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CENTRO UNIVERSITÁRIO UNIMETA BACHARELADO EM FARMÁCIA HEMATOLOGIA CLÍNICA ANA PAULA MATTOS ANA PAULA MOREIRA GABRIELA CRISTINA DE . ROSAS KEFFTY JONNATHA H. DE ALMEIDA ROMEU DE OLIVEIRA NERY TAILA ADRIANE BARBOSA DA SILVA Relatório da aula prática 02: Esfregaço Sanguíneo Rio Branco, Acre 2019 ANA PAULA MATTOS ANA PAULA MOREIRA GABRIELA CRISTINA DE . ROSAS KEFFTY JONNATHA H. DE ALMEIDA ROMEU DE OLIVEIRA NERY TAILA ADRIANE BARBOSA DA SILVA Relatório da aula prática 02: Esfregaço Sanguíneo Relatório de aula prática apresentado à disciplina de Hematologia Clínica, como parte dos requisitos para obtenção da Avaliação 2. Professora: Luciane Macedo Rio Branco, Acre 2019 1 INTRODUÇÃO 4 2 OBJETIVO 5 3 MATERIAIS UTILIZADOS 6 4 DESENVOLVIMENTO 7 4.1 TÉCNICA DE ESFREGAÇO 8 4.2 COLORAÇÃO DO ESFREGAÇO 9 4.3 TUBOS HEMATOLÓGICOS 10 5 CONCLUSÃO 12 1 INTRODUÇÃO Nas inúmeras doenças que existem, algumas podem influenciar no número e na morfologia das células sanguíneas, como por exemplo as anemias, e neste contexto o esfregaço sanguíneo é uma técnica que viabiliza a identificação de possível alterações celulares. Nem sempre um diagnóstico definitivo é confimado por a partir de um esfregaço, entretanto, ele serve na rotina laboratorial como um indicativo/base para a realização de outros exames. 4 7 2 OBJETIVO Praticar a técnica de esfregaço sanguíneo confeccionando um, e localizar células leucocitárias. 3 MATERIAIS UTILIZADOS · Lâmina · Extensora · Corantes · Algodão/gase · Álcool 70% · Descarte · Capilares · Amostra sanguínea · Microscópio. 4 DESENVOLVIMENTO Nesta aula prática, foi praticada a técnica de esfregaço sanguíneo para que posteriormente o esfregaço confeccionado em sala, pudesse ser utilizado para visualização no microscópio óptico. Para realização desta prática, existem alguns conhecimentos que precisam ser observados: técnica do esfregaço (passo a passo), coloração do esfregaço (corantes), tubos hematológicos. 4.1 TÉCNICA DE ESFREGAÇO Para que seja preparada uma lâmina de qualidade, que proporcione uma boa visualização, é preciso observar alguns detalhes. Um esfregaço confeccionado com excesso de amostra, inviabiliza a leitura em microscópio, e o mesmo acontece com pouca quantidade. Portanto, vejamos o passo passo para a produção de um esfregaço sanguíneo de qualidade: 1. Apoiar a lâmina de microscopia, já com a identificação do paciente, sobre uma superfície limpa. Certificar-se de que a lâmina tem boa qualidade e não está suja ou possui vestígios de gordura, o que pode prejudicar o teste. 2. Colocar uma pequena gota de sangue próxima a uma das extremidades da lâmina. 3. Com o auxílio de outra lâmina, colocar a gota de sangue em contato com sua borda. Para isso a lâmina extensora deve fazer um movimento para trás tocando a gota com o dorso em um ângulo 45°. 4. O sangue da gota irá se espalhar pela borda da lâmina extensora por capilaridade. 5. A lâmina deve então deslizar suave e uniformemente sobre a outra, em direção oposta a extremidade em que está a gota de sangue. O sangue será “puxado” pela lâmina. 6. Depois de completamente estendido, o sangue forma uma película sobre a lâmina de vidro. 7. Deve-se deixar que o esfregaço seque sem nenhuma interferência. 8. Seguir para o passo de coloração. 4.2 COLORAÇÃO DO ESFREGAÇO Nesta aula prática foi feita a coloração deominada Panótico Rápido.Baseia-se no princípio de coloração hematológica estabelecida por Romanowsky. É um corante utilizado em análises laboratoriais com a finalidade de se obter resultados de forma mais rápida. A extensão hematológica é submetida a ação de um fixador e duas soluções corantes, por meio de imersões rápidas, e ao final da última imersão encontra-se pronta para leitura. Os corantes são uma mistura de corantes de características neutras, dependentes do pH da solução corante, que em condições apropriadas coram os componentes nucleares e citoplasmáticos dos leucócitos, com predominância de tons vermelhos (quando ácidos) e azulados diversos (quando básicos). Corante básico → cora estruturas ácidas, chamadas basófilas Corante ácido → cora estruturas básicas, chamadas acidófilas/eosinófilas. Após feito o esfregaço, a coloração deve ser realizada da seguinte forma: 1. Colocar as lâminas cuba no fixador e deixar por 10 segundos ou mergulhar 5 vezes. 2. Aos 10 segundos retirar do corante e deixar escorrer durante 5 segundos. 3. Colocar as lâminas no segundo corante e deixar por 10 segundos ou mergulhar 5 vezes 4. Retirar do corante e deixar escorrer durante 5 segundos. 5. Colocar as lâminas no terceiro corante e deixar por 20 segundos ou mergulhar de 9 a 7 vezes. 6. Retirar do corante e deixar escorrer durante 5 segundos e lavar as lâminas com água. 4.2 TUBOS HEMATOLÓGICOS Os tubos de coleta de sangue a vácuo se tornaram uma importante ferramenta para a área de análises clínicas e diagnóstico médico. Para uma coleta eficiente, é necessário que se conheça quais tubos existentes e suas especificidades: Citrato de Sódio Azul O Citrato de Sódio Tamponado é utilizado para prova de coagulação em amostras. Diferentes concentrações de Citrato de Sódio podem ter efeitos significativos nas análises terapias anti-trombóticas, Tempo de Protombina (TP) e Tempo de Tromboplastina ativada (TTPa). Ativador de Coágulo Vermelho Possui ativador de coágulo (sílica) jateado na parede do tubo, fazendo com que o processo de coagulação da amostra seja acelerado. Utilizados para determinação em soro nas áreas de Bioquímica e Sorologia. Podem ser utilizados para tipagem ABO, RH, pesquisa de anticorpos, fenotipagem eritrocitária e teste de antiglobulina direta. Ativador de Coágulo + Gel Amarelo Contém ativador de coágulo jateado na parede do tubo que faz com que o processo de coagulação seja acelerado e gel separador, para obtenção de um soro com melhor qualidade. Utilizados em rotinas de bioquímica, sorologia, imunologia, marcadores cardíacos e tumorais. EDTA Lilas/rosa Possui EDTA jateado na parede do tubo e são utilizados em bancos de sangue. O EDTA é o anticoagulante recomendado para rotinas de hematologia por ser o melhor anticoagulante para a preservação da morfologia celular. Heparina de Lítio Verde Possuem Heparina de Lítio jateada na parede do tubo. São utilizados quando é necessário o uso de plasma para determinações Bioquímicas. Estes aditivos são anticoagulantes que ativam as enzimas antiplaquetárias, bloqueando a cascata de coagulação. Fluoreto de Sódio + EDTA Cinza Utilizados na dosagem de glicose, lactato e hemoglobina glicada no plasma. O Fluoreto de Sódio é utilizado como inibidor glicolítico e o EDTA como anticoagulante, preservando a morfologia celular. Por meio de uma coleta adequada, consequentemente a amostra estará apropriada para um esfregaço de qualidade. Uma coleta feita em tubo inadequada, a amostra é comprometida e posteriormente um possível esfregaço também é comprometido. 5 CONCLUSÃO O conhecimento teórico associado á prática, nos proporcinou uma execução satisfatória da técnica de esfregaço,e isso constatou-se através da visualização de células leucocitárias na lâmina confeccionada. image2.jpeg image1.png