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Medicina veterinária Bacteriologia e micologia Cryptococcus e Histoplasma Gatos no Rio de Janeiro com lesões nodulares nasais, o que será? - buscar evidencias para concluir a hipótese das lesões o que espera encontrar? -> estrutura de leveduras o que fazer para comprovar? - fazer o imprint e olhar citologia Cryptococcus ✓ Agente eAológico da Criptococose ✓ Fungo leveduriforme e encapsulado ✓ Recebe o nome de Cryptococcus pelo seu formato de bola. ✓ Sua reprodução é assexuada por brotamento; Principais especieis envolvidas - Cryptococcus neoformans Mais associado ao pombo, o contato com o pombo pode causar sarna, mas não vai transmiAr o cryptococcus. (Muito oportunista) - Cryptococcus ga2l Mais agressivo - mais virulento Presente em vegetais em decomposição, arvores em urbanização e algumas arvores específicas. Capaz de detectar criptococose primária. Principal fator de virulencia - Cápsula Função da cápsula ✓ Escape do sistema imune (principal responsável, pela infecção); ✓ Bloquear fisicamente o efeito apsonizante (complemento e anAcorpos); ✓ Alteração negaAva que ela confere produz uma repulsa eletrostáAca; Ao redor da cápsula se encontra uma área mais clara, pois não se impregna com corante. O fungo vai produzir quando necessário, a capsula vem discreta e só vai produzir quando esAver em um processo infeccioso. Os fatores de virulência do C. neoformans incluem a cápsula, o que requer opsonização para uma fagocitose eficiente, e a produção de melanina, que se demonstrou ocorrer in vivo e permite que o organismo resista à morte intracelular. Estes dois fatores podem ajudar a explicar a virulência do agente uma vez que tenha aAngido o sistema nervoso central Os níveis de anAcorpos e de complemento são baixos no cérebro, e, assim, a fagocitose do organismo é mínima. O tecido cerebral fornece altas concentrações de substratos, tais como as catecolaminas, uAlizadas na produção de melanina pela aAvidade enzimáAca da fenoloxidase do C. neoformans, contribuindo, assim, para a sobrevivência do organismo. Página 1 Medicina veterinária Bacteriologia e micologia Cryptococcus e Histoplasma Ecologia - Habitat ✓ Não resiste à compeAção com microrganismos no ambiente – tem que ter condições que o favoreça; ✓ Presente em poeira, diferentes Apos de restos orgânicos e em excrementos de pombos. O que os pombos tem com isso? ✓ Alta temperatura corporal (44 graus) nao desenvolve a doença; ✓ Coloniza o papo, resiste à passagem pelo TGI e são eliminados nas fezes. Excretamentos ✓ Alta concentração de creaAna e outros compostos nitrogenados; ✓ Umedecer as fezes secas antes de fazer a limpeza; ✓ Serve como nutriente para o cryptococcus; ✓ Mantem as leveduras no ambiente; Patogenia O microrganismo é inalado do meio ambiente, causando inicialmente uma infecção pulmonar. Nesse momento, a principal defesa do hospedeiro é a fagocitose e a citotoxicidade dependente do complemento por macrófagos e neutrófilos. Evolução da infecção depende: ✓ Estado imune do hospedeiro; ✓ Agressividade da esArpe infectante; ✓ Carga infecciosa Resposta do Apo celular - recrutamento de macrafagos e células de defesa. Resposta ideal - recrutamento de vias de resposta celular - formação de uma estrutura chamada de granuloma. Transmissão Se dá por via inalatória. O fungo é inalado e aAnge o trato respiratório superior, porem pode ocorrer a inoculação cutânea direta. Após a entrada do fungo, ele se dissemina por via hematógena e acomete todo o organismo. Sinais clínicos ✓ Dispneia ✓ Espirros ✓ Secreção nasal bilateral ✓ Deformidade nasal com aumento de volume no plano nasal ✓ Úlceras no focinho Apresentações clinicas - gatos ✓ Doença crônica ou aguda com acomeAmento nasal; ✓ CompromeAmento do SNC (conAguidade e/ou disseminada); ✓ Lesões de pele - próximo aos planos nasais ✓ Alterações pulmonares pouco frequentes ✓ Doença fúngica sistema mais comum em gatos; Apresentações clinicas - cães ✓ Frequentemente apresentam a forma disseminada; ✓ Os principais sistemas orgânicos acomeAdos: SNC, olhos, sistema urinário e cavidade nasal; ✓ Lesões cutâneas são pouco frequentes e resultado de infecção disseminada; Página 2 Medicina veterinária Bacteriologia e micologia Cryptococcus e Histoplasma Diagnótico ✓ Punção as piraAva por agulha fina (PAAF) ✓ CulAvo micologico Macroscopia de Cryptococcus spp. em meio Agar Infusão de Cérebro e Coração (BHI) acrescido de cloranfenicol, incubado em estufa a 37°C durante 48 horas. Colônias mucosas e brilhantes de coloração creme Microscopia ópAca de Cryptococcus spp. (400x) preparada com Anta nanquim onde é possível observar diversas leveduras arredondadas ou ovaladas, isoladas ou com brotamento único Corante: Tinta nanquim Citologia ✓ Leveduras globosas com cápsulas ✓ No culAvo do fungo, é visto uma meleca que é a caracterísAca da capsula. (Quando está bem pronunciada, se visualiza uma cultura bem melequenta.) ✓ Se a citologia esAver dando dúvidas, encaminhar para o culAvo. ✓ O imprint em gatos sempre dará certo. Histoplasma ✓ Agente eAológico - Histoplasma capsulatum; (mais relevante, acomete vários Apos de animais) ✓ Fungo domórfico; ✓ A histoplasmose é questão de saúde pública; ✓ É encontrado nas excretas de morcegos e galinhas; Forma filamentosa no ambiente - hifas, macroconídeos e microconídeos - 30 graus; Forma leveduriforme em ambiente corporal. 37 graus; Sua forma de chegar ao alvéolo pulmonares - microconídeos. Página 3 Medicina veterinária Bacteriologia e micologia Cryptococcus e Histoplasma Patogenia 1. Inalação de microconídios 2. Alveolos pulmonares (conversão à levedura) 3. Fagocitose por macrófagos alveolares (reação inflamatória) - imunocompromeAdos (aumenta o número de conídios) -> disseminação sanguínea ou linfáIca 4. Linfonodos (grânulos semelhantes à tuberculose 5. Contenção da infecção Formas encontradas ✓ Pneumonia intersAcial ou para uma forma progressiva ✓ Formas subcutâneas ✓ Muco cutâneas ✓ Pulmonar crônica ✓ Forma arAcular ✓ Forma disseminada Ecologia - Habitat Excrementos de aves e morcegos enriquecem o ambiente para o crescimento do fungo. Ácido úrico: controle de microbiota _ fonte de nitrogênio Chamado de doença das cavernas - ambiente rico em composto nitrogenado. Os morcegos são mais associados a casos clínicos e principalmente em humanos pois acabam eliminando maior quanAdade de fungo nas suas excretas. Transmissão Inalação de microconídios Associação a poeira desprendida e não ao contato com o animal Aspectos clínicos - cães ✓ Sinais inespecíficos: inapetência, perda de peso, febre persistente... ✓ Apresentação pulmonar: dispnéia, tosse sons de ausculta alterados; ✓ Maioria dos casos leva à disseminação gastrointesAnal Aspectos clínicos - gatos ✓ Segunda micose sistêmica mais comum em gatos; ✓ Doença generalizada: sinais inespecíficos; ✓ Lesões ulceradas de pele podem ser observadas; Diagnostico O diagnosAco definiAvo é o culAvo Citologia ✓ Pode ser considerado definiAvo já que nos tecidos afetados temos grande número de leveduras; ✓ Cuidado para não confundir com Cryptococcus. Histopatologia ✓ Necessário quando citologia for negaAva; ✓ Observação da reação granulomatosa ou piogranulomatosa; ✓ Coloração específica para fungos – Leveduras são ditceis de disAnguir nas colorações tradicionais Página 4