Teste de ELISA/ Imunologia/Veterinária/UFPEL/2021

Prévia do material em texto

Universidade Federal de Pelotas – UFPel 
Faculdade de Veterinária 
Disciplina de Imunologia Veterinária 
Pelotas, agosto de 2013 
 Teste baseado na reação antígeno X 
anticorpo 
 Detecta antígenos ou anticorpos específicos 
por meio de reações enzimáticas 
 Existem kits comerciais disponíveis 
 Teste pode ser desenvolvido no laboratório 
 
 
VANTAGENS 
 Rapidez 
 Altamente sensível e 
específico 
 Custo relativamente 
baixo 
 Fácil execução 
 
DESVANTAGENS 
 Falso-positivos 
(relacionado à pureza 
do antígeno) 
 Necessidade de 
equipamentos 
específicos 
 Identificação de antígenos ou anticorpos 
através de uma reação enzimática. A 
interação enzima-substrato transforma um 
cromógeno incolor em um produto colorido. 
 
 Detecção e/ou quantificação de antígenos ou 
anticorpos específicos (IgA, IgG, IgM). 
 Placas de poliestireno 
 Micropipetadora multicanal e ponteiras 
 Reservatório (“canoa”) 
 Reagentes 
 Espectrofotômetro 
 
 
 Anemia Infecciosa Equina; 
 Vírus da Leucose Enzoótica Bovina (BLV); 
 Diarréia Viral Bovina (BVD); 
 Brucella abortus (B. abortus); 
 Rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR/BHV-1); 
 Toxoplasmose (Toxoplasma gondii); 
 Parvovirose Canina; 
 Cinomose; 
 Bouba aviária; 
 Doença de Newcastle; 
 Gumboro; 
 Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV); 
 Vírus da Leucemia Felina (FeLV). 
 
 Detecção de antígeno 
 ELISA sanduíche 
 ELISA de captura para 
antígeno 
 ELISA de competição 
com anticorpo marcado 
 Detecção de anticorpo 
 ELISA indireto 
 ELISA direto 
 ELISA de bloqueio 
 ELISA de captura para 
anticorpo 
 
 Detecção de anticorpos! 
 Sensibilização da placa com o antígeno 
 Lavagem 
 Bloqueio dos sítios livres 
 Lavagem 
 Adição do soro 
 Lavagem 
 Adição do conjugado anti-Ig 
 Lavagem 
 Adição do substrato e cromógeno 
 Produção de cor 
Ag Ag 
C
o
n
ju
g
a
d
o
 
(a
n
ti
 Ig
G
) 
Enzima 
(peroxidase) 
Substrato+cromógeno 
Substrato+cromógeno 
Enzima 
(peroxidase) 
Conjugado 
(anti IgG) 
Ag 
 
ELISA Indireto(detecta anticorpos) 
Ag Ag Ag 
Resultado Negativo