Vacinas de DNA: Imunização Avançada

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VACINAS DE DNA 
http://images.google.com.br/imgres?imgurl=http://living.oneindia.in/img/2008/07/dna-vaccine-030708-b_03072008.jpg&imgrefurl=http://living.oneindia.in/health/science-study/2008/dna-vaccine-avian-flu-030607.html&usg=__Rl8S9nUjKNRY9qdKwRQb8NYUmEU=&h=150&w=200&sz=6&hl=pt-BR&start=37&um=1&itbs=1&tbnid=_JkA5EYk9xRMTM:&tbnh=78&tbnw=104&prev=/images?q=dna+vaccine&start=20&um=1&hl=pt-BR&sa=N&rlz=1R2SKPB_pt-BRBR333&ndsp=20&tbs=isch:1
EDWARD JENNER (1796) – PRIMEIRA VACINA CONTRA VARIOLA 
 
FOI A BASE DA VACINOLOGIA MODERNA: 
PRIMEIRO TRABALHO CIENTIFICO ONDE AGENTE BIOLOGICO FOI INOCULADO PARA CONTROLAR UMA DOENÇA INFECCIOSA 
 
COWPOX VIRUS CONFERIU IMUNIDADE 
 AO SMALLPOX VIRUS 
CUNHOU O TERMO VACCINE 
VACCA (LATIM) 
Lesão na mão de uma ama de leite 
causada por cowpox 
http://images.wellcome.ac.uk/indexplus/
LOUIS PASTEUR (1879) – VACINA CONTRA CÓLERA 
LANÇOU AS BASES METODOLÓGICAS 
DO PREPARO DE VACINAS 
 
VACINAS DE PRIMEIRA GERAÇÃO VACINAS DE SEGUNDA GERAÇÃO 
VACINAS DE TERCEIRA GERAÇÃO 
Unidade de Produção Unidade de Expressão 
M.O. VIVOS - ATENUADOS 
M.O. MORTOS 
 
(VARÍOLA, CÓLERA, HEPATITE A, 
SARAMPO, POLIO, 
FEBRE AMARELA, RUBÉOLA, 
CAXUMBA, TUBERCULOSE) 
VACINAS DE DNA 
VACINAS DE SUBUNIDADE – 
 ANTÍGENOS PURIFICADOS OU 
RECOMBINANTES 
 
(TÉTANO, DIFTERIA, HEP.B) 
http://www.dnavaccine.com/
LIMITAÇÕES PARA A PRODUÇÃO DE VACINAS DE 
PRIMEIRA GERAÇÃO 
 CONTATO COM O AGENTE INFECCIOSO 
 
 PRODUÇÃO DE VÍRUS REQUER CULTIVO DE CÉLULAS ANIMAIS 
 (RENDIMENTO E TAXA DE PRODUÇÃO) 
 
 CONTAMINAÇÃO DO PRODUTO FINAL COM OS AGENTES 
 
ALTA VARIABILIADE DOS AGENTES INFECCIOSOS 
 
 REVERSÃO DE LINHAGENS ATENUADAS 
 
 NÃO É EFICAZ PARA TODAS AS DOENÇAS 
 
 PRAZO DE VALIDADE E ACONDICIONAMENTO 
 
 CUIDADO COM PACIENTES IMUNOCOMPRIMIDOS 
 
 
DESENVOLVIMENTO DE UMA VACINA DE SUBUNIDADE CONTRA O HSV 
ALTA VARIABLIDADE DOS AGENTES INFECCIOSOS, 
TEMPO PARA MONTAR A CONSTRUÇÃO, OTIMIZAR A EXPRESSÃO 
PURIFICAÇÃO DO ANTÍGENO 
CONSIDERAR: 
VACINAS DE DNA 
GENES OU FRAGMENTOS DE GENES QUE CODIFICAM ANTIGENOS POTENCIALMENTE 
IMUNOGÊNICOS SÃO INTENCIONALMENTE INTRODUZIDOS NO PACIENTE. 
AS VACINAS DE DNA TEM COMO OBJETIVO FUNDAMENTAL A IMUNIZAÇÃO PRÉVIA 
DO INDIVÍDUO, DE MODO QUE ELE PASSE A RESPONDER RÁPIDA E EFICIENTEMENTE 
QUANDO EM CONTATO COM O AGENTE INFECCIOSO, EVITANDO ASSIM A 
OCORRÊNCIA OU O DESENVOLVIMENTO DA DOENÇA. 
ATUALMENTE, AS VACINAS DE DNA TÊM SIDO USADAS NÃO SOMENTE NA 
PROFILAXIA CONTRA INFECÇÕES VIRAIS, BACTERIANAS OU PARASITÁRIAS, MAS 
TAMBÉM NA TERAPIA PARA TRATAR DIVERSAS DOENÇAS. 
SCIENCE, 1990 
S
C
IE
N
C
E
, 
1
9
9
3
 
PELA PRIMEIRA VEZ FOI DEMONSTRADO QUE VACINA DE DNA 
TINHA A CAPACIDADE DE ESTIMULAR RESPOSTAS IMUNES HUMORAL E CELULAR. 
EM TEORIA, VACINAS DE DNA PODERIAM GERAR RESPOSTA IMUNE AMPLA 
SEMELHANTE ÀS PLATAFORMAS DE PRIMEIRA GERAÇÃO 
 
 COMPROVAÇÃO: SEGURAS E DE ALTA TOLERÂNCIA 
ETAPAS PARA A PRODUÇÃO DE UMA VACINA DE DNA 
ESTABELECIMENTO 
DE UM PROTOCOLO 
DE FERMENTAÇÂO A 
 FIM DE OTIMIZAR 
CRITÉRIOS DE 
QUALIDADE E 
RENDIMENTO PURIFICAÇÃO DO DNA 
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/d/da/Making_of_a_DNA_vaccine.jpg
* NATUREZA DOS ANTÍGENOS 
* FREQÜÊNCIA E VIA DE ADMINISTRAÇÃO 
* CONCENTRAÇÃO DE DNA ADMINISTRADA 
* LOCALIZAÇÃO CELULAR DO ANTÍGENO 
MAS O QUE É NECESSÁRIO PARA O SUCESSO DA 
 IMUNIZAÇÃO COM DNA ? 
VIAS DE ADMINISTRAÇÃO MAIS COMUNS 
OUTRAS VIAS: SUBCUTÂNEA, APLICAÇÃO SOBRE SUPERFÍCIES MUCOSAS 
VIA INTRAMUSCULAR 
FIBRILAS MUSCULARES 
95 A 99% DOS PLASMIDEOS QUE PERMANECEM 
 NO ESPACO INTERFIBRILAR SAO DEGRADADOS 
1 
 
 
 
2 
 
 3 
0,1% CHEGA AO NUCLEO 
DIFUSÃO LIMITADA 
PELO CITOSOL 
APC- MACRÓFAGOS, 
MONÓCITOS, 
CÉLULAS DENDRÍTICAS 
10-100 ug 
FIBRILAS MUSCULARES 
DISTRIBUIÇÃO NOS TECIDOS APÓS INJEÇÃO INTRAMUSCULAR 
ALGUMAS CONCLUSÕES 
* A MAIOR CONCENTRAÇÃO DO DNA ESTA NO SITIO DE INJEÇÃO; 
* PERSISTÊNCIA DO PLASMIDEO VARIA COM 
MODELO ANIMAL E QTD DNA INJETADO (2 ANOS 
EM CAMUNDONGO; 28 DIAS EM RATOS, 54 DIAS EM OVELHA 
90 DIAS EM TRUTA) 
* MAIS DE 98% DO DNA ELIMINADO APOS 9 HS DE INJEÇÃO; 
* APOS ALGUNS MINUTOS DNA E ENCONTRADO 
EM PEQ QTD EM OUTROS ORGÃOS 
 * QTD DE ANTÍGENO PRODUZIDO IN VIVO: PG A NG 
 
 
 
OS PROCEDIMENTOS SÃO SEGUROS E PODEM ATÉ INDUZIR 
RESPOSTA IMUNE PORÉM…. 
 NÃO É EFICIENTE !!! 
 
 
 
VACINAS DE DNA 
DE SEGUNDA GERAÇÃO 
ESTRATÉGIAS DE OTIMIZAÇÃO 
PARA AUMENTAR A IMUNOGENICIDADE 
ELETROPORAÇÃO 
MAIOR ENTREGA (10 – 1000x) 
 = 
MAIOR IMUNOGENICIDADE 
DESCONFORTO 
CUSTO 
VACINAS DE DNA DE SEGUNDA GERAÇÃO: 
ESTRATÉGIAS DE OTIMIZAÇÃO 
PARA AUMENTAR A IMUNOGENICIDADE 
NATURE REVIEWS/GENETICS OCT 2008 VOL 9 
* EFEITO SUBSTANCIAL NA RESPOSTA IMUNE 
* 
* 
* 
* 
CO-DELIVERY OF IL12 /IL28B 
SEM ESTRUTURA SECUNDÁRIA, CÓDONS 
PREFERENCIAIS, SEM SÍTIOS CHI, CHECAR SEQ 
DE SPLICING, .... 
C 
H 
 
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NATURE REVIEWS/GENETICS OCT 2008 VOL 9 
NATURE REVIEWS/ 
GENETICS OCT 2008 VOL 9 
 SEM EVIDÊNCIAS 
EM ENSAIOS CLÍNICOS E PRÉ-CLÍNICOS. 
ASP0113 (TransVax™), Vical's investigational therapeutic vaccine designed to control cytomegalovirus 
(CMV) in transplant recipients. Vical and Astellas Pharma Inc. (TSE:4503) ("Astellas") entered into 
exclusive worldwide license agreements in 2011 to develop and commercialize ASP0113 - 
ASP0113 is an investigational bivalent DNA vaccine containing plasmids (closed loops of DNA) 
encoding human CMV pp65 and gB antigens for induction of both cellular and humoral immune 
responses. ASP0113 is formulated with a proprietary poloxamer-based delivery system. 
CMV is a herpes virus that infects more than half of all adults in the United States by age 40, and is 
even more widespread in developing countries. A healthy immune system typically protects an 
infected person against CMV disease, but does not prevent or clear latent infection, and those 
whose immune systems are not fully functional are at high risk of CMV reactivation, potentially 
leading to severe illness or death. - 
NATURE REVIEWS/GENETICS OCT 2008 VOL 9 
POTENCIAL DE COMÉRCIO