EXTRAÇÃO E PURIFICAÇÃO DE DNA E RNA

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EXTRAÇÃO E PURIFICAÇÃO DE DNA E RNA – PÓS TESTE
1) Os ácidos nucleicos (DNA ou RNA) são as moléculas que "guardam" todas as informações genéticas hereditárias e contêm sequências codificantes de proteínas responsáveis por inúmeros processos biológicos celulares.
Sobre os ácidos nucleicos, eles são formados por:
a) lipídeos;
b) fenóis;
c) nucleotídeos.
RESPOSTA CORRETA
Os nucleotídeos, por meio das ligações fosfodiéster, formam as moléculas de ácidos nucleicos (DNA ou RNA).
2) O modelo da estrutura tridimensional proposto por Watson e Crick descreve o DNA como uma dupla-hélice.
Assinale a alternativa que apresente uma das principais forças que mantêm essa dupla-hélice.
a) Pontes ou ligações dissulfeto;
b) Ligações de hidrogênio;
RESPOSTA CORRETA
As ligações de hidrogênio ocorrem entre as bases nitrogenadas complementares das moléculas de DNA e formam os “degraus” que mantêm a estrutura dupla-hélice do DNA.
c) Ligações fosfodiéster.
3) O DNA e o RNA apresentam características estruturais específicas que permitem que essas moléculas sejam utilizadas para várias aplicações.
Indique a alternativa que corresponde a uma dessas aplicações.
a) Cultura de células;
b) RT-PCR;
RESPOSTA CORRETA
A extração e purificação de DNA ou RNA é uma das etapas primordiais para a reação em cadeia da polimerase transcriptase reversa (RT-PCR).
c) HPLC.
4) O protocolo de extração e purificação de DNA ou RNA envolve algumas etapas. Você é um cientista e precisa realizar esse protocolo para analisar a expressão gênica de uma amostra, mas o orçamento disponibilizado para esse projeto é baixo e você precisará utilizar outros reagentes mais baratos do que a coluna de sílica disponível nos kits comerciais.
Para isso, assinale a alternativa correta.
a) Durante a etapa 2 de separação do DNA ou RNA dos outros componentes celulares, você opta por adicionar solventes orgânicos (fenol-clorofórmio), faz a centrifugação das amostras e coleta o DNA ou RNA na fração solúvel formada;
RESPOSTA CORRETA
Essa afirmativa está correta. Em laboratórios com orçamento baixo, é muito comum a utilização de solventes orgânicos, em vez dos kits comerciais disponíveis, durante a etapa de separação do DNA ou RNA dos outros componentes celulares.
b) Busca na literatura alternativas mais baratas, como a adição de suco de abacaxi ou soluções de limpeza de lentes de contato, para fazer a degradação das proteínas;
c) Utiliza detergente de cozinha.
5) Você está na etapa 2 do protocolo de extração e purificação do DNA de uma amostra e optou por utilizar a coluna de sílica.
Com base no que você aprendeu nesta prática, qual a finalidade dessa etapa?
a) Romper a membrana plasmática;
b) Retirar os sais contaminantes das amostras de DNA;
c) Isolar o DNA dos outros componentes celulares.
RESPOSTA CORRETA
As moléculas de DNA têm cargas negativas que interagem com as colunas de sílica, que têm carga positiva. Dessa forma, o DNA fica “grudado” na coluna, sendo separado dos outros componentes celulares.