Atividade 6 - ELISA e Western Blot

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<p>Paulo Ceisar de Almeida 1) ELISA ac. primario substrato de antigeno E e E antigeno anticorpo substrato no a que ao ser convertido enzima se Liga Ligada anticorpo resultara mudança de ELISA Indireto: substrato ac. primario de cor antigeno troppo</p><p>Lavagen Laragem E E antigeno anticorpo especifico anticorpos Ligados no ao antigeno is humanos. Laragem E E substrato e adicionado e convertido pela a uma determinada A quantidade de 2) bloqueio e etapa tanto no ELISA quanto no Western Boot. Ele a de ma de geral- mente contendo proteinas como albumina de bo- vino Leite desnatado a nas ocupadas do plastico (no do da membrana (no caso do BLOL) bloqueio para evitar a inespeci- de anticorpos a ao que pode causar de fundo elevados e bloqueio mechora a especificidade do ao garantir que somente as especificas entre Ac e Ag 3) NO Western as proteinas por em gel com base no Essay separadas para Os anticorpos especi- para a seguidos por troppo</p><p>anticorpos conjugados a outro mar- cador de A através de que reage com a enzima Ligada anticorpo tindo a das bandas correspondentes as de NO Elisa Indireto 200 adsorvidos diretamente nas placas de anticorpos primarios para antigeno 500 seguidos por con- Jugados a A e atraves de un substrato que reage com a enzima anticorpo resultando ma mudança de cor pode ser cada por 4) Y 8 a, 7 6 5 4 3 2 1 4 JO 3 10 10 -s 10° so 2 104 + + + do Analito troppo</p><p>A cursa de geralmente mostra inversal entre a concentracio do analito 00 sinal de A medida a concentracio do aumenta, Sinal de do ensaio compete com antigeno presente na amostra pela Quando na mais antigeno na menos antigeno marcado capaz de se Ligar ao resultando em in sinal menor. 5) A Lona cinza nos de refere. a una faixa de valores de absorbancia a sinal de onde e determinar can certeza amostra liva a valores entre Limite da positividade e Limite da A zona indica a necessidade de a do pois resultados troppo</p>