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FACULDADE NEWTON PAIVA VANESSA BARBOSA DIAS Doenças Parasitárias e Micóticas Contagem de ovos por gramas de fezes (OPG) em equinos Belo Horizonte 2018 VANESSA BARBOSA DIAS EXAME DE OPG (OVOS POR GRAMAS DE FEZES) EM CAVALOS Identificar e monitorar os parasitas presentes nas fezes dos equinos, essas são as principais funções do exame de O.P.G. Matérias necessários para coleta: Luva de palpação Etiqueta e caneta esferográfica Vaselina liquida Isopor com gelo Além disso tenha o animal sempre bem contido. A coleta de fezes deve ser feita diretamente da ampola retal, utilizando uma luva de palpação já lubrificada com a vaselina liquida, para esse exame é necessário 10 gramas de fezes, na forma pratica uma silaba já é o suficiente ou seja uma quantidade que preencha a palma da mão. Após a retirada da amostra, inverta a luva e tire todo ar presente na amostra. O próximo passo e a identificação, escreva na etiqueta o nome ou número que identifique o animal, lote. Coloque essa etiqueta dentro da luva, de outro no. Coloque a amostra na caixa de isopor com gelo até que seja enviado para o laboratório. As fezes poderão ser conservadas por 24 à 48 horas. Não misture as amostras, identifique muito bem cada amostra coletada. Conservação química Conservantes químicos são utilizados quando o tempo decorrente entre a colheita do material e seu envio ao laboratório for maior que 48 horas, ou quando inexistirem condições de conservação a frio. Alternativas: Para a conservação de ovos e larvas de helmintos pode -se utilizar formol a 10% ou formol-glicerina 5% (na proporção de 1:1). Contagem de ovos por grama de fezes (gordon e withl ock –Modificado) Material: Balança Provetas graduadas Solução para flutuação Bastão de vidro ou palito Gaze ou peneira de chá Béqueres ou recipientes similares Pipetas de Pasteur Câmara de contagem de McMaster Microscópio A técnica d e Máster é a mais usada para demonstrar a presença d e ovos de helmintos e oocistos de coccídeos em amostras de fezes. Este método utiliza uma câmara de contagem que permite examinar Microscopicamente um volume conhecido (2 x 0,15 ml) de suspensão fecal. Uma quantidade conhecida de fezes é misturada a um volume conhecido de solução de flutuação e o número de ovos por grama de fezes pode ser calculado. Esse valor é conhecido como o.p.g. As quantidades de fezes e líquido são escolhidas de forma que a contagem de ovos possa ser facilmente derivada pela multiplicação do número de ovos sob a área delimitada por um simples fator de conversão. A câmara de McMaster apresenta dois compartimentos de contagem, cada um com um retângulo de 0,15 cm altura e 1 centímetro quadrado de área. Quando preenchida com a suspensão de fezes em solução de flutuação, a maior parte dos debris (fibras e resíduos da digestão) se sedimenta no fundo, enquanto os ovos leves e oocistos flutuam, aderindo na superfície. Os ovos presentes abaixo da retícula podem ser facilmente contados. Os compartimentos de contagem são delimitados por linhas gravadas na Superfície de cada um, e são subdivididos por traços para facilitar a contagem. O volume de suspensão fecal encontrado em cada compartimento é obtido pela fórmula Área x profundidade = volume Método 1. Pesar 2 gramas de fezes. 2. Triturar as fezes em um copo com um bastão de vidro 3. Diluir com 29 ml de solução salina saturada ou com sulfato de zinco. 4. Homogeneizar bem a suspensão e transferir para um béquer ou recipiente similar Passando-a através de peneira de chá ou em gaze dupla. 5. Adicionar mais 29 ml de solução hipersaturada no copo onde foi preparada a Suspensão inicial e verter a solução sobre a peneira ainda com fezes do passo anterior. 6. Sob homogeneização, retirar um a alíquota com pipeta Pasteur e aplicar com cuidado Em cada um dos compartimentos da câmara de McMaster. 7. Deixar a câmara e m descanso por 5 minutos e examinar em microscópio. Primeiramente focar as linhas das retículas. Em seguida posicionar em um dos cantos de Uma retícula e alterando ligeiramente o foco, focar os ovos/oocistos. 8. Cada área definida por uma retícula deverá ser inteiramente coberta e os parasitas detectados contados progressivamente. 9. Para o cálculo de O.P.G, multiplicar a soma dos ovos encontrado s nos dois Compartimentos por 50 ou 100, dependendo da quantidade de fezes utilizada. Fundamentos da Técnica O cálculo do volume contido nem cada compartimento é obtido pela seguinte fórmula: 1cm2 x 0,15cm = 0,15 cm3 = 0,15 ml. Considerando-se os dois compartimentos: 0,15ml x 2= 0,30 ml (volume total). Cálculo do fator Se em 0,30ml contamos x ovos Em 60ml teremos y ovos Utilizando 2g de fezes, o caçulo será dividido por 2, pois o resultado é por 1 g de fezes Caso utilizarmos 4 gramas de fezes, o valor será dividido por 4: Assim y= x .50 Identificação do resultado: Dependendo dos ovos observados no exame, a contagem Deve ser feita separadamente: Strongylida Strongyloides Neoascaris Trichuris Nematodirus Ovos de cestódeos serão colocados em observação, entretanto não deverão ser contados. Significado do resultado do OPG Após o resultado, valores acima de 200 OPG você deve vermifugar, resultados igual ou abaixo de 200 OPG não precisa realizar o tratamento, além disso para saber se a propriedade possui resistência parasitaria ou chegar a eficácia de algum anti-helmíntico, você deve fazer a coleta antes do tratamento e 10 à 14 dias depois da vermifugação. O resultado do OPG não é indicativo do grau de infecção do hospedeiro, pois a quantidade de ovos nas fezes podem ser influenciados por vários fatores, tais como: - Hora do dia em que a colheita foi realizada; - Patogenicidade do parasito; - Tratamento prévio dos animais; - Relação machos e fêmeas hospedados pelo parasito; - Fatores relacionados ao hospedeiro, como, idade, nutrição, imunidade, alterações fisiológicas e patológicas do sistema digestivo do hospedeiro. 0,30 . 2 Y FACULDADE NEWTON PAIVA VANESSA BARBOSA DIAS FORRAGEM Exercícios de forragem Belo Horizonte 2018 VANESSA BARBOSA DIAS FACULDADE NEWTON PAIVA VANESSA BARBOSA DIAS DOENÇAS PARASITÁRIAS E MICÓTICAS Caça-palavras Helmintos Belo Horizonte 2018 VANESSA BARBOSA DIAS