ESPECTROFOMETRIA

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ESPECTROFOMETRIA 
É o método de análises ópticas mais usado nas investigações biológicas e físico-químicas. O espectrofotômetro é um instrumento que compara a radiação absorvida ou transmitida por uma solução. Um feixe de energia atravessa a solução e a sua absorção oferece informações sobre a qualidade e quantidade dos componentes do sistema.
Conceitos fundamentais:
A energia de radiação é medida em nm (nanômetros)  Letra grega λ (lambda) = comprimento de onda; 
A faixa mais utilizada do espectro vai do ultravioleta (200nm) até o infravermelho curto (1.000 nm);
Faixa visível (percebida pelo olho humano): 40 0 a 750nm;
Cor: ‘sensação psicofísica que associamos a um comprimento de onda predominante’; 
Branco (mistura de cores que se anulam): refletem as todas as cores; Negro: absorve todas as cores.
Transmitância: é a fração da luz incidente em um comprimento de onda específico, que passa por uma amostra de matéria. É a razão entre a intensidade da luz transmitida e a intensidade da luz incidente.
Absorbância: É a capacidade do material em absorver radiações em frequência específica. A absorbância de uma substância em solução é diretamente proporcional a sua concentração e a espessura que a luz atravessa. 
Espectro de absorção: É uma forma de caracterização que permite verificar qual a faixa de comprimento de onda em que um dado composto apresenta sua maior afinidade de absorção.
OBS: O melhor comprimento de onda para uma determinada solução é aquele no qual há maior absorção e, portanto, menor transmissão de luz; ou seja: maior absorbância e menor transmitância.
Espectrofotometria Óptica
Comprimento de onda corresponde a luz visível ou ultra-violeta, faixa entre aproximadamente 180 a 800 nm.
Determinação da Concentração de Substâncias
1. Lei de Lambert: quando a concentração da substância é constante, absorção depende do comprimento do trajeto óptico.
LUZ 
2. Lei de Beer: a absorbância é diretamente proporcional a concentração da substância.