Resumo

Prévia do material em texto

1. Folhetos Embrionários e Origem dos Tecidos
A formação dos tecidos e órgãos em um embrião multicelular ocorre a partir de três folhetos embrionários primários:
• Ectoderma: O folheto mais externo, responsável pela formação dos "epitélios externos (pele, glândulas cutâneas e mamária e revestimento dentário) e tecido nervoso."
• Mesoderma: O folheto intermediário, que "Forma os tecidos conjuntivos, a musculatura lisa e a esquelética.". A derme, por exemplo, tem "origem mesodérmica".
• Endoderma: O folheto mais interno, do qual se originam os "tecidos de revestimento interno, trato respiratório, trato gastrointestinal (TGI) e as glândulas anexas do sistema digestório."
2. Processamento Histológico para Observação Microscópica
Para a análise microscópica de tecidos, é necessário um processo sistemático:
• Clivagem: A amostra é seccionada em pequenos fragmentos.
• Fixação: Utiliza-se formol 10% em volume 10 vezes maior que a amostra para preservar o tecido, tornando-o "viável por longos períodos"
• Desidratação: A água é removida por banhos de álcool em concentrações crescentes (70% a 100%).
• Clarificação (Xilol): Remove o álcool e prepara o tecido para a inclusão.
• Inclusão (Parafina): O tecido é infiltrado com parafina a 52-60°C, que endurece ao resfriar, tornando o tecido rígido.
• Embocamento e Corte: O tecido endurecido é cortado em seções finas (3 a 10 µm) com um micrômetro, que são então montadas em lâminas de vidro para observação.
3. Tecidos Epiteliais
Os tecidos epiteliais são classificados em epitélios de revestimento e glandulares:
• Epitélios de Revestimento: Cobrem superfícies corporais e exibem diversas morfologias e funções dependendo da localização.
◦ Pele: Possui "células achatadas e formadas por várias camadas, protegendo contra o meio externo.", como o epitélio estratificado pavimentoso queratinizado. As camadas epidérmicas incluem estrato basal, espinhoso, granuloso, lúcido (ausente em pele fina) e córneo. As células de Merkel atuam como mecanorreceptores na camada basal. O estrato córneo e lúcido são "compostos por células mortas que se acumulam e se descamam naturalmente".
◦ Intestino: Formado por "uma única camada de células altas e colunares, facilitando a absorção de nutrientes", como o epitélio simples prismático com borda estriada e células caliciformes.
◦ Traqueia: Típica do epitélio pseudoestratificado ciliado com células caliciformes.
• Epitélios Glandulares: Especializados na secreção de substâncias.
◦ Glândulas Unicelulares: Formadas por uma única célula (célula caliciforme), secretam muco em revestimentos como vias respiratórias e intestino.
◦ Glândulas Exócrinas: Secretam substâncias na superfície de epitélios de revestimento (ex: glândulas sudoríparas e salivares). Classificam-se pelo arranjo celular, tipo de secreção (holócrina, apócrina) e mecanismo secretor.
◦ Glândulas Endócrinas: Não possuem ductos; suas secreções (hormônios) são liberadas na corrente sanguínea. Exemplos incluem: *Cordonal: Células em cordões separados por capilares (ex: adrenal, paratireoide, hipófise). *Folicular/Vesicular: Células formam vesículas que armazenam substâncias (ex: tireoide).
4. Tecidos Conjuntivos
• Tecido Adiposo: Especializado no armazenamento de energia na forma de triglicerídeos em adipócitos. É altamente vascularizado e inervado.
◦ Funções: Armazenamento de energia, isolamento térmico ("panículo adiposo" em recém-nascidos), e função endócrina, secretando moléculas bioativas.
◦ Moléculas Secretadas: * Leptina: Regula o apetite e o equilíbrio energético, inibindo a fome e estimulando a queima de gordura. * Lipase lipoproteica: Quebra triglicerídeos para absorção de ácidos graxos e glicerol pelos adipócitos e mobilização de lipídios.
◦ Tecido Adiposo Unilocular: Caracterizado por células grandes e globosas com o núcleo na periferia, contendo uma grande gota lipídica.
5. Sangue
O sangue possui múltiplas funções essenciais:
• Transporte: Oxigênio e gás carbônico (hemácias), nutrientes e hormônios (plasma).
• Eliminação de Resíduos: Ureia e creatinina do metabolismo celular.
• Regulação: Temperatura corporal, equilíbrio osmótico e equilíbrio ácido-básico (pH entre 7,35 e 7,45).
• Hemogasometria: Exame que avalia os níveis de oxigênio (PaO₂) e o equilíbrio ácido-base no sangue, útil no diagnóstico de problemas respiratórios ou metabólicos.
6. Tecido Ósseo
O tecido ósseo é dinâmico e passa por constante remodelamento.
• Osteoclastos: Células multinucleadas especializadas na reabsorção óssea, degradando a matriz óssea mineralizada através da secreção de enzimas e ácido clorídrico. Sua ação é regulada pelo PTH (estimula) e calcitonina (inibe).
• Íons Minerais: Além de cálcio e fosfato, a matriz inorgânica contém magnésio (regula a cristalização da hidroxiapatita), potássio e sódio (auxiliam na homeostase mineral e equilíbrio osmótico).
• Tecido Ósseo Lamelar (Compacto): Organizado em sistemas de Havers (osteons), que consistem em lamelas concêntricas de matriz óssea ao redor de um canal de Havers (contendo vasos sanguíneos e nervos). Os canais de Volkmann correm perpendicularmente, conectando os sistemas de Havers entre si.
7. Sistema Cardiovascular
Composto por coração e vasos sanguíneos, adaptados para diferentes pressões e transporte de sangue.
• Coração: Possui endocárdio, miocárdio (células musculares estriadas cardíacas conectadas por discos intercalares) e epicárdio.
◦ Válvulas Fibrosas: Atrioventriculares (mitral e tricúspide) e semilunares (aórtica e pulmonar) garantem o fluxo sanguíneo unidirecional e evitam o refluxo.
◦ Circulação Pulmonar: Bombeia sangue desoxigenado do ventrículo direito para os pulmões para oxigenação, retornando oxigenado ao átrio esquerdo.
◦ Circulação Sistêmica: Bombeia sangue oxigenado do ventrículo esquerdo para o corpo, entregando oxigênio e nutrientes, e retornando desoxigenado ao átrio direito.
• Vasos Sanguíneos:
◦ Macrocirculação: Vasos de maior calibre (> 0,1 mm), visíveis macroscopicamente, como grandes artérias (elásticas e musculares) e veias. *Artérias Grandes (Elásticas): Possuem lâminas elásticas que mantêm o fluxo constante e permitem a expansão do vaso. *Veias: Adaptadas para transportar sangue de baixa pressão de volta ao coração.
◦ Microcirculação: Inclui arteríolas, capilares e vênulas. *Capilares: A diversidade funcional está relacionada ao tipo de tecido e são classificados pela continuidade da parede endotelial. *Capilares Contínuos: Ausência de fenestras, junções de oclusão limitam a permeabilidade (ex: barreira hematoencefálica). A troca ocorre por pinocitose. *Pericitos: Células pluripotentes associadas aos capilares, regulam o fluxo sanguíneo e podem diferenciar-se em células endoteliais ou de tecido conjuntivo em caso de lesão.
• Vasos Linfáticos: Semelhantes aos vasos sanguíneos, com túnicas íntima, média e adventícia, mas com particularidades.
◦ Capilares Linfáticos: Camada endotelial permeável, permitem a entrada de grandes moléculas e fluidos. Visíveis microscopicamente.
◦ Troncos Linfáticos: Visíveis macroscopicamente (ex: ducto torácico, ducto linfático direito).
8. Sistema Tegumentar (Pele e Anexos)
A pele em mamíferos é composta por epiderme, derme e hipoderme.
• Derme (Cório): Localizada abaixo da epiderme, de origem mesodérmica. Composta por "tecido conjuntivo propriamente dito frouxo (derme papilar) e, na área mais profunda, de tecido conjuntivo propriamente dito denso (derme reticular)."
• Anexos Cutâneos:
◦ Glândula Sebácea: Produz sebo.
◦ Pelo: Composto por bulbo piloso (região mais profunda), raiz (imersa na derme) e haste (parte livre acima da pele), que inclui medula, córtex e cutícula. O bulbo está fixado na papila dérmica e revestido por queratinócitos e melanócitos.
◦ Penas (Aves): Folículos das penas estão localizados na derme e são complexos. O vexilo é a parte achatada em cada lado da raque, formada por barbas e bárbulas que se interligam para manter a integridade da pena (essencial para o voo).
9. Glândula Mamária
A estrutura básica da glândula mamária é semelhanteem mamíferos, mas com variações entre espécies.
• Ruminantes e Éguas: Glândulas individuais intimamente associadas, formando o úbere. Nas éguas, duas glândulas bem desenvolvidas pré-púbicas. Cada teto possui dois canais e duas cisternas, conectadas a sistemas independentes de ductos e alvéolos.
• Vacas e Cabras: Possuem "áreas especializadas para a armazenagem de leite, denominadas cisternas", incluindo a cisterna da glândula e a cisterna do teto. A maior parte do leite na ordenha está nos ductos.
• Tetos (Mamilos): Porção terminal do sistema de ductos, revestidos por epitélio cúbico estratificado. Possuem feixes de células musculares lisas e grande quantidade de vasos sanguíneos, permitindo contração após a ordenha.
10. Sistema Endócrino
Regula diversas funções corporais através de hormônios.
• Hipófise (Adeno-hipófise - Pars Distalis): Contém células secretoras e vasos sanguíneos.
◦ Células Cromófobas: Não se coram, podem ser células-tronco indiferenciadas.
◦ Células Cromófilas: Coram-se. *Acidófilas: Produzem hormônio do crescimento (GH) e prolactina (PRL). *Basófilas: Produzem hormônio estimulante da tireoide (TSH), hormônio folículo-estimulante (FSH), hormônio luteinizante (LH) e hormônio adrenocorticotrófico (ACTH).
• Tireoide: O iodo é "indispensável para o metabolismo fisiológico da tireoide.". A deficiência de iodo, selênio ou excesso de cálcio na dieta pode levar a uma hiperestimulação da tireoide por TSH e formação de bócio (aumento de volume da glândula).
• Glândulas Adrenais (Suprarrenais): Possuem uma camada cortical e uma medular.
◦ Córtex: Dividido em três zonas: *Zona Glomerulosa: Mais externa, produz mineralocorticoide (aldosterona) para regulação de sódio e potássio. *Zona Fasciculada: Mais volumosa, produz glicocorticoides (cortisol e cortisona) para regulação do metabolismo e resposta ao estresse. As células são chamadas de espongiócitos. *Zona Reticular: Mais interna, sintetiza pequenas quantidades de andrógenos.
◦ Aves: A estrutura adrenal é semelhante aos mamíferos, mas os glicocorticoides têm papel importante no metabolismo e na resposta adaptativa ao estresse durante o voo. A medula secreta maiores quantidades de epinefrina.
• Pâncreas: Possui componentes exócrinos (produção de enzimas digestivas) e endócrinos (regulação da glicemia através das ilhotas pancreáticas).
◦ Ilhotas Pancreáticas: *Células Alfa (α): Sintetizam e armazenam glucagon, que "eleva a quantidade de açúcar no sangue (hiperglicemiante)", estimulando a quebra de glicogênio e a gliconeogênese. *Células Beta (β): Correspondem a 60-80% das células das ilhotas, sintetizam e armazenam insulina, que "reduz a quantidade de açúcar no sangue (hipoglicemiante)", facilitando a captação e armazenamento de glicose. *Somatostatina: Inibe a secreção de vários hormônios, incluindo insulina e glucagon, e atua no trato gastrointestinal. *Polipeptídeo Pancreático: Regula as funções exócrinas do pâncreas e pode influenciar o apetite.
11. Sistema Digestório
Detalhado em várias estruturas, desde a cavidade bucal até o intestino.
• Língua: Órgão muscular (músculo estriado esquelético) recoberto por mucosa. Funções essenciais: preensão, condução, mastigação, mistura de alimentos com saliva, deglutição e percepção do sabor. Possui músculos intrínsecos e extrínsecos.
◦Papilas Linguais: Variam em forma e função. *Mecânicas: Filiformes (mais abundantes, queratinizadas, com função puramente mecânica), cônicas e lenticulares. *Gustativas: Contêm botões gustativos. *Fungiformes: Em forma de cogumelo, com um ou mais botões gustativos. Abundantes em carnívoros e caprinos, escassas em cavalos e bovinos. *Valadas (Circunvaladas): Grandes e achatadas, circundadas por um sulco, com muitos botões gustativos nas laterais. O número varia por espécie. *Foliadas: Pregas paralelas na margem lateral posterior, com botões gustativos nas laterais. Ausentes em ruminantes e rudimentares em gatos.
• Dentes:
◦ Braquiodontes: "São dentes curtos, que param de crescer após a erupção, e apresentam esmalte, dentina e cemento." Exemplos: carnívoros, incisivos de ruminantes, dentes de porcos (exceto caninos).
◦ Hipsodontes: Muito mais longos, continuam crescendo por grande parte ou toda a vida adulta. Exemplos: dentes de cavalos, bucinadores de ruminantes, caninos de porcos.
• Glândulas Salivares: Glândulas exócrinas de origem ectodérmica, tubuloacinares, com células mioepiteliais. Classificadas em maiores (parótida, mandibular, sublingual) e menores.
• Estômago:
◦ Monogástricos: Estômago único, não compartimentado. *Camadas: Mucosa (epitélio colunar simples com fossas gástricas e glândulas gástricas, muscular da mucosa), submucosa (tecido conjuntivo vascularizado, plexo de Meissner), túnica muscular (células musculares lisas em espiral, plexo mioentérico), e serosa. *Glândulas Gástricas: Contêm células especializadas: *Parietais: Produzem ácido clorídrico (HCl) e fator intrínseco (para absorção de vitamina B12). *Principais: Produzem pepsinogênio (ativado em pepsina pelo HCl para digestão de proteínas). *Mucosas: Produzem muco e bicarbonato para proteção da mucosa. *Enteroendócrinas: Secretam hormônios como gastrina (regula HCl e motilidade gástrica). *Suínos: Região cárdica mais desenvolvida com predominância de células produtoras de muco, uma adaptação para dieta rica em carboidratos e proteínas.
◦Poligástricos (Ruminantes): Estômago com quatro compartimentos (rúmen, retículo, omaso, abomaso). Os três primeiros são pré-estômagos aglandulares. *Pré-estômagos: Função de armazenamento temporário para fermentação da fibra vegetal pela microbiota (produção de AGVs e vitaminas do complexo B), absorção de água e produtos da digestão, mistura e trituração do alimento. A mucosa é revestida por epitélio estratificado pavimentoso queratinizado. *Rúmen: "Grande tanque de fermentação anaeróbia", com mucosa coberta por papilas. O desenvolvimento das papilas aumenta com a introdução de volumosos na dieta. *Retículo: Mucosa com pregas interconectadas ("cristas reticulares"), aspecto de favo de mel. Ocorre fermentação e absorção de AGVs. * Omaso: Mucosa com pregas longitudinais ("lâminas omasais") classificadas por ordens. Responsável pela trituração e absorção de água, sódio e AGVs. A absorção é maior em bovinos. *Abomaso: Único compartimento com função química (similar ao estômago monogástrico).
• Intestino Delgado: Dividido em duodeno, jejuno e íleo. Possui estruturas para digestão e absorção.
◦ Digestão: Enzimas das células absortivas (enterócitos) e do pâncreas. Muco secretado por células caliciformes e glândulas submucosas do duodeno.
◦ Absorção: Três características aumentam a área de contato: *Pregas da Mucosa: Permanentes em ruminantes, desaparecem em outros mamíferos domésticos quando o intestino se distende. *Vilosidades Intestinais: Projeções em forma de dedo (longas e finas em carnívoros, curtas e grossas em bovinos). *Microvilosidades: Especializações da membrana plasmática dos enterócitos, com proteínas transportadoras e enzimas digestivas.
◦ Mucosa: Epitélio de revestimento, lâmina própria (com glândulas intestinais - Lieberkühn), e lâmina muscular. *Glândula Intestinal (Tubular Simples): Revestida por enterócitos, células caliciformes e células colunares indiferenciadas (renovação constante). Em ruminantes e cavalos, contêm células de Paneth (enzimas defensivas) e células enteroendócrinas (hormônios digestivos). *Nódulos Linfoides: Isolados ou aglomerados (placas de Peyer no íleo), com função protetora.
◦ Submucosa: Tecido conjuntivo vascularizado, plexo nervoso submucoso. As glândulas submucosas (de Brunner) em ovinos, caprinos e carnívoros não se estendem por todo o duodeno, mas em cavalos, bovinos e suínos sim.
• Intestino Grosso: Inclui ceco, cólon e reto.
◦ Características: Ausência de vilos, epitélio cilíndrico simples com menos células absortivas e mais células caliciformes, glândulas intestinais na lâmina própria.
◦ Reto: Armazena fezes. A mucosa muda para epitélio estratificado pavimentoso. A lâmina própria-submucosa pode ter glândulasexócrinas em cães e gatos, mas não em ruminantes e equinos.
• Sistema Digestório das Aves:
◦ Esôfago: Epitélio estratificado queratinizado e glândulas esofágicas volumosas.
◦ Inglúvio (Papo): Dilatação do esôfago para armazenamento temporário de alimento (em aves granívoras).
◦ Proventrículo (Estômago Glandular): Primeira porção do estômago, com pregas e glândulas proventriculares na submucosa.
◦ Ventrículo (Moela): "Estômago muscular das aves", com paredes musculares espessas para trituração mecânica do alimento.
◦ Intestino Grosso das Aves: Curto, função principal de absorção de água e eletrólitos. Termina na cloaca.
◦ Glândulas Anexas (Aves): *Fígado: Grande, bilobado, produz bile (para emulsificação de gorduras). Hepatócitos organizados em lóbulos, células de Kupffer (defesa imunológica). *Pâncreas: Órgão alongado entre as alças do duodeno, com funções exócrinas (enzimas digestivas) e endócrinas (insulina e glucagon).
12. Sistema Urinário
Responsável pela filtração do sangue e formação da urina.
• Rins: Par de órgãos com função de filtração do sangue e absorção de água e eletrólitos.
◦ Parênquima Renal: Dividido em córtex e medula. A unidade funcional é o néfron.
◦ Néfron: Estrutura responsável pela filtração. Composto por corpúsculo renal (glomérulo e cápsula), túbulo contorcido proximal (TCP), alça de Henle e túbulo contorcido distal (TCD). Conectados aos túbulos coletores. *Túbulos Contorcidos Proximais: Células largas com microvilosidades, alta capacidade de absorção (70% da água, glicose, aminoácidos, etc.) e secreção (creatinina, ácido úrico).
• Ureteres: Conduzem a urina dos rins à bexiga.
◦ Camadas: Túnica mucosa (epitélio de transição), própria-submucosa (tecido conjuntivo frouxo), túnica muscular (músculo liso longitudinal interna, circular intermediária, longitudinal externa) e adventícia/serosa.
• Bexiga: Armazena urina.
◦ Mucosa: Epitélio estratificado de transição com células globosas que mudam de forma. Rica em fibras elásticas.
◦ Túnica Muscular: Músculo liso, denominado músculo detrusor, controlado pelo sistema nervoso.
• Sistema Urinário das Aves:
◦ Rins: Alongados, subdivididos em três porções (cranial, média, caudal). Divididos em lóbulos e lobos. Possuem dois tipos de néfrons.
◦ Ureteres: Pares, com porções renal e pélvica. Epitélio colunar pseudoestratificado, tecido conjuntivo frouxo e nodular, e músculo liso.
◦ Cloaca: Estrutura comum aos sistemas digestório, urinário e reprodutor. Dividida em coprodeu (desemboca no reto), urodeu (desemboca no ureter) e proctodeu (desemboca no testículo ou vagina). A mucosa possui pregas e epitélio que varia de colunar simples a pavimentoso estratificado, com células caliciformes.
13. Sistema Reprodutor Masculino
• Testículos: Produzem espermatozoides. Túbulos seminíferos revestidos por tecido conjuntivo frouxo, contendo células de Leydig (produtoras de testosterona).
• Epidídimo: Responsável pelo amadurecimento e armazenamento de espermatozoides. Os ductos epididimários são revestidos por "epitélio pseudoestratificado colunar" com estereocílios para absorção de restos celulares.
• Ductos Deferentes: Conduzem os espermatozoides.
• Pênis: Órgão para liberação de sêmen. Dividido em raiz, corpo e glande. Contém corpos cavernosos e esponjoso (tecido erétil) e uretra.
◦ Pênis Fibroelástico: Possui pouco ou nenhum músculo liso nos espaços cavernosos, que são pequenos e separados por tecido fibroelástico. Requer pouco sangue para ereção. Exemplos: ruminantes e suínos. Possui flexura sigmoide.
◦ Pênis Músculo-cavernoso: Tecido erétil com espaços sanguíneos mais largos revestidos por endotélio e tecido conjuntivo, além de células musculares lisas. Requer maior volume de sangue para ereção. Exemplos: equinos, carnívoros, humanos.
• Sistema Reprodutor Masculino das Aves: Diferenças significativas em relação aos mamíferos (homogamético ZZ, órgãos intracavitários, ausência de pênis verdadeiro).
◦ Testículos: Semelhantes aos mamíferos.
◦ Epidídimos: Dorsomedialmente aos testículos. Importantes no transporte, secreção e reabsorção de fluidos e remoção de espermatozoides degenerados. Formados por ductos eferentes, conectores e epididimário.
◦ Falo (Órgão Copulador): Pequeno na maioria das aves, não funciona como órgão penetrante, exceto em patos e gansos. Histologicamente, porção proximal com epitélio estratificado pavimentoso e porção distal com epitélio simples cilíndrico.
14. Sistema Reprodutor Feminino
• Ovários: Produzem ovócitos e hormônios.
• Útero: Local de desenvolvimento do filhote.
◦ Camadas: *Endométrio: Camada mais interna (mucosa-submucosa), influenciada hormonalmente. Possui uma zona funcional (degeneração parcial ou completa após prenhez/cio) e uma zona basal (mitoticamente ativa, renova o tecido). *Miométrio: Camada intermediária (túnica muscular), composta por "tecido muscular liso que se contrai na hora do parto para expulsar o feto". *Perimétrio: Camada mais externa (serosa), com tecido conjuntivo.
• Tubas Uterinas: Transportam ovócitos, espermatozoides e zigotos. Local da fecundação. Divididas em três regiões macroscopicamente.
• Vagina:
• Sistema Reprodutor Feminino das Aves: Ovário e oviduto desenvolvidos apenas no lado esquerdo (devido a condições hormonais).
◦ Ovário: Camadas cortical (externa, epitélio simples) e medular (interna, vascular). Os ovócitos das aves são os maiores do reino animal.
◦ Oviduto: Ducto reprodutivo retorcido e pregueado, muscular. Cinco regiões: Infundíbulo, Magno, Istmo, Útero (glândula da casca), Vagina. *Vagina: Ducto estreito e curto com músculo liso bem desenvolvido. Mucosa pregueada com epitélio colunar pseudoestratificado e células caliciformes. Possui glândulas hospedeiras de espermatozoides. Abre-se no urodeu da cloaca.
15. Correlações Clínicas e Peculiaridades das Espécies
• Medicina Veterinária: O conhecimento da histologia é crucial para entender e diagnosticar patologias específicas em animais, como trombose, inflamações vasculares e complicações circulatórias.
• Bócio: Condição resultante da deficiência de iodo, selênio ou excesso de cálcio, levando à hiperplasia da tireoide.
• Diabetes Mellitus: Desequilíbrio nos níveis de insulina.
• Língua: Papilas fungiformes são escassas em cavalos e bovinos, mais numerosas em ovinos e suínos, e abundantes em carnívoros e caprinos. O número de papilas valadas varia por espécie.
• Glândula Mamária: A adaptação de cisternas em vacas e cabras permite maior armazenamento de leite.
• Intestino Delgado: As pregas da mucosa são permanentes em ruminantes, mas desaparecem em outros mamíferos quando o intestino distende. Vilosidades são longas e finas em carnívoros, e curtas e grossas em bovinos. As glândulas submucosas do duodeno se estendem até o jejuno em cavalos, bovinos e suínos, mas não em ovinos, caprinos e carnívoros. Placas de Peyer são maiores em bovinos e mais numerosas em cavalos.
• Pâncreas (Aves): Ilhotas de células endócrinas que produzem hormônios (insulina e glucagon) para regulação da glicemia.
• Sistema Reprodutor Masculino (Aves): Ausência de pênis verdadeiro, com um falo que é pequeno na maioria das aves, mas grande em patos e gansos.
• Sistema Reprodutor Feminino (Aves): Ovário e oviduto desenvolvidos apenas no lado esquerdo.