O tubo 1 no teste de sulfato de cobre serve para ter controle diante as outras reações, pelo fato de ser o único tubo com adição de água.
b) Se fosse utilizado o aminoácido da Prolina o resultado do teste da ninhidrina seria negativo. Qual o motivo para a Prolina não formar o complexo de cor azul com a ninhidrina. Identifique esse motivo na estrutura da ninhidrina. 
A prolina não tem o grupo alfa amina livre, pois ela é cíclica e não interage com a ninhidrina igual os aminoácidos que tem cadeia acíclica, o grupo amino da prolina está entre dois carbonos, não na ponta, com isso o resultado seria negativo como mostra abaixo
 
c) Explicar os resultados encontrados para cada solução de aminoácido, para a solução de aminoácidos livres e para a caseína em todos os testes. 
No teste da Ninhidrina os tubos com uso de aminoácidos livre e caseína obtiveram a mesma coloração após os 10 minutos em banho maria. No teste de CuSO4 os mesmo resultaram no mesmo resultado, mesmo os aminoácidos livre não terem ligações peptídicas entre si.