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ROTEIRO DE AULA PRÁTICA - SÊMEN Professor realiza a Demonstração de descongelamento de sêmen Vídeo de referência: DICA CRV LAGOA - Saiba como descongelar corretamente a palheta de sêmen https://www.youtube.com/watch?v=iH_SYStLIm8 Abrir a tampa do botijão de nitrogênio Puxar a caneca mantendo-a a 7cm da boca do botijão de nitrogênio. Nunca retirar a caneca ou a palheta para fora do botijão. Retirar uma palheta de sêmen utilizando pinça Nunca use a mão pois a temperatura quente da mão interfere no descongelamento. Coloque a palheta no banho maria Feche o botijão Descongelar a palheta fina de sêmen em banho maria Temperatura: 35 a 37°C Tempo: 20 segundos Obs: Em caso de dificuldade para retirar o sêmen, abaixe a caneca por alguns segundos e faça uma nova tentativa. O BOTIJÃO DE NITROGÊNIO PARA ARMAZENAMENTO DE SÊMEN CONGELADO Alunos, dividam-se em grupos com 5 a 6 pessoas. Leiam as características abaixo do botijão de nitrogênio, assistam aos 2 vídeos e podem manipular o botijão de nitrogênio que está para demonstração. Nas paredes, além do vácuo, há também folhas de alumínio e lã de vidro, que propiciam o necessário isolamento térmico. O botijão é na maioria das vezes composto de seis canecos, cada um contendo de 8 a 10 racks e cada rack com a capacidade de armazenar cerca de 10 palhetas médias (5 na parte superior e 5 na parte inferior), ou cerca de 20 palhetas finas (10 em cima e 10 em baixo). Dessa forma, a capacidade da maioria dos botijões é de 1.200 doses de palhetas finas ou 600 palhetas médias. O botijão nunca deve ficar com nível inferior a 15 cm. Para tanto, o inseminador deverá medir regularmente o seu nível com medidor apropriado. Vídeo de referência: DICA CRV LAGOA - Vídeo de referência: DICA CRV LAGOA - Saiba como manusear o botijão de sêmen Saiba como mensurar o nitrogênio do botijão de sêmen https://www.youtube.com/watch?v=M8ssU5DM LJ0 https://www.youtube.com/watch?v=bnoied_xP mM ALUNOS SIMULAM O DESCONGELAMENTO DE SÊMEN USANDO PALHETAS VAZIAS Vídeo de referência: Passo a passo - descongelação do sêmen https://www.youtube.com/watch?v=iH_SYStLIm8 Abrir a tampa do botijão de nitrogênio DE DEMONSTRAÇÃO VAZIO Puxar a caneca mantendo-a a 7cm da boca do botijão de nitrogênio. Nunca retirar a caneca ou a palheta para fora do botijão. Retirar uma palheta de sêmen utilizando pinça Nunca use a mão pois a temperatura quente da mão interfere no descongelamento. Coloque a palheta no banho maria Feche o botijão Descongelar a palheta fina de sêmen em banho maria Temperatura: 35 a 37°C Tempo: 20 segundos Obs: Em caso de dificuldade para retirar o sêmen, abaixe a caneca por alguns segundos e faça uma nova tentativa. SIMULAÇÃO DE MONTAGEM DE APLICADOR DE SÊMEN Pegue uma palheta vazia Seque com papel toalha Corte reto sua ponta sem algodão Coloque na bainha sem retirar esta para fora do pacote Encaixe o corpo do aplicador pela palheta e bainha francesa Vá com o corpo do aplicador até o final da bainha Coloque o anel plástico Encaixe o fixador Puxe o anel de borracha em direção ao fixador Coloque o êmbolo do aplicador até sentir resistência AVALIAÇÃO DE MOTILIDADE E VIGOR Depois de assistir à simulação feita pelo professor e simularem com o botijão vazio, agora peçam ao professor que descongele uma palheta de sêmen real para fazerem as avaliações de motilidade e vigor. Pergunta: porque não faremos a avaliação de turbilhonamento? Usando lâmina aquecida Colocar uma gota de sêmen usando a própria palheta cortada nas 2 extremidades Cobrir com lamínula aquecida Colocar no Microscópio usando aumento de 10 a 40x Motilidade = Porcentagem de sptz móveis Vigor = A força / velocidade do movimento progressivo, nota de 0 (sem movimento progressivo) a 5. Obs: quando a porcentagem de sptz móveis não representar a proporção de sptz com motilidade progressiva, os valores de motilidade deverão ser expressos separadamente como motilidade total e progressiva. AVALIAÇÃO DE PATOLOGIAS ESPERMÁTICAS Para esta estação consulte o material fornecido em sala de aula. Pegue uma gota do sêmen diluído em formolsalina Colocar em lâmina e cobrir com lamínula, pressionar levemente e secar com papel Colocar em microscópio em aumento de 1000x Avaliar 200 espermatozoides e anotar as alterações AVALIAÇÃO DE CONCENTRAÇÃO ESPERMÁTICA Vídeo de referência: Uso de la cámara Neubauer en el laboratorio para el recuento de células sanguíneas. https://www.youtube.com/watch?v=G0wmfyn3hqA Pegue a câmara de Neubauer (imagem ao lado) Passe água nos pilares laterais (vermelho) Coloque uma lamínula Encha cada lado da câmara com o sêmen da formol salina (veja o vídeo abaixo a partir do tempo 3min e 20seg) Deixar 5 minutos descansando Levar ao microscópio e com a objetiva de 4x encontrar o centro da cruz. Aumente para as objetivas de 10 ou 40x. Contar 5 quadrados de cada lado da câmara de Neubauer. AVALIAÇÃO DE CATÁLOGOS DE SÊMEN Avalie os 3 catálogos de sêmen disponibilizados