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INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE CURSO DE BIOMEDICINA Profa. Dra. Karina Dabbas (karina.dabbas@docente.unip.br) Aula 1 – Apresentação da disciplina, conteúdo programático, bibliografia e sistema de avaliação. Tipos de amostras utilizadas no laboratório de bioquímica. Contextualização pré-analítica no laboratório de bioquímica ❖ Conhecimento, Habilidades e Atitudes nos processos pré- analítico, analítico e pós-analítico dos exames que envolvem material biológico. ❖ Causas pré-analíticas de variações dos resultados de exames laboratoriais; Coleta e armazenagem de amostras de sangue; Instruções sobre Coleta de Amostras para os Pacientes; Critérios de rejeição da amostra; Cadastro de Amostras e de Pacientes. ❖ Variação cronobiológica; Gênero; Idade; Posição; Atividade física; Jejum; Dieta; estilo de vida, exercícios físicos. CONTEÚDO PROGRÁMATICO ❖ Instalação e Infraestrutura do Local de Coleta •Recepção e sala de espera •Área física da sala de coleta •Salas para coleta de outros líquidos biológicos •Sala de coleta infantil •Equipamentos e infraestrutura ❖ Procedimentos de Higienização e Antissepsia •Higienização correta das mãos •Colocação adequada das luvas •Antissepsia do local da punção CONTEÚDO PROGRÁMATICO Coleta de Sangue Venoso – Materiais e Procedimentos •Locais de Escolha e Áreas a Evitar •Técnicas para Evidenciar a Veia •Uso Correto do Torniquete •Posição do Paciente • Sentado • Em leito •Técnicas de Coleta • Sistema a vácuo • Seringa e agulha •Agrupamento de Exames na Coleta •Sequência de Tubos a Vácuo (CLSI) • Tubos plásticos • Pediatria e geriatria •Homogeneização dos Tubos •Prevenção de Hemólise • Pré-coleta • Pós-coleta •Prevenção de Lipemia Coleta e Transporte de Amostras – Fezes e Outros Materiais Amostras Fecais – Exames Parasitológicos •Objetivo: Detecção de protozoários, helmintos e ovos de parasitas. •Tipos de exames fecais: • Protoparasitológico • Pesquisa de sangue oculto • Fita adesiva (Enterobius) CONTEÚDO PROGRÁMATICO ❖ Secreção Vaginal •Objetivo: Diagnóstico de infecções ginecológicas (bacterianas, fúngicas, parasitárias) •Procedimento: • Coletar com swab estéril da parede vaginal. ❖ Esperma (Sêmen) •Objetivo: Análise de fertilidade ou exame de espermograma. CONTEÚDO PROGRÁMATICO ❖Urina de Rotina (EAS / Urina tipo I) •Objetivo: Avaliação geral do trato urinário, função renal e infecções • Urina de 24 Horas •Objetivo: Dosagem de substâncias excretadas (proteínas, creatinina, eletrólitos) • Urina de Pacientes com Sonda Vesical de Demora •Objetivo: Avaliação de infecção, função renal ou outros exames específicos CONTEÚDO PROGRÁMATICO ❖ Trato Respiratório Inferior •Escarro ❖ Trato Respiratório Superior •Orofaringe •Swab Nasal ❖Ocular: swab estéril, coletar secreção conjuntival ❖Líquor – Punção Lombar (PL) •Objetivo: Diagnóstico de meningites, hemorragias e outras condições neurológicas CONTEÚDO PROGRÁMATICO ❖Micológico direto e cultura para fungos de unhas e lesões superficiais (pele, pelo e couro cabeludo) ❖ Normas técnicas de acondicionamento, embalagem e transporte de amostras biológicas. ❖ ANVISA: RESOLUÇÃO - RDC Nº 153, DE 14 DE JUNHO DE 2004 - Dispõe sobre Regulamento Técnico para os procedimentos hemoterápicos. CONTEÚDO PROGRÁMATICO SETOR DE BIOQUÍMICA CLÍNICA SETOR DE HEMATOLOGIA SETOR DE PARASITOLOGIA SETOR DE URINA SETOR DE IMUNOLOGIA SETOR DE MICROBIOLOGIA SETOR DE COLETA DE MATERIAL BIOLÓGICO Aproximadamente 70% das decisões clínicas são fundamentadas em exames laboratoriais. ➢ Sangue; ➢ Urina; ➢ Aspirado de suco gástrico; ➢ Líquor ➢ Entre outras. ➢ Diagnóstico de patologia; ➢ Exclusão de diagnóstico; ➢Monitoramento de tratamentos; ➢Monitoramento do curso da doença; ➢ Estabelecimento do prognóstico; ➢ Triagem Quais amostras podemos analisar na Bioquímica? Por que realizar o diagnóstico bioquímico? SETOR DE BIOQUÍMICA CLÍNICA Fonte: internet Um resultado confiável depende de uma coleta adequada. Hemograma! Vocês conhecem esse exame? Fonte: internet O resultado de um exame laboratorial depende do preparo do paciente, da forma da coleta do material e do manuseio da amostra coletada. Quem já fez exame de urina?? Dados compilados de diversos autores Em relação à coleta de sangue para a realização de exames laboratoriais, é importante que se conheçam, controlem e, se possível, evitem algumas variáveis capazes de interferir com a exatidão dos resultados. ✓ As variáveis relacionadas ao paciente: atividade física, idade, sexo, variações cicardianas, postura, estresse, tabagismo e medicação. ✓ Tubos e aditivos: Os tubos de coleta de sangue são baseados em código de cor relativo ao aditivo ou preservativo adequados para exames específicos. Fase pré-analítica ✓Transporte e armazenamento: Os constituintes do sangue, urina e outros líquidos corporais podem alterar durante transporte ou armazenamento. Fase pré-analítica Dados compilados de diversos autores Influência nos exames laboratoriais •Parâmetros bioquímicos variam conforme a idade: • Maturidade funcional de órgãos e sistemas • Intervalos de referência devem considerar a faixa etária Exemplos: •Com crescimento esquelético e o desenvolvimento muscular os níveis de fosfatase alcalina sérica e creatinina aumentam; • Até a puberdade há poucas diferenças nos dados laboratoriais entre meninos e meninas. Após este período, as alterações características dos níveis de hormônios sexuais tornam-se evidentes. • O nível alto de ácido úrico observado no recém-nascido diminui nos primeiros 10 anos de vida e, em seguida aumenta, em especial nos meninos, até 16 anos de vida (Young, 2001). Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/Medicina Laboratorial (SBPC/ML) : coleta e preparo da amostra biológica Idade Influência nos exames laboratoriais •Diferenças hormonais específicas •Características metabólicas e massa muscular distinta •Parâmetros sanguíneos e urinários variam entre homens e mulheres •Intervalos de referência devem ser específicos para cada gênero Exemplos: •Mulheres → ↓ cálcio sérico, albumina, hemoglobina, ferro •Homens → ↑ creatinina sérica (maior massa muscular) Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/Medicina Laboratorial (SBPC/ML) : coleta e preparo da amostra biológica Gênero •Essa alteração envolve as alterações cíclicas na concentração de determinados parâmetros em função do tempo, podendo ser diária, mensal, sazonal, anual etc. Variação cicardiana (diária) •“Alguns constituintes dos fluidos orgânicos podem apresentar variações cíclicas diária, mensal, sazonal, anual, etc. Um bom exemplo de variação circadiana diária acontece, por exemplo, nas concentrações sanguíneas do ferro e do cortisol. Nesses dois exemplos, as amostras coletadas à tarde podem resultar valores mais baixos do que aqueles obtidos pela manhã, cuja magnitude de variação pode alcançar patamares próximos a 50%”. Variação cronobiológica Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/Medicina Laboratorial (SBPC/ML) : coleta e preparo da amostra biológica Postura corporal •A postura do paciente durante a flebotomia pode ter efeito sobre vários resultados laboratoriais. •“Quando o indivíduo se move da posição supina para a posição ereta, ocorre um afluxo de água e substâncias filtráveis do espaço intravascular para o intersticial. Substâncias não filtráveis, tais como as proteínas de alto peso molecular e os elementos celulares terão sua concentração relativa elevada até que o equilíbrio hídrico se restabeleça. Ex.: albumina, colesterol, triglicerídeos, hematócrito, número ...” Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/Medicina Laboratorial (SBPC/ML) : coleta e preparo da amostra biológica Jejum •Alguns parâmetros permitem coleta em pacientes recém- alimentados. Contudo, em exames como perfil lipídico, recomenda-se jejum de 12 horas (triglicérides) no mínimo. • ????? Dados compilados de diversosautores Atividade física • Possui efeito transitório sobre alguns componentes sanguíneos em decorrência da mobilização de água e outras substâncias, além das variações nas necessidades energéticas do metabolismo. Aumento na atividade sérica de algumas enzimas pode persistir por 12 a 14 horas. Por esta razão, prefere-se a coleta com o paciente em condições basais. •Exemplos: •O exercício pode elevar a creatinofosfoquinase (CPK) e leucocitose, por neutrofilia, após mobilização do pool marginal de neutrófilos. •atividade física pode afetar a concentração de algumas substâncias, como sangue e proteína, na urina Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/Medicina Laboratorial (SBPC/ML) : coleta e preparo da amostra biológica Gravidez: Variáveis Fisiológicas Dados compilados de diversos autores Altitude: * Em pessoas que vivem em grandes altitudes observa-se elevação do hematócrito (cerca de 8% quando a 1.400 m) Variáveis fisiológicas Dados compilados de diversos autores Aplicação do torniquete: •Exceder a 1 a 2 minutos provoca aumento da pressão intravascular facilitando a saída de líquido e de moléculas pequenas para o espaço intersticial resultando na hemoconcentração. •Pode-se observar elevação de 10 a 15% no nível de colesterol com garroteamento superior a 5 minutos. Variáveis referentes a Coleta de sangue Dados compilados de diversos autores • Hemólise • Amostra coagulada • Microcoágulo • Amostra com coleta inadequada • Amostra contaminada • Falta de dados complementares • Material insuficiente • Amostra biológica não compatível • Amostra acondicionada inadequadamente • Lipemia Dados compilados de diversos autores Critérios de Aceitação e Rejeição de Amostras Dados compilados de diversos autores Fonte: internet A turbidez do soro ou plasma é importante interferente que pode afetar o resultado final de um ensaio, pois diversos parâmetros laboratoriais em bioquímica são medidos, por exemplo, por meio de métodos colorimétricos. “Vilão”: os Triglicérides! Intensidade • Ligeiramente turvo • Turvo • Leitoso Gel separador Soro Dados compilados de diversos autores Plasma Dados compilados de diversos autores Soro Soro hemolisado ✓ Hemólise deriva do grego hemo (sangue) e lyse1 (ruptura). ✓ referindo-se à liberação dos componentes intracelulares de eritrócitos no líquido extracelular (plasma ou soro). Fonte: internet Fonte: internet Tipos de Hemólise: in vivo versus in vitro • doenças sanguíneas (tanto congênitas quanto adquiridas) • fase pré-analítica como resultado do manuseio inadequado das amostras sanguíneas (coleta, manipulação e transporte da amostra sanguínea) Instruções sobre Coleta de Amostras para os Pacientes ✓ As principais funções de um posto de coleta são: atendimento e orientação de pacientes para a coleta necessária aos diversos tipos de procedimentos, identificação e recebimento de materiais biológicos, e o armazenamento adequado de todos os fluidos biológicos para posterior transporte, liberação e entrega de laudo. ✓ O laboratório e o posto de coleta devem disponibilizar ao paciente instruções escritas ou verbais, em linguagem acessível, orientando-o bem. Cadastro de Amostras e de Pacientes ✓ O laboratório e o posto de coleta devem exigir um documento oficial com foto do paciente no momento do atendimento. ✓ As amostras precisam ser identificadas no momento da coleta, ou da sua entrega, quando a coleta for realizada fora do laboratório clínico. Essa identificação deve ocorrer na frente do paciente e ser solicitada a conferência dele. A norma PALC versão 2013, sugere que no cadastro do cliente sejam incluídas, ao menos, as seguintes informações: a) número de registro de identificação do cliente gerado pelo laboratório, de preferência, único; b) nome, idade, sexo e procedência do cliente; c) telefone ou endereço do cliente, quando aplicável; d) nome e contato do responsável em caso de menor ou incapacitado; e) identificação do requisitante; f) data e hora do atendimento; g) horário da coleta, quando aplicável; Cadastro de Amostras e de Pacientes h) análises solicitadas e tipos de amostra; i) informações adicionais, em conformidade com o exame (medicamento e uso, dados do ciclo menstrual, indicação/observação clínica, etc.), quando apropriado ou necessário; j) data prevista para a entrega do laudo; k) indicação de urgência, quando aplicável A coleta, o processamento e o estoque de amostras de sangue para testes diagnósticos são imprescindíveis para a obtenção de resultados de qualidade. Os erros podem ser classificados em controláveis e não controláveis. São considerados erros controláveis, exceto: I. Processamento de amostras. II.Transporte de amostras. III. Fisiologia do paciente. IV. Padronização da coleta • Qual dos exemplos a seguir representa um erro pré-analítico? a) Utilizar reagente vencido. b) Amostra hemolisada devido à coleta inadequada. c) Pipetagem incorreta durante o exame. d) Liberação de laudo sem conferência final. • O erro analítico ocorre durante: a) A interpretação do resultado pelo médico. b) A coleta e armazenamento da amostra. c) O processamento da amostra e execução do exame. d) A solicitação do exame pelo médico. • Entre os fatores que reduzem os erros pré-analíticos, destacam-se: a) Treinamento da equipe de coleta e padronização dos procedimentos. b) Utilização de controles internos e externos. c) Revisão criteriosa antes da liberação do laudo. d) Conferência do resultado pelo médico solicitante. • Assinale a alternativa que corresponde a um erro pós-analítico: a) Identificação incorreta do paciente na coleta. b) Pipetagem incorreta de reagentes. c) Erro na digitação dos resultados no sistema. d) Amostra armazenada em temperatura inadequada. • Um paciente foi ao laboratório para realizar um hemograma. Durante a coleta, o tubo roxo (EDTA) não foi preenchido até a marca indicada. Após algum tempo, observou-se a formação de coágulos no tubo. Mesmo assim, a amostra foi enviada para análise, e o exame apresentou resultados incorretos. Perguntas: 1.Em qual fase do processo laboratorial ocorreu esse erro? 2.Quais foram os erros cometidos durante a coleta e o processamento da amostra? 3.Por que não é adequado liberar um resultado obtido a partir dessa amostra? • Uma paciente precisou realizar os seguintes exames: hemograma, coagulograma e glicemia. O aluno realizou a punção venosa, mas coletou os tubos na seguinte ordem: roxo → cinza → azul. Qual foi o erro cometido na ordem de coleta? Explique o que pode acontecer se a ordem não for respeitada. • O laboratório clínico é dividido em diferentes setores, e cada amostra coletada deve ser enviada para o setor correto para análise. 1.Quantos setores principais existem em um laboratório clínico e quais são eles? 2.Para cada um destes setores, dê um exemplo de tubo que seria enviado e o tipo de exame realizado. • Durante a coleta de sangue para exames laboratoriais, um aluno observou que algumas amostras apresentavam coloração avermelhada intensa e outras estavam leitosa. Pergunta: 1.O que pode ter ocorrido com cada amostra (coloração avermelhada e turbidez leitosa)? • Um laboratório clínico percebe que os resultados de exames podem variar entre pacientes mesmo quando a coleta e o processamento estão corretos. Quais dos itens abaixo são fatores biológicos que podem alterar os resultados laboratoriais? a) Idade b) Sexo c) Gravidez d) Variação circadiana e) Atividade física f) Tipo de tubo usado g) Armazenamento incorreto da amostra Selecione todas as alternativas corretas.