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Gênero Staphylococcus: Gram-positivos, em arranjos semelhantes a cachos de uva Crescem em meios não enriquecidos Colônias brancas ou douradas de tamanho médio Anaeróbios facultativos Imóveis Catalase-positivos Oxidase-negativos Não formam esporos Por vezes capsulados Comensais de membranas mucosas e da pele A produção de coagulase está relacionada à patogenicidade (de modo geral, coagulase + patogênico; coagulase - de forma geral pouco virulentos) Relativamente estáveis no meio ambiente e amplamente distribuídas em todo o mundo Causam infecções piogênicas (que geram pus) Algumas espécies podem atuar como patógenas oportunistas S. aureus subsp anaerobius e S. saccharolyticus são anaeróbias e catalase-negativos S. hyicus é coagulase variável segundo a literatura e coagulase positivo segundo o professor ?! S. hyicus é gama hemolítico, assim como S. epidermidis S. epidermidis: Enzimas: Cisteína protease: degrada proteínas e componentes do sistema imune Lipases: colonização da pele, pois também são proteínas de ligação ao colágeno Colônias de S. aureus e S. intermedius produzem hemólise dupla Afinidade seletiva por espécies particulares de animais Diferenciação entre espécies de Staphylococcus: Staphylococcus geralmente catalase-positivos e Streptococcus geralmente catalase-negativos Aspecto colonial, tipo de hemólise, perfil bioquímico, padrão de genes de restrição do RNA ribossômico são critérios de diferenciação Características coloniais: Colônias brancas ou douradas, opacas S. aureus de bovinos e humanos são amarelo-douradas Hemólise em ágar sangue bovino ou ovino: Quatro hemolisinas conhecidas: alfa, beta, gama e delta. Cada hemolisina se difere antigênica e bioquimicamente, bem como nos seus efeitos sobre as hemácias de diferentes animais. S. aureus e S. intermedius geralmente produzem hemolisinas alfa e beta (dupla hemólise) Alfa hemolisina causa uma zona estreita de hemólise imediatamente ao redor da colônia Beta hemolisina causa uma zona larga de hemólise parcial ou incompleta Essas hemolisinas in vivo agem como toxinas S. hyicus não são hemolíticos Coagulase negativos geralmente desenvolvem hemolisinas de forma lenta (motivo de serem menos patogênicos que coagulase positivos) Teste de coagulase em lâmina e tubo Fibrinogênio do plasma de coelho é convertido a fibrina pela coagulase Teste em lâmina detecta a presença de uma coagulase ligada ou um fator de aglutinação (fator clumping) na superfície da bactéria. Aglutinação das bactérias no intervalo de 1 a 2 minutos Teste em tubo detecta coagulase livre. Resultado positivo em 24h incubado a 37º Celsius. Teste definitivo. Testes bioquímicos para diferenciação de S. aureus e S. intermedius: Ágar púrpura contendo púrpura de bromocresol como indicador de pH e 1% de maltose S. aureus usa a maltose, acidificando o meio, e as colônias ficam de coloração amarela. Staphylococcus intermedius fermenta pouco a maltose, não alterando a cor do meio (púrpura) Testes bioquímicos comercialmente disponíveis Métodos moleculares como a PCR Patogênese e patogenicidade (fatores de virulência) Coagulase Conversão de fibrinogênio em fibrina. Deposição de fibrina pode proteger os estafilococos das células fagocitárias Lipases, esterases, elastase, estafiloquinase, desoxiribonuclease, hialuronidade, fosfolipase Enzimas Proteína A Componente superficial que se liga à porção Fc da IgG tem efeito anti-fagocítico Leucocidina Destruição citolítica de fagos de algumas espécies animais Alfa-hemolisina ou alfa-toxina Principal toxina da mastite gangrenosa. Causa espasmo da musculatura lisa, sendo necrosante e potencialmente fatal. É uma exotoxina citolítica Beta-hemolisina Esfingomielinase que lesa membranas celulares. É uma exotoxina citolítica. Toxinas esfoliativas Responsáveis pela descamação na síndrome da pele escaldada no homem Enterotoxinas Toxinas termestáveis associadas à intoxicação alimentar no homem Toxinas da síndrome do choque tóxico (TSST) Induz produção excessiva de linfocinas, causando lesão tecidual Superantígenos As toxinas têm afinidade pelo receptor do complexo antígeno-MHC II das células T. As toxinas estimulam uma resposta T linfocítica aumentada A ativação da célula T pode causar choque tóxico pela liberação de grandes quantidades de citocinas de células T. Cápsula polissacarídica, ácido teicoico Proteínas que se ligam à fibronectina, colágeno e fibrinogênio As proteínas ligantes de fibronectina promovem a ligação às células mucosas e às matrizes teciduais. Não crescem em ágar MacConkey!!!!! Ágar sangue seletivo contendo ácido nalidíxico e colistina é usado para inibir o gênero Proteus e outros contaminantes Gram-negativos!!!!!! Identificação: Amostras plaqueamento avaliação das colônias testes bioquímicos
