Calculo hepes

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ANEXOS 
 
ANEXO I 
 
Cálculos para a Preparação de Solução Tampão de Fosfato de Potássio 
0,1 M, p.H. 6,8 
 
 Dados: 
M(K2HPO4) = 174,18 g/mol 
M(KH2PO4)=136,09 g/mol 
 
 Cálculo do número de mol n necessário para a realização de uma solução 
de concentração 1M e de volume 25 mL: 
 
 
 
 Cálculo da massa m correspondente a 0,025 mol de cada um dos 
reagentes: 
 
 
 de K2HPO4 
 
 
 de KH2PO4 
 
 
 
ANEXO II 
 
Cálculos para Preparação de Solução Tampão de Tris-HCl 0,1 M, p.H. 7,0 
 
 Dados: 
M(HCl) = 36,5 g/mol 
Densidade da solução de HCl a 37% = 1,19 g/mL 1,19 Kg/L 
M((HOCH2)3CNH2)= 121 g/mol 
 
 Cálculo do número de mol n necessário para a realização de uma solução 
de concentração 0,1M e de volume 100 mL: 
 
 
 
 Cálculo da massa m, em gramas, correspondente a 0,010 mol de 
(HOCH2)3CNH2: 
 
 de (HOCH2)3CNH2 
 
 Cálculo do volume v, em mL, de HCl a 37 % necessário para a realização 
de uma solução de concentração 0,1M e de volume 100 mL: 
 
1. Cálculo do valor de massa m, em gramas, de HCl por litro de 
solução: 
 de HCl por Litro de solução 
 
2. Cálculo da massa m, em gramas, correspondente a 0,010 mol 
necessárias para a realização da solução de HCl de 
concentração 0,1M e de volume 100 mL: 
 
 de HCl 
 
 
3. Cálculo do volume v, em mL, da solução de HCl 37% necessário: 
 
 de solução de HCl a 37%. 
 
 
 
 
ANEXO III 
 
Cálculos para Preparação das soluções padrão de o-np 
 
 Dados: 
M(C6H5NO3) = 139,1 g/mol 
 
 Cálculo do número de moles n necessário para a realização de uma 
solução de concentração 1 mM e de volume 100 mL: 
 
 
 
 Cálculo da massa m, em gramas, correspondente a de 
C6H5NO3: 
 
 de C6H5NO3 
 
 Cálculo dos volume V1, em mL, que irão ser retirados da solução-mãe 
para realização das soluções padrão: 
 
 
 
Sendo: 
C1 a concentração da solução-mãe – 1000 µM; 
V1 o volume a ser retirado da solução-mãe; 
C2 a concentração da solução padrão a realizar – de 5 a 50 µM; 
V2 o volume total da solução padrão – 10 mL. 
 
 
 
Tabela A-I. Resumo dos valores obtidos nos cálculos necessários para a realização das soluções padrão 
de o-np 
Volume retirado da 
solução-mãe (mL) 
Volume de solução 
tampão adicionada 
(mL) 
Volume total da 
solução (mL) 
Concentração da 
solução padrão 
(µM) 
0,05 9,95 10 5 
0,10 9,90 10 10 
0,15 9,85 10 15 
0,20 9,80 10 20 
0,25 9,75 10 25 
0,30 9,70 10 30 
0,35 9,65 10 35 
0,40 9,60 10 40 
0,45 9,55 10 45 
0,50 9,50 10 50 
 
 
ANEXO IV 
 
Cálculos para Preparação das soluções padrão de Lactozym 2600 L® para 
o ensaio de Bradford 
 
 Dados: 
Densidade de Lactozym 2600 L®= 1,115 g/mL 
 Cálculo da concentração C2 , em grama por mililitro, da solução mãe: 
 
 
 
 
 Cálculo das concentrações C2, em grama por mililitro, das soluções 
padrão feitas a partir da solução-mãe: 
 
 
 
 
Sendo: 
C1 a concentração da solução-mãe – 0,1115 g/mL; 
V1 o volume que foi retirado da solução-mãe – de 2 a 60 µL; 
C2 a concentração da solução padrão; 
V2 o volume total da solução padrão – 1 mL. 
 
 
 
 
 
Tabela A-II. Resumo dos valores obtidos nos cálculos necessários para a realização das soluções padrão 
de proteína 
Volume retirado da 
solução-mãe (µL) 
Volume de solução 
tampão adicionada 
(µL) 
Volume total da 
solução (mL) 
Concentração da 
solução padrão 
(g/mL) 
2 998 1 0,0002 
5 995 1 0,0006 
10 990 1 0,0011 
15 985 1 0,0017 
20 980 1 0,0022 
25 975 1 0,0028 
30 970 1 0,0033 
40 960 1 0,0045 
50 950 1 0,0056 
60 940 1 0,0067 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ANEXO V 
 
Cálculo para a Preparação das diluições de Lactozym 2600 L utilizadas 
paras os ensaios com enzima livre 
 
 Dados: 
Densidade de Lactozym 2600 L®= 1,115 g/mL 
 
 Cálculo das concentrações C2, em grama por mililitro, das soluções 
padrão feitas a partir de Lactozym 2600 L®: 
 
 
Sendo: 
C1 a concentração da preparação enzimática – 1,115 g/mL; 
V1 o volume que foi retirado da solução-mãe – de 0,004 mL a 1 mL; 
C2 a concentração da solução padrão; 
V2 o volume total da solução padrão – 10 mL. 
 
Tabela A-III. Resumo dos valores obtidos nos cálculos necessários para a realização das diluições de 
Lactozym 2600 L 
Volume retirado da 
solução-mãe (µL) 
Volume de solução 
tampão adicionada 
(µL) 
Volume total da 
solução (mL) 
Concentração da 
solução padrão 
(g/mL) 
0,02 9,980 10 0,0023 
0,01 9,990 10 0,0012 
0,008 9,992 10 0,0009 
0,005 9,995 10 0,0006 
0,004 9,994 10 0,0005 
 
ANEXO VI 
 
Cálculos para a Preparação de Solução de Ácido Sulfúrico 12N 
 
 Dados: 
Densidade de H2SO4 95-97%= 1,84 g/mL 
Equivalente-grama (E) de H2SO4= 49 g 
 
 Cálculo do número de equivalentes, nº eq., existentes numa solução de 
H2SO4 de concentração 12N e de volume 50 mL: 
 
 
 
 Cálculo da massa, m, de H2SO4 existente em 0,6 equivalentes: 
 
 
 
 
 
 Cálculo do volume, v, de solução de H2SO4 a 95-97% necessária para a 
realização de uma solução de H2SO4 de concentração 12N, tendo em 
conta a massa, m¸ calculada anteriormente: 
 
 
 
 
 
ANEXO VII 
 
Cálculo para a Preparação das soluções padrão de glucose 
 
 Dados: 
M(C6H12O6) = 180,16 g/mol 
 
 Cálculo do número de moles n necessário para a realização de uma 
solução de concentração 50 mM e de volume 50 mL: 
 
 
 
 Cálculo da massa m, em gramas, correspondente a de 
C6H12O6: 
 
 de C6H12O6 
 
 Cálculo dos volume V1, em mL, que irão ser retirados da solução-mãe 
para realização das soluções padrão: 
 
 
 
Sendo: 
C1 a concentração da solução-mãe – 50 mM; 
V1 o volume a ser retirado da solução-mãe; 
C2 a concentração da solução padrão a realizar – de 0,25 a 2 mM; 
V2 o volume total da solução padrão – 10 mL. 
 
 
 
Tabela A-IV. Resumo dos valores obtidos nos cálculos necessários para a realização das soluções padrão 
de glucose 
Volume retirado da 
solução-mãe (mL) 
Volume de solução 
tampão adicionada 
(mL) 
Volume total da 
solução (mL) 
Concentração da 
solução padrão 
(mM) 
0,05 9,95 10 0,25 
0,10 9,90 10 0,50 
0,15 9,85 10 0,75 
0,18 9,82 10 0,90 
0,20 9,80 10 1,00 
0,25 9,75 10 1,25 
0,30 9,70 10 1,50 
0,35 9,65 10 1,75 
0,38 9,62 10 1,90 
0,40 9,60 10 2,00