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2ª Edição - 2024 Roteiro de aula prática Profa. Me. Erica Vanessa S. Costa Profa. Me. Juliana C. Barbosa Monitora: Anna Julia S. Brígida Lopes FARMACOGNOS IA PURA CURSO DE FARMÁCIA QUINTO SEMESTRE 2024.1 Biossegurança Biossegurança é o conjunto de medidadas adotadas para minimizar riscos e promover segurança, prevenção e proteção durante a realização de um procedimento, método ou serviço de modo individual e/ou coletivo. Dessa forma, a biossegurança dever ser adotada em todas as etapas para realização dos procedimentos, sendo necessário a utilização de EPIs e EPCs. EPIS DE USO OBRIGATÓRIO NO LABORATÓRIO DE FARMACOGNOSIA: Touca Calça comprida (sem rasgos) Jaleco ou capote descartável Sapato fechado Máscara descartável Luvas descartáveis Biossegurança Biossegurança NO LABORATÓR IO DE FARMACOGNOS IA Métodos de extração Pesquisa e identificação de alcaloides Identificação de cumarinas Identificação de taninos 04Página Identificação de flavonoides Identificação de saponinas SUMÁRIO Identificação de antraquinonas 05Página 06Página 07Página 08Página Página09 10Página MACERAÇÃO – 100mL (proporção 1:10) 1. Pese a droga vegetal (após realizar os cálculos); 2. Insira a quantidade de solvente necessária; 3. Deixe em um recipiente fechado. INFUSÃO 1. Pese 3g da droga vegetal; 2. Meça 150mL de água qsp; 3. Leve a água para aquecimento; 4. Em seguida, adicione a água aquecida na droga vegetal pesada; 5. Deixe em infusão por 10 a 15min; 6. Por fim, realize a filtração. DECOCÇÃO 1. Pese 3g da droga vegetal; 2. Meça 150mL de água qsp; 3. Leve a mistura de droga vegetal + água para aquecimento; 4. Deixe em decocção por 10 a 15min; 6. Por fim, realize a filtração. Métodos de extração 4 Água destilada Drogas vegetais distintas MATÉR IA I S -PR IMAS Funil Béquer Proveta Espátula Papel filtro Bastão de vidro Vidro de relógio Balança analítica Chapa aquecedora Suporte para filtração V IDRAR IAS E EQU IPAMENTOS PROCED IMENTO PRÁT ICO 1. Em um béquer, faça uma extração por decocção com 2g da droga vegetal e 40 mL de solução aquosa de HCl a 1%; 2. Após resfriar, filtrar em funil de vidro com papel filtro; 3. Adicionar ao filtrado alíquotas de solução aquosa de NH4OH a 25% até atingir pH 9-10; 4. Transferir solução resultante para o béquer; 5. Em seguida, realizar partição com 10mL de clorofórmio ou diclorometano por três vezes; 6. Separar a fase clorofórmica/diclorometânica e concentrar sob aquecimento até eliminação de todo o solvente; 7. Deixar resfriar e, após, ressuspender com 10mL de solução aquosa de HCl a 10%; 8. No tubo de ensaio, gotejar o reativo: adicionar 4 a 8 gotas do reativo de Dragendorff; Resultado positivo: precipitado vermelho tijolo/alaranjado. Funil Pipeta Béquer Proveta Espátula Fita de pH Papel filtro Tubo de ensaio Bastão de vidro Balança analítica Chapa aquecedora Suporte para filtração Água destilada Ácido clorídrico (HCl 1%) Ácido clorídrico (HCl 10%) Hidróxido de amônio (NH4OH 25%) Hidróxido de amônio (NH4OH concentrado) Reagente de dragendorff Clorofórmio ou diclorometano Droga vegetal: Peumus boldus (Boldo-do-chile) Pesquisa e identificação de alcaloides 5 MATÉR IA I S -PR IMAS V IDRAR IAS E EQU IPAMENTOS PROCED IMENTO PRÁT ICO Identificação de cumarinas Funil Pipeta Béquer Proveta Espátula Papel filtro Bastão de vidro Vidro de relógio Balança analítica Chapa aquecedora Suporte para filtração Éter etílico (C₄H₁₀O) Solução alcoólica de Hidróxido de potássio (KOH) Droga vegetal: Cinnamomum zeylanicum (Canela) 6 MATÉR IA I S -PR IMAS V IDRAR IAS E EQU IPAMENTOS 1. Em um béquer, faça uma extração por decocção com 1g da droga vegetal e 5mL de éter etílico; 2. Após resfriar, filtrar em funil de vidro com papel filtro; 3. Faça 2 fortes manchas de aproximadamente 1,5cm de diâmetro no papel filtro; 4. Aplique em uma das manchas uma gota de solução alcoólica de KOH; 5. Exponha o papel filtro em luz UV; 6. Observe a fluorescência. PROCED IMENTO PRÁT ICO Resultado positivo: fluorescência azul esverdeada na mancha alcalinizada. Identificação de taninos Funil Pipeta Béquer Proveta Espátula Papel filtro Bastão de vidro Vidro de relógio Balança analítica Chapa aquecedora Suporte para filtração Água destilada Cloreto férrico (FeCl3 a 2%) Ácido clorídrico (HCl a 10%) Droga vegetal: Stryphnodendro barbatiman Mart. (Barbatimão) 7 MATÉR IA I S -PR IMAS V IDRAR IAS E EQU IPAMENTOS PROCED IMENTO PRÁT ICO 1. Em um béquer, faça uma extração por decocção com 1g da droga vegetal e 40mL de água destilada; 2. Após resfriar, filtrar em funil de vidro com papel filtro; 3. Transferir 2mL do filtrado para 3 tubos de ensaios; 4. Adicione em cada tubo de 2 a 5 mL de água destilada. 5. Em cada tudo adicionar os seguintes reativos: Tubo 1: 2 a 4 gotas de FeCl3 a 2%; Resultado positivo: Turvação e precipitação. Tubo 2: 2 gotas de HCl a 10%, posteriormente, adicionar gota a gota solução aquosa de gelatina a 2,5%; Resultado positivo: Turvação e precipitação. Tubo 3: Branco - apenas extrato. 1. Em um béquer, faça uma extração por decocção com 2g do material vegetal e 40mL de álcool 70%; 2. Após resfriar, filtrar em funil de vidro com papel filtro; 3. Em cada tudo realizar os seguintes testes: Reação de Shinoda: Transferir 5mL do extrato para tubo de ensaio e adicionar cerca de três fragmentos de magnésio metálico (raspas de magnésio); Adicionar 1mL de HCl concentrado. Resultado positivo: coloração rósea a vermelha. Reação com Hidróxido de sódio: Transferir 2mL do extrato para tubo de ensaio; Adicionar 1mL de NaOH a 2N. Resultado positivo: coloração amarelo intenso. Identificação de flavonoides Funil Pipeta Béquer Proveta Espátula Papel filtro Bastão de vidro Vidro de relógio Balança analítica Chapa aquecedora Suporte para filtração 8 MATÉR IA I S -PR IMAS V IDRAR IAS E EQU IPAMENTOS PROCED IMENTO PRÁT ICO Álcool 70% Hidróxido de sódio (NaOH a 2N) Ácido clorídrico (HCl concentrado) Magnésio metálico em raspas Material vegetal: Citrus sinensis (Laranja); Citrus limon (Limão) 1. Em um béquer, faça uma extração por decocção com 2g do material vegetal e 10mL de água; 2. Após resfriar, filtrar em funil de vidro com papel filtro; 3. Vedar o tubo e agitar vigorosamente, no sentido vertical, por 1 minuto; 4. Marcar com um pincel marcador a altura da espuma formada; 5. Manter em repouso por 15 minutos; 6. Após, observar a presença de espuma: Resultado positivo - Permanência da espuma; Resultado negativo - Ausência da espuma. Identificação de saponinas Funil Béquer Proveta Espátula Papel filtro Bastão de vidro Vidro de relógio Balança analítica Chapa aquecedora Suporte para filtração 9 MATÉR IA I S -PR IMAS V IDRAR IAS E EQU IPAMENTOS PROCED IMENTO PRÁT ICO Água destilada Droga vegetal: Baccharis trimera (Carqueja) Reação de Borntrager direta: 1. Em um béquer, faça uma extração por maceração com 0,5g droga vegetal e 10mL de clorofómio; 2. Deixar decantar; 3. Transferir 5mL do sobrenadante para um tubo de ensaio; 4. Adicionar na solução 2mL de solução aquosa de NH4OH a 10%; 5. Agitar. Resultado positivo: Coloração rósea ou vermelha. Identificação de antraquinonas Pipeta Béquer Proveta Espátula Tubo de ensaio Bastão de vidro Vidro de relógio Balança analítica 10 MATÉR IA I S -PR IMAS V IDRAR IAS E EQU IPAMENTOS PROCED IMENTO PRÁT ICO Clorofórmio Hidróxido de amônio (NH4OH a 10%). Droga vegetal: Senna alexandrina (Sene) /////// ||||o o