Micro - Práticas

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Cultura de secreções da Orofaringe
Streptococcus
α hemolíticos: 
S. viridans e S. pneumoniae
Teste de sensibilidade à optoquina. 
S: S. pneumoniae
R: S. viridans
β hemolíticos:
Grupo A: S. pyogenes
Teste de sensibilidade à bacitracina → Halo:
Pyogenes
Grupo B: S. agalactiae (trato genital feminino)
Teste de camp → Presença de seta →
Positivo (*S. aureaus em l)
Grupo D: Microbiota intestinal 
Enterococcus (S. faecalis ou faecium) e Não
enterococcus (S. bovis ou equinus)
Teste da bile esculina 
Positivo: Presença de Streptococcus β
hemolíticos do grupo D.
Teste do Nacl
Diferencia enterococos (+) e não
enterococo (-)
Colônias pontiformes
Teste da Catalase: todos os Staphylococcus
são capazes de transformar a água oxigenada
em água + oxigênio. H2O2→ H20 + 02
Coagulase ligada (lâmina): Proteína fixa na
parede celular de S. aureus capaz de
transformar fibrinogênio em fibrina. Coloca-se o
plasma na lâmina, depois a bactéria.
Coagulase livre (no tubo): Enzima liberada
extracelularmente produzida por S. aureus
capaz de transformar o fibrinogênio em fibrina,
coagulando o plasma.
Dnase: Enzima capaz de despolimerizar o DNA
do meio de cultura que contém DNA.
Visualização da despolimerização: adição
de Hcl 1N sobre o crescimento bacteriano.
Zona clara: positivo para S. aureus. 
Teste de Novobiocina: 
Diferencia S. epidermidis de S.
saprophyticus
S: S. epidermidis
R: S. saprophyticus
Testes Bioquímicos
Se a placa ficar amarela:
 Faz os testes de identificação do S. aureus:
Se a placa ficar rosa:
Ágar sangue
Klebsiella, Proteus, E. coli, Shigella, Salmonela,
Enterobacter, Serratia...
Colônias maiores
Staphylococcus
Colônias médias
Ágar Manitol Salgado
S. epidermidis, S. saprophytics e S. aureus
Crescem apenas bactérias do gênero
Staphylococcus
Placa amarela: 
S. aureus (Fermenta o manitol)
S. epidermidis (Pode oxidar o manitol)
Placa rosa (Não utiliza o manitol): 
S. saprophytics 
S. epidermidis
Resultados comuns:
Ágar Eosina Azul de Metileno (EMB)
Enterobactérias e pseudomonas
Flora transitória → sem relevância clínica
Crescimento abundante de bactérias Gram-
negativas com ausência de outros patógenos:
faz e libera antibiograma.
Relevante para paciente imunossuprimido.
Identificação dos Gram-negativos: provas
bioquímicas.
Crescimento de gram-negativas
Produzido por Caroline Santos
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Coprocultura
Ágar SIM (Sulfato, indol, motilidade) 
Motilidade 
Turvo: bactéria móvel; 
Turvo apenas onde foi semeado:
bactéria imóvel
Presença de produção de H2S.
Semeio: Fura o meio no centro até 2/3 do
comprimento. 
Intepretações: 
Colocação de 3 à 4 gotas do reagente de Kovacs:
Verifica a formação de indol 
Indol + → Rosa
Indol - → Amarelo
PROVAS BIOQUÍMICAS
Semeio: Fura o meio no centro e depois semeia em estrias.
Intepretações: 
Ágar Eosina Azul de Metileno (EMB)
Crescimento de gram-negativas
Ágar Salmonella-Shigella
Isolamento de Salmonella e Shigella
Diferenciar colônias fermentadoras de lactose (LAC+) - são coloridas - e não fermentadoras de lactose
(LAC-) - são incolores ou pretas (produção de gás sulfidrico) -. 
Proteus spp (com swarmming ou véu) Colônias H2S +
lac+ lac-
Ágar TSI (Triple sugar iron)
Motilidade 
Turvo: bactéria móvel; 
Turvo apenas onde foi semeado: bactéria imóvel
Colocação de 3 à 4 gotas do reagente de Kovacs:
Verifica a formação de indol 
Indol + → Rosa
Indol - → Amarelo
Ornitina:
Positiva → Meio roxo
Negativa → Meio amarelo
Semeio: Fura o meio no centro até 2/3 do comprimento. 
Intepretações: 
Ágar MIO (Motilidade, indol e ornitina) - semi-sólido, roxo e reto
Urease
Positiva → Rosa
Negativa → Amarelo
Semeio: Estrias na superfície no meio inclinado. 
Intepretações: 
URÉIA - meio sólido, amarelo e inclinado
Metabolização do citrato
Positiva → Azul
Negativa → Verde
Semeio: Estrias na superfície no meio inclinado. 
Intepretações: 
CITRATO - meio sólido, verde e inclinado
meio semi-sólido, amarelo e reto
meio sólido, vermelho e inclinado
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Bactéria produtora de enzima lisina
descarboxilase: 
Positivo → Roxo
Negativo → Amarelo
Cultura de urina
Catalase:
Positiva: Staphylococcus 
S. aureus, S. epidermidis, S. saprofíticas
Negativa: Estreptococcus
Enterococos 
Estreptococcus ssp.
SE FOR GRAM +: PROVAS BIOQUÍMICAS
1.
Por fim, submete à antibiograma! 
Ao adicionar o cloreto férrico à 10%:
Desaminação da fenilalanina 
Positivo → Meio verde
Negativo → Amarelo
Semeio: Estrias na superfície no meio inclinado. 
Intepretações: 
FENILALANINA - meio sólido, amarelo e inclinado
Semeio: (reação positiva); Furar até o fundo do tubo 2
vezes, uma mais a frente e outra mais atrás seguido de
espalhamento por estria na superfície inclinada.
Intepretações: 
LISINA DESCARBOXILASE - meio amarelo 
Ágar Cled ou Brolacin
Ágar Eosina Azul de Metileno (EMB)
Crescimento de gram-negativas
Crescimento de gram-positivas e gram-
negativas
Utilização de alças calibradas
Azul 
Alça de 0,01 (10ul)
Amarela 
Alça de 0,001 (1ul)
Semeio: Deposita a urina em linha reta
no centro, verticalmente. Depois faz a
semeadura horizontal em todo o meio. 
Colônias com cor 
LAC+
Colônias sem cor
LAC -
Colônias amarelas
 LAC+
Colônias azuis 
LAC -
Leitura: Divide a placa em 4, escolhe-se
um quadrante e faz a contagem. Após a
contagem, multiplica-se o valor por 4 e
pelo padrão de diluição da alça calibrada
utilizada. 
Valor de referência para POSITIVIDADE
de urocultura: 100.000 UFC/mL, EXCETO
casos especiais como grávidas e
imunodeprimidos.
Quando não é possível contar:
Considera-se acima de 500,000 UFC/mL
→ Infecção urinária. 
No Sedimento urinário: Pacientes com
ITUs apresentam piúria no exame de
sedimento urinário (> 08 piócitos por
campo).
Dica!
Cresceu colônias em ambas as placas:
GRAM -
Cresceu colônias apenas no Cled: 
GRAM +
Bilisculina
Coagulase {
Se formar coágulo: 
S. aureus
Se não formar coágulo: 
S. saprofíticos
S,. epidermidis 
NOVOBIOCINA 
S: S. epidermidis
R: S. saprofíticosPositiva: Enterococos
Negativa: Estreptococcus ssp. 
 
SE FOR GRAM-: PROVAS BIOQUÍMICAS: (SIM, MIO, CITRATO...)
Produzido por Caroline Santos
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