Av1 - Tipos de Testes Para Identificação Viral

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Simar Rodrigues

em 14/04/2022

Questões resolvidas

A técnica de western blotting também pode ser denominada proteína immunoblot e consiste na detecção de proteínas especificas em amostras de lisados celulares ou de tecidos. Os passos para a elaboração dessa técnica pode ser resumida em cinco etapas: (1) extração e quantificação das proteínas; (2) fracionamento das proteínas da amostra em um gel de poliacrilamida; (3) transferências proteínas para uma membrana; (4) incubação da membrana com um anticorpo para detectar a proteína especifica a ser analisada; e (5) revelação dessa membrana para análise dos dados. Considerando esse contexto, analise as seguintes afirmativas:
Considerando as informações apresentadas, é correto o que se afirma em:
I. Para a extração e quantificação de proteínas o ensaio de Bradford é o mais utilizado e apresenta diversas vantagens em relação aos demais, como rapidez, não exige aquecimento e alta sensibilidade para baixas concentrações de proteínas. Para quantificar a concentração de proteínas na amostra deve-se fazer uma curva de padronização com concentrações conhecidas de uma proteína (comumente se utiliza soro albumina bovina, BSA) versus absorbância em 595 nm (comprimento de onda que o complexo proteína-corante absorve).
II. A etapa de fracionamento de proteínas a técnica mais utilizada é a eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE). Inicialmente prepara-se o gel de SDS-poliacrilamida, que será uma matriz inerte através da qual as proteínas poderão migrar. O gel é preparado pela polimerização de monômeros de acrilamida e o tamanho dos poros do gel pode ser ajustado variando a concentração da acrilamida adicionada para retardar a migração da sua proteína de interesse.
III. Na etapa de transferência para membrana é necessário utilizar anticorpos específicos para a proteína desejada, mas antes, é preciso que essas proteínas estejam em um suporte sólido, como membranas de nitrocelulose, PVDF ou de catiônicas de nylon. Essa transferência das proteínas do gel para a membrana inicialmente era feita por meio da capilaridade, mas atualmente usa-se a transferência eletroforetica que é muito mais rápida e eficiente.
IV. Para detectar a proteína especifica é utilizado um anticorpo específico que vai reagir com um epítopo da proteína, formando um complexo anticorpo-antígeno. Esse anticorpo é denominado anticorpo primário, pode ser policlonal (reconhece mais de um epítopo) ou monoclonal (reconhece apenas um epítopo da proteína de interesse) e é produzido geralmente em camundongo ou em coelho.
a) I, apenas.
b) I e II, apenas.
c) II, III e IV, apenas.
d) I, II e IV, apenas.
e) I, II, III e IV.

Nas décadas de 60 e 70, a ideia de transferir genes para curar doenças em humanos tornou-se mais próxima da realidade: desenvolveram-se linhas de células geneticamente marcadas; compreendeu-se o mecanismo de transformação celular em mamíferos pelos vírus polioma e SV40 e, posteriormente, criaram-se as técnicas de DNA recombinante permitindo, assim, a primeira tentativa de transferência gênica em organismos complexos. Considerando o contexto apresentado, avalie as seguintes asserções e a relação proposta entre elas.
A respeito dessas asserções, assinale a alternativa CORRETA.
I. Dois tipos de técnicas, denominadas de ex vivo e in vivo, são utilizadas para levar genes para o interior das células somáticas do corpo humano. Na técnica ex vivo, retiram-se células do paciente, faz-se cultura das mesmas, usam-se vetores para nelas inserir o gene previamente isolado e engenheirado, e, por infusão, essas células tratadas são levadas de volta ao paciente. As células da medula são as mais usadas em terapia ex vivo, embora existam testes em outros tipos de células. Na técnica in vivo, o gene engenheirado é levado diretamente ao organismo do paciente, também usando vetores, porém dispensando a retirada de células e sua subsequente reintrodução no paciente.
II. O isolamento do gene e o seu teste em culturas de células não constituem grandes problemas de ordem técnica e/ou bioética para fins de tratamento de doenças. A tecnologia de DNA recombinante, desenvolvida em organismos simples, vem sendo, com sucesso, transposta para organismos complexos, inclusive o humano. O desenvolvimento de vetores, todavia, continua sendo um dos grandes problemas em terapia gênica, tanto do ponto de vista técnico como ético. O gene isolado e replicado precisa de um vetor que o transporte para dentro de células específicas do paciente, que o incorpore ao DNA destas células e o ative para desempenho exclusivo e adequado da função corretiva desejada.
a- As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não justifica a I.
b- As asserções I e II são proposições verdadeiras e a II justifica a I.
c- A asserção I é uma proposição verdadeira e a II, falsa.
d- A asserção I é uma proposição falsa e a II, verdadeira.
e- As asserções I e II são proposições falsas.

O processo de diagnóstico envolve a tomada de decisão clínica sobre a realização ou não de uma ação e qual ação deve ser tomada, o que envolve, de modo consciente ou não, a análise de probabilidades. O diagnóstico pode se basear nos sinais e sintomas clínicos apresentados pelo paciente (diagnóstico clínico) ou nos dados obtidos por exames laboratoriais, que são cruciais para confirmar ou descartar suspeitas percebidas pelo exame clínico. Considerando o contexto apresentado, avalie as seguintes asserções e a relação proposta entre elas.
A respeito dessas asserções, assinale a alternativa CORRETA.
I. A capacidade de um teste de identificar corretamente uma doença é chamada de sensibilidade (S), que pode ser expressa como a porcentagem de indivíduos doentes com um teste positivo. Um teste com sensibilidade de 90% indica que, a cada 100 indivíduos testados pelo método a ser avaliado e sabidamente com a doença, 90 serão identificados e 10 não serão (falso-negativos); assim, quanto maior a sensibilidade, menor a quantidade de falso-negativos.
II. Para determinar a especificidade e a sensibilidade de um teste sorológico, é preciso compará-lo com um teste considerado “padrão-ouro”, que é o teste com a melhor capacidade dentre todos os existentes para detectar os verdadeiros positivos e os verdadeiros negativos. Em geral, este método é muito mais complexo e demorado que os métodos sorológicos, por isso raramente é utilizado na prática clínica.
a) As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não justifica a I.
b) As asserções I e II são proposições verdadeiras e a II justifica a I.
c) A asserção I é uma proposição verdadeira e a II, falsa.
d) A asserção I é uma proposição falsa e a II, verdadeira.
e) As asserções I e II são proposições falsas.

Os anticorpos, sintetizados pelas células B, constituem o braço humoral do sistema imune adaptativo. Desde o início do século XX, a terapia com anticorpos (imunoterapia) se estabeleceu como uma ferramenta poderosa contra uma variedade de doenças infecciosas. Pertencem à família das imunoglobulinas, glicoproteínas presentes no soro e em outros fluidos. Na maioria dos mamíferos, as imunoglobulinas existem em cinco classes denominadas de isotipos, IgM, IgG, IgA, IgD e IgE. Quatro cadeias polipeptídicas formam a unidade básica do anticorpo, sendo duas pesadas (constant heavy domain – CH) idênticas entre si e duas leves (constant domain – CL), também idênticas entre si.
Considerando as informações apresentadas, é correto o que se afirma em:
I. A tecnologia de hibridomas dribla essa limitação ao promover a imortalização dos plasmócitos através da fusão de linfócitos B retirados de baço de camundongos com células de mieloma murino deficientes na produção de anticorpos, numa associação em que os linfócitos carregam a informação genética para a síntese de anticorpo e as células de mieloma portam a capacidade de crescimento constante e ilimitado.
II. A seleção é realizada pela manipulação das vias de síntese de nucleotídeos, permitindo que somente os híbridos linfócito-mieloma sobrevivam no meio de cultura contendo elementos seletivos.
III. Um anticorpo policlonal é secretado por um só clone de linfócitos T. Os anticorpos secretados são todos idênticos, representados por uma classe única de imunoglobulinas reconhecendo um determinado epítopo de um determinado antígeno, com a mesma especificidade e afinidade.
a- I e III, apenas.
b- I e II, apenas.
c- III, apenas.
d- II, apenas.
e- I, apenas.

A Engenharia Genética é o conjunto de processos que permitem a manipulação do genoma de organismos vivos, com a consequente alteração das habilidades de cada espécie. Esta possibilidade de alteração das potencialidades genéticas dos organismos resultou na colaboração íntima e constante entre a chamada ciência básica e a ciência aplicada. São em grande número os objetivos práticos da pesquisa biológica, desde a satisfação da curiosidade humana sobre a natureza da vida, até o controle e eliminação de doenças humanas, de outros animais e de plantas, enfim, a melhoria da qualidade de vida. A tecnologia do DNA recombinante proporciona a produção de insulina artificial ou recombinante, trazendo enorme avanço na área da medicina e consequentemente na área industrial. Mesmo existindo ainda alguns limites (ética, preconceito, falta de informação e alto custo) para a aplicação prática da Engenharia Genética, não restam dúvidas de que a ciência dispõe de alta e promissora tecnologia para a solução de problemas que antes pareciam não ter solução. Considerando esse contexto, analise as seguintes afirmativas:
A respeito dessas afirmativas, assinale a alternativa CORRETA.
I. A tecnologia do DNA recombinante (rDNA) se baseia em moléculas de DNA artificial contendo segmentos covalentemente ligados, derivados de duas ou mais fontes, são chamados de DNAs recombinantes. A Tecnologia do rDNA envolve modificação direta do DNA, de forma a alterar características do organismo vivo ou introduzir novas características.
II. A clonagem do RNA envolve a separação de um gene específico e sua ligação a uma molécula de DNA transportadora e depois a replicação deste RNA modificado, o resultado é uma amplificação seletiva de um gene particular. A bactéria Escherichia coli foi o primeiro organismo usado para o trabalho do rRNA e ainda é a célula hospedeira mais comum.
III. São utilizados vetores de clonagem, nos quais a sequência de DNA de interesse é inserida, utilizando a enzima DNA ligase. Quando necessário, o fragmento de DNA de interesse pode ser libertado do vetor por meio de enzimas de restrição.
a) I, apenas.
b) II, apenas.
c) III, apenas.
d) I e II, apenas.
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A técnica de western blotting também pode ser denominada proteína immunoblot e consiste na detecção de proteínas especificas em amostras de lisados celulares ou de tecidos. Os passos para a elaboração dessa técnica pode ser resumida em cinco etapas: (1) extração e quantificação das proteínas; (2) fracionamento das proteínas da amostra em um gel de poliacrilamida; (3) transferências proteínas para uma membrana; (4) incubação da membrana com um anticorpo para detectar a proteína especifica a ser analisada; e (5) revelação dessa membrana para análise dos dados. Considerando esse contexto, analise as seguintes afirmativas:
Considerando as informações apresentadas, é correto o que se afirma em:
I. Para a extração e quantificação de proteínas o ensaio de Bradford é o mais utilizado e apresenta diversas vantagens em relação aos demais, como rapidez, não exige aquecimento e alta sensibilidade para baixas concentrações de proteínas. Para quantificar a concentração de proteínas na amostra deve-se fazer uma curva de padronização com concentrações conhecidas de uma proteína (comumente se utiliza soro albumina bovina, BSA) versus absorbância em 595 nm (comprimento de onda que o complexo proteína-corante absorve).
II. A etapa de fracionamento de proteínas a técnica mais utilizada é a eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE). Inicialmente prepara-se o gel de SDS-poliacrilamida, que será uma matriz inerte através da qual as proteínas poderão migrar. O gel é preparado pela polimerização de monômeros de acrilamida e o tamanho dos poros do gel pode ser ajustado variando a concentração da acrilamida adicionada para retardar a migração da sua proteína de interesse.
III. Na etapa de transferência para membrana é necessário utilizar anticorpos específicos para a proteína desejada, mas antes, é preciso que essas proteínas estejam em um suporte sólido, como membranas de nitrocelulose, PVDF ou de catiônicas de nylon. Essa transferência das proteínas do gel para a membrana inicialmente era feita por meio da capilaridade, mas atualmente usa-se a transferência eletroforetica que é muito mais rápida e eficiente.
IV. Para detectar a proteína especifica é utilizado um anticorpo específico que vai reagir com um epítopo da proteína, formando um complexo anticorpo-antígeno. Esse anticorpo é denominado anticorpo primário, pode ser policlonal (reconhece mais de um epítopo) ou monoclonal (reconhece apenas um epítopo da proteína de interesse) e é produzido geralmente em camundongo ou em coelho.
a) I, apenas.
b) I e II, apenas.
c) II, III e IV, apenas.
d) I, II e IV, apenas.
e) I, II, III e IV.

Nas décadas de 60 e 70, a ideia de transferir genes para curar doenças em humanos tornou-se mais próxima da realidade: desenvolveram-se linhas de células geneticamente marcadas; compreendeu-se o mecanismo de transformação celular em mamíferos pelos vírus polioma e SV40 e, posteriormente, criaram-se as técnicas de DNA recombinante permitindo, assim, a primeira tentativa de transferência gênica em organismos complexos. Considerando o contexto apresentado, avalie as seguintes asserções e a relação proposta entre elas.
A respeito dessas asserções, assinale a alternativa CORRETA.
I. Dois tipos de técnicas, denominadas de ex vivo e in vivo, são utilizadas para levar genes para o interior das células somáticas do corpo humano. Na técnica ex vivo, retiram-se células do paciente, faz-se cultura das mesmas, usam-se vetores para nelas inserir o gene previamente isolado e engenheirado, e, por infusão, essas células tratadas são levadas de volta ao paciente. As células da medula são as mais usadas em terapia ex vivo, embora existam testes em outros tipos de células. Na técnica in vivo, o gene engenheirado é levado diretamente ao organismo do paciente, também usando vetores, porém dispensando a retirada de células e sua subsequente reintrodução no paciente.
II. O isolamento do gene e o seu teste em culturas de células não constituem grandes problemas de ordem técnica e/ou bioética para fins de tratamento de doenças. A tecnologia de DNA recombinante, desenvolvida em organismos simples, vem sendo, com sucesso, transposta para organismos complexos, inclusive o humano. O desenvolvimento de vetores, todavia, continua sendo um dos grandes problemas em terapia gênica, tanto do ponto de vista técnico como ético. O gene isolado e replicado precisa de um vetor que o transporte para dentro de células específicas do paciente, que o incorpore ao DNA destas células e o ative para desempenho exclusivo e adequado da função corretiva desejada.
a- As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não justifica a I.
b- As asserções I e II são proposições verdadeiras e a II justifica a I.
c- A asserção I é uma proposição verdadeira e a II, falsa.
d- A asserção I é uma proposição falsa e a II, verdadeira.
e- As asserções I e II são proposições falsas.

O processo de diagnóstico envolve a tomada de decisão clínica sobre a realização ou não de uma ação e qual ação deve ser tomada, o que envolve, de modo consciente ou não, a análise de probabilidades. O diagnóstico pode se basear nos sinais e sintomas clínicos apresentados pelo paciente (diagnóstico clínico) ou nos dados obtidos por exames laboratoriais, que são cruciais para confirmar ou descartar suspeitas percebidas pelo exame clínico. Considerando o contexto apresentado, avalie as seguintes asserções e a relação proposta entre elas.
A respeito dessas asserções, assinale a alternativa CORRETA.
I. A capacidade de um teste de identificar corretamente uma doença é chamada de sensibilidade (S), que pode ser expressa como a porcentagem de indivíduos doentes com um teste positivo. Um teste com sensibilidade de 90% indica que, a cada 100 indivíduos testados pelo método a ser avaliado e sabidamente com a doença, 90 serão identificados e 10 não serão (falso-negativos); assim, quanto maior a sensibilidade, menor a quantidade de falso-negativos.
II. Para determinar a especificidade e a sensibilidade de um teste sorológico, é preciso compará-lo com um teste considerado “padrão-ouro”, que é o teste com a melhor capacidade dentre todos os existentes para detectar os verdadeiros positivos e os verdadeiros negativos. Em geral, este método é muito mais complexo e demorado que os métodos sorológicos, por isso raramente é utilizado na prática clínica.
a) As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não justifica a I.
b) As asserções I e II são proposições verdadeiras e a II justifica a I.
c) A asserção I é uma proposição verdadeira e a II, falsa.
d) A asserção I é uma proposição falsa e a II, verdadeira.
e) As asserções I e II são proposições falsas.

Os anticorpos, sintetizados pelas células B, constituem o braço humoral do sistema imune adaptativo. Desde o início do século XX, a terapia com anticorpos (imunoterapia) se estabeleceu como uma ferramenta poderosa contra uma variedade de doenças infecciosas. Pertencem à família das imunoglobulinas, glicoproteínas presentes no soro e em outros fluidos. Na maioria dos mamíferos, as imunoglobulinas existem em cinco classes denominadas de isotipos, IgM, IgG, IgA, IgD e IgE. Quatro cadeias polipeptídicas formam a unidade básica do anticorpo, sendo duas pesadas (constant heavy domain – CH) idênticas entre si e duas leves (constant domain – CL), também idênticas entre si.
Considerando as informações apresentadas, é correto o que se afirma em:
I. A tecnologia de hibridomas dribla essa limitação ao promover a imortalização dos plasmócitos através da fusão de linfócitos B retirados de baço de camundongos com células de mieloma murino deficientes na produção de anticorpos, numa associação em que os linfócitos carregam a informação genética para a síntese de anticorpo e as células de mieloma portam a capacidade de crescimento constante e ilimitado.
II. A seleção é realizada pela manipulação das vias de síntese de nucleotídeos, permitindo que somente os híbridos linfócito-mieloma sobrevivam no meio de cultura contendo elementos seletivos.
III. Um anticorpo policlonal é secretado por um só clone de linfócitos T. Os anticorpos secretados são todos idênticos, representados por uma classe única de imunoglobulinas reconhecendo um determinado epítopo de um determinado antígeno, com a mesma especificidade e afinidade.
a- I e III, apenas.
b- I e II, apenas.
c- III, apenas.
d- II, apenas.
e- I, apenas.

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A respeito dessas afirmativas, assinale a alternativa CORRETA.
I. A tecnologia do DNA recombinante (rDNA) se baseia em moléculas de DNA artificial contendo segmentos covalentemente ligados, derivados de duas ou mais fontes, são chamados de DNAs recombinantes. A Tecnologia do rDNA envolve modificação direta do DNA, de forma a alterar características do organismo vivo ou introduzir novas características.
II. A clonagem do RNA envolve a separação de um gene específico e sua ligação a uma molécula de DNA transportadora e depois a replicação deste RNA modificado, o resultado é uma amplificação seletiva de um gene particular. A bactéria Escherichia coli foi o primeiro organismo usado para o trabalho do rRNA e ainda é a célula hospedeira mais comum.
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a) I, apenas.
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