Avaliação I - Individual - Biologia Molecular

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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:955519)
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Prova 82140292
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00
Na década de 70, através do método de Sanger, foram criadas as primeiras técnicas de 
sequenciamento de DNA. Ele permite especificar o nucleotídeo de cada posição da fita ou fragmento 
de DNA. 
 Sobre o método de Sanger, assinale a alternativa CORRETA:
A Os didesoxinucleotídeos são ineficazes para a técnicas de Sanger, sendo utilizados somente os
primers e diversas fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, com a mesma extremidade 5'.
B Os didesoxinucleotídeos são similares aos primers ou iniciadores, já que iniciam a reação em
diferentes terminações 3'.
C
São utilizados iniciadores (primers), fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, ou seja, com a
mesma extremidade 5' e diferentes terminações 3', devido à inserção dos didesoxinucleotídeos,
que são nucleotídeos terminadores de cadeia (ddNTP: ddATP, ddTTP, ddCTP e ddGTP).
D A técnica de Sanger, utiliza terminadores de sequência em réplicas de DNA de uma fita molde
diferenciada.
A criação das bibliotecas de DNA e cDNA se tornou possível através da execução das técnicas de 
clonagem de DNA.
 Sobre as bibliotecas, assinale a alternativa CORRETA:
A As bibliotecas de mRNA são originadas a partir da fragmentação do DNA com enzimas de
restrição e, posteriormente, da clonagem do DNA.
B Uma biblioteca de DNA contém somente os íntrons de uma molécula de DNA, sendo
extremamente específico para identificar o conteúdo expresso em uma célula ou tecido.
C A biblioteca de cDNA contém éxons e íntrons, já que são clonados todos os fragmentos de DNA,
incluindo o não codificante.
D As bibliotecas de cDNA contêm somente os éxons de uma molécula de mRNA, que
posteriormente é convertido em cDNA pela técnica de transcrição reversa.
A técnica de PCR é utilizada para gerar várias cópias de um fragmento de DNA ou cDNA de forma 
ágil e eficaz. Porém para obtermos resultados mais precisos, conforme o seu objetivo de pesquisa, a 
PCR qualitativa ou quantitativa se torna mais eficiente. Em relação a essas técnicas, classifique V 
para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) A PCR qualitativa necessita de um termociclador específico capaz de quantificar a amplificação 
dos fragmentos de DNA ao final de cada ciclo em tempo real. 
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( ) A PCR qualitativa indica a presença de um fragmento específico de DNA ou cDNA em uma 
amostra, mas não indica quanto do gene está expresso na amostra.
( ) A qPCR é conhecida como PCR em tempo real (quantitativa) e fornece informações precisas 
relativas à quantidade de expressão de um gene.
 
 Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A F - V - F.
B V - F - F.
C F - V - V.
D F - F - V.
Com o intuito de mandar e replicar um fragmento clonado, por certo tempo, temos como parte 
essencial nesse processo as bibliotecas de DNA e cDNA. Sobre essas técnicas, associe os itens, 
utilizando o código a seguir:
I- Biblioteca de cDNA.
II- Hibridização em colônia.
III- Biblioteca de DNA.
 
( ) Técnica que detecta os fragmentos do DNA de interesse com sondas específicas em meio de 
cultivo sólido.
( ) Clonagem de fragmentos aleatórios do DNA, permitindo a sua identificação, isolamento e 
sequenciamento do genoma.
( ) Clonagem de mRNAs, em que cada célula/tecido pode originar uma biblioteca diferente, 
considerando o padrão de expressão gênica específico, relacionado sempre a sua função. 
 Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A II - I - III.
B I - III - II.
C II - III - I.
D I - II - III.
O sequenciamento de um gene de um organismo é umas das técnicas mais importante na biologia 
molecular, pois detecta mutações, cadeias de transmissão e origem da chegada do vírus a uma região 
específica. . De acordo com as técnicas empregadas para o sequenciamento de DNA, classifique V 
para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) são utilizados para o sequenciamento com o método de Sanger, 
em que, posteriormente, faz-se a identificação da sequência com eletroforese.
( ) O método empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento dos testes de 
sequenciamento que conhecemos atualmente, sendo a primeira geração de sequenciamento de DNA. 
( ) O pirosequenciamento tem como base a formação de pirofosfato a cada novo nucleotídeo 
adicionado à nova fita.
 Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
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A F - F - V.
B V - V - F.
C V - F - V.
D V - F - F.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Segundo o sumário da aula prática, as 
amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem ser: 1) ressuspensas em um tampão e 
armazenadas em tubos, ambos “livres” de enzimas que possam degradá-las (como DNAse ou RNAse 
– nucleases); e 2) mantidas em baixas temperaturas (-20 ºC ou - 80 ºC). Todos os procedimentos 
devem ser realizados com luvas para evitar a degradação das amostras, devido à presença de 
nucleases nos fluidos corporais das mãos. De acordo com o processo de extração de DNA e RNA 
identificado na prática, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Etapa de Lise.
II- Etapa de Ligação.
III- Etapa de Lavagem.
IV- Etapa de Eluição.
( ) Pipete 25 µl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida, pipete 200 µl da amostra de sangue 
no mesmo tubo e, por último, pipete 200 µl do tampão lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e 
homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse tempo, incube o Eppendorf por 15 min.
( ) Pipete 210 µl de álcool 96% no Eppendorf e homogeneíze de novo no Vórtex. Em seguida, 
pipete 640 µl do Eppendorf para o tubo spin e centrifugue a 11.000 rpm por 1 minuto. 
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 500 µl do tampão de lavagem SI no tubo spin e centrifugue 
novamente. Repita o mesmo processo de troca de tubo de coleta, porém a lavagem utilizará 600 µl do 
tampão de lavagem SII, e centrifugue novamente. Por fim, repita o mesmo processo da troca do tubo 
de coleta e centrifugue novamente.
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 200 µl do tampão de eluição S no tubo spin, espere 1 minuto e 
centrifugue a amostra.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A II - III - IV - I.
B I - II - III - IV.
C IV - III - II - I.
D I - II - IV - III.
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[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa prática 
depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências complementares após a desnaturação 
(período em que a fita de DNA é simples). Dessa forma, o ponto de fusão do DNA, ou seja, o 
momento em que ocorre a ruptura das pontes de hidrogênio e a abertura da dupla fita de DNA, varia 
de um organismo para outro. O ponto de fusão do DNA também depende da quantidade de pares de 
base G-C e A-T, sendo que, quanto mais pares G-C, maior o ponto de fusão do genoma. Isso ocorre 
porque o par G-C é mais estável, apresentando três pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta 
apenas com duas. Após o anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o padrão de 
hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de fusão, outros fatores podem 
interferir na hibridização da sonda de DNA. Sobre esses fatores, analise as opções a seguir:
I- Temperatura de fusão.
II- pH alto para produzir condições de hibridização.
III- Concentração de cátions monovalentes.
IV- Presença de solventes orgânicos.Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a opção III está correta.
B Somente a opção II está correta.
C As opções I, II, III e IV estão corretas.
D Somente a opçãoI está correta.
A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da molécula a ser 
isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e poliacrilamida para a técnica 
de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir:
I- No gel de poliacrilamida temos moléculas pequenas que conseguem se movimentar pouco e 
fragmentos maiores de DNA que se movem facilmente no gel de agarose.
II- Na separação de fragmentos de DNA, até com uma única base nitrogenada, pode-se utilizar a 
poliacrilamida
III- No gel de agarose cada banda simboliza um grupo de moléculas de tamanho semelhantes. Pode-se 
dizer que por isso ela possui menor resolução.
 
 
 Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a sentença II está correta.
B Somente a sentença I está correta.
C Somente a sentença III está correta.
D As sentenças I, II e III estão corretas.
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A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA trouxe um grande avanço, em que pode-se 
analisar sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem precisar realizar a sua 
amplificação. 
 
 Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA:
A
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas sólidas, nas
quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser sequenciado, formando uma
biblioteca de DNA.
B
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de DNA de forma
portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos, semelhantes
a pen drives. A plataforma MinION é a mais utilizada.
C
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que o DNA a ser
sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são acoplados a uma placa de vidro
por meio de primers adaptadores, formando uma biblioteca de DNA, que será submetida ao PCR.
D
A 3ª geração de sequenciamento utiliza fragmentos de DNA circular, os quais são replicados em
chips com nano-poços. A cada novo nucleotídeo adicionado à nova fita, ocorre a emissão de
fluorescência e a detecção ocorre em tempo real.
Para obter o sequenciamento de nucleotídeos longos e genomas inteiros, pode-se aplicar o 
sequenciamento Shotgun. Sobre esse sequenciamento, avalie as asserções a seguir e relação proposta 
entre elas:
I- Devido ao grande volume de informação gerado por esse procedimento, é necessário que 
programas computacionais sofisticados sejam utilizados para a determinação da sequência do material 
em estudo.
PORQUE
II- Na técnica Shotgun, o material clonado é sequenciado diversas vezes, fornecendo uma quantidade 
de dados de cerca de 10 vezes o tamanho do material genético que está sendo estudado, assegurando 
que todos os nucleotídeos presentes no material genético sejam detectados e inseridos na sequência 
final do DNA. 
 
 
 
 Assinale a alternativa CORRETA:
A A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
C As asserções I e II são proposições falsas.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
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