Replicação do DNA

Prévia do material em texto

<p>Manoela Melo MEDPUC 89 – Monitoria Genética</p><p>1 Genoma Humano e Patologia Molecular</p><p>Replicação do DNA</p><p> Ocorre durante a fase S da interfase</p><p> Forma 2 moléculas idênticas à original</p><p> Semiconservativa ➝ Cada uma das moléculas</p><p>finais é composta por 1 fita parental e 1 nova</p><p> Semidescontínua ➝ 1 fita contínua e 1 fita</p><p>descontínua</p><p> Antiparalela ➝ Segue a direção 3' para 5’ da fita</p><p>existente para sintetizar do 5' para o 3' da nova</p><p> Inicia-se em pontos chamados origens de</p><p>replicação ➝ Regiões eucromatinizadas com</p><p>sequência de AT</p><p>o Menos ligações de H+ entre A-T (2 LH entre A-T,</p><p>entre C-G são 3) ➝ Mais fácil rompê-las para</p><p>iniciar o processo</p><p>o +- 10.000 origens de replicação por cromossomo</p><p>➝ Economia de tempo para replicar o DNA todo</p><p> Forma-se uma bolha de replicação</p><p>o Forquilha de replicação = metade da bolha</p><p> As polimerases atuam somente no sentido 5' ➝ 3'</p><p>(da nova fita)</p><p>o A menos que estejam atuando para revisão,</p><p>reparo etc.</p><p>Etapas</p><p> Helicase ➝ Reconhece as origens de replicação,</p><p>rompe as pontes de H+ e desfaz a dupla hélice</p><p> SSB (Ligantes de fita simples) ➝ Impedem o</p><p>fechamento (reestruturação) da dupla-hélice aberta</p><p>pela helicase</p><p> Topoisomerase/DNA-Girase/Anel deslizante ➝</p><p>Impede a super helicoidização (nó) do restante da</p><p>dupla fita</p><p>o Cliva a ligação fosfodiéster de 1 das fitas,</p><p>permitindo que o DNA rotacione (relaxando) e</p><p>religa a fita antes da helicase avançar</p><p> Primase ➝ Adiciona um primer de RNA para iniciar</p><p>o processo, já que a polimerase só reconhece fita</p><p>dupla (a DNA pol III não é capaz de iniciar uma</p><p>cadeia, só de estendê-la)</p><p>o Age 1 vez na fita contínua e várias na fita</p><p>descontínua</p><p> DNA polimerase III ➝ Reconhece a região do</p><p>primer e inicia a síntese da nova fita (5' ➝ 3') a</p><p>partir da adição de dNTPs (nucleotídeos de DNA)</p><p>o Fita contínua/líder/leading</p><p>o Fita descontínua/retardada/lagging</p><p> Cada primer é ligado com o DNA que é</p><p>sintetizado a partir dele, mas o próximo primer</p><p>não se liga ao DNA já sintetizado, gerando</p><p>fragmentos de Okazaki</p><p>o A DNA pol III também tem uma atividade</p><p>exonucleásica (removedora de nucleotídeos) 3'</p><p>➝ 5’</p><p>Manoela Melo MEDPUC 89 – Monitoria Genética</p><p>2 Genoma Humano e Patologia Molecular</p><p> Dá um passo para trás cada vez que dá um</p><p>passo para frente ➝ Revisão</p><p> DNA polimerase I ➝ Remove os primers de RNA e</p><p>substitui pelos trechos de DNA correspondentes</p><p> Ligase ➝ Conecta os fragmentos de Okazaki</p><p>o Não age nenhuma vez na fita contínua (já que ela</p><p>não tem fragmentos de Okazaki)</p><p> Telomerase ➝ “Estica” os telômeros</p><p>(extremidades) da fita retardatária para evitar a</p><p>perda de DNA, já que as polimerases não</p><p>conseguem substituir o último primer pela falta de</p><p>uma extremidade 3’OH</p><p>o Ativa em células embrionárias</p><p>o Reativação na idade adulta gera câncer</p><p>o Clone Dolly ➝ Morreu jovem por velhice porque</p><p>as células utilizadas para clonagem já eram</p><p>velhas inicialmente</p>