EXAMES PARASITOLÓGICOS

Prévia do material em texto

II AVALIAÇÃO DE EXAMES PARASITOLÓGICOS
Coprologia funcional
Soluções conservadoras de material fecal
Formalina a 10% MIF (mertiolato – iodo – formaldeído) SAF (Fixador Acetato de Sódio-Ácido
Acético-Formaldeído)
Metas da coprologia
Distúrbios motores (fezes de
constipação, diarréia do delgado,
diarréia do ceco)
Insuficiências digestivas
(pancreática, biliar, gástrica)
Distúrbios motores com reação da
mucosa (fezes de fermentação, falsas
diarréias, colites)
Aspectos físicos das fezes
pH Consistência
- Varia de 6 a 7,2
→ Colites, insuficiências gástricas e pancreáticas: pH é alcalino
→ Dispepsias fermentativas e insuficiências biliares: pH é ácido
75% água = fezes sólidas ou pastosas
80% água = fezes amolecidas
90% água = fezes líquida
Estados patológicos das fezes
Branco-grisácea Icterícias obstrutivas fase aguda das hepatites
Amarelada "Diarréias de fermentação" e nas esteatorréias da doença celíaca e insuficiência
pancreática
Gema de ovo Provenientes de trânsito acelerado a partir das partes mais altas do intestino delgado
Verde Pela biliverdina, nas diarréias duodenais
Avermelhada Dejeções que contêm sangue não transformado de origem baixa (hemorróidas)
Parda Diarréias gastrógenas
Enegrecida Devido a hemorragias digestivas altas
Elementos anormais
Muco Irritação ou inflamação do TI
- Pequenas estrias ou filamentos maiores
Gordura Ingestão excessiva; insuficiência
pancreática; trânsito intestinal
acelerado e síndrome da má
absorção
Sangue Disenterias: sangue + muco
Hemorróidas: sangue vermelho na superfície
da massa fecal
Ulcerações da sigmóide: vermelho misturado a
massa fecal
Detritos
vegetais
Fragmentos de batata, maçã,
cenoura e outros aparecem em
casos de insuficiência pancreática
Pus Em abundância confere coloração acinzentada Cálculos
Resíduos
alimentares
Tecido conjuntivo – feixes filamentosos
esbranquiçados – presença após ingestão de
carne crua sugere insuficiência gástrica ou
esvaziamento rápido do estômago.
Corpos
estranhos
Fibras
musculares
Fragmentos de carne; coloração parda ou
castanha – sugere insuficiência pancreática,
falta de digestão no estômago
Verme
Dosagem de gordura nas fezes
Van der Kamer
(quantitativo)
Teste com sudan III (qualitativo) Esteatócrito (semiquantitativo)
Consumir 100g de
gordura/dia –
colher as fezes por
72hs.
→ Esteatorréia
Leve: 7 – 15g / dia
Moderada: 16 –
25g / dia
Severa: 25g / dia
Normal: >>>> Dez ou mais glóbulos (x 400) → Má
absorção
Pequenas quantidades de fezes + areia fina
(em suspensão)
- Centrifugação em tubo capilar de
vidro
→ Formação de fase sólida inferior (S),
fase líquida intermediária (L) e fase superior
(G) que constitui a gordura presente nas
fezes
Esteatócrito é calculado= G/(G+S) x 100
0 – 1 mês – 4,04 %
1 – 3 meses – 1,38 %
3 – 72 meses – 0,29 %
→ encontra-se elevado em diarréia grave, fístula
gastrocólica, espru, doença celíaca, afecções
pancreáticas esteatorréia idiopática.
Pesquisa de sangue oculto
Reação da Benzidina Reação do Guaiaco
- Espalhar as fezes sobre o papel de filtro limpo
e colocar duas gotas de água oxigenada.
Adicionar duas gotas de solução de benzidia.
Nenhuma mudança de cor: Negativo
Cor esverdeada: Traços
Cor verde claro: +
Cor verde escuro: ++
Cor verde azulado: +++
Azul intenso: ++++
- Espalhar as fezes sobre o papel de filtro limpo e colocar duas
gotas de ácido acético glacial, duas gotas de álcool etílico
saturado com goma guaiaco em pó e duas gotas de H2O2 3%.
Nenhuma mudança de cor: Negativo
Cor esverdeada: Traços
Cor verde claro: +
Cor verde escuro: ++
Cor verde azulado: +++
Azul intenso: ++++
MÉTODO CENTRÍFUGO-SEDIMENTAÇÃO POR FORMOL ÉTER (RITCHIE)
Fundamento Indicação Função do éter Procedimento
- Diagnóstico
para ovos e
cistos das
espécies de
parasitos
detectáveis,
além de
separá-los de
detritos e
gorduras
fecais
Pesquisa de
protozoários
e helmintos
nas fezes
- Dissolve as
substâncias
graxas e faz
flutuar detritos;
→ é mais volátil,
inflamável e
explosivo que o
acetato de etila
1- Coletar 1-2g de fezes e misturar em 10 ml de solução
salina 0,85% ou água. Filtrar através de gaze em um tubo de
15 ml de centrifugação.
2- Centrifugar a 2000 rpm, descartar o sobrenadante e
ressuspender o sedimento em solução salina. Repetir até o
sobrenadante ficar claro.
3- Após a última centrifugação, adicionar 10 ml de formalina a
10% no sedimento e deixar em repouso por 5 minutos.
4- Adicionar 3 ml de éter, agitar o tubo por 30 min e
centrifugar novamente.
5- Quatro camadas se formam, separar o tampão de detritos
e limpar com swab as paredes do tubo.
6- Preparar o sedimento para análise microscópica.
MÉTODO CENTRÍFUGO-SEDIMENTAÇÃO POR FORMOL ACETATO DE ETILA
Fundamento Indicação Função do
acetato de etila
Procedimento
- Diagnóstico
para ovos e
cistos das
espécies de
parasitos
detectáveis,
além de
separá-los de
detritos e
gorduras fecais
Pesquisa de
protozoários
e helmintos
nas fezes
- Dissolve as
substâncias
graxas e faz
flutuar detritos;
1- Diluir 2g de fezes em 5 mL de formalina a 10% e filtrar
através de gaze.
2- Colocar no tubo de centrifugação e adicionar 1-2 gotas
de detergente (diminui a tensão superficial) comercial e 3 mL de
acetato de etila.
3- Tampar, agitar por 10 segundos e centrifugar por 2
minutos a 2000 rpm.
4- Quatro camadas se formam: (1) sedimento no fundo,
(2) formalina, (3) detritos, e (4) acetato de etila.
5- Remover as camadas superiores.
6- Ressuspender o sedimento com 7mL de água,
centrifugar novamente, descartar o sobrenadante e deixar
o tubo invertido sobre gaze.
7- Ressuspender o sedimento com lugol e colocar uma
gota na lâmina para análise microscópica.
MÉTODO DE KINYOUN
Fundamento Indicação Procedimento
- Coccídios coram-se pela
fucsina básica (coloração
vermelha ou rosa intensa);
- São álcool ácido resistentes,
destacando-se de resíduos,
leveduras e bactérias;
Oocistos de:
→ Cryptosporidium sp.
→ Cyclospora Cayetanensis
→ Isospora belli
1- Fixa a lâmina com calor
2- Corar com fucsina (3-5 min)
3- Lavar com água
4- Diferenciar com álcool ácido a 0,1%
5- Lavar com água
6- Contrastar com azul de metileno (30s a 1
min)
MÉTODO DE HOFFMAN (SEDIMENTAÇÃO ESPONTÂNEA)
Fundamento Indicação Vantagem e desvantagem Procedimento
Precipitação de
cistos, ovos e
larvas no fundo
do cálice pela
força da
gravidade;
Pesquisa de
ovos de
Schistosoma
mansoni
→ Vantagem: Economia no
uso de reagentes e
centrífugas
→ Desvantagem: A grande
quantidade de detritos fecais
dificulta a leitura e
preparação da lâmina;
1- Homogeneizar as fezes (2 - 5g) em água com
um bastão de vidro;
2- Transferir a suspensão para o cálice e filtrar
usando gaze ou filtro;
3- Após 1-2h descartar o sobrenadante e
adicionar água até alcançar a limpidez (em
repouso)
4- Descartar o último sobrenadante e coletar o
sedimento com uma pipeta de Pasteur e
colocar sob a lâmina;
5- Adicionar uma gota de lugol e a lamínula;
MÉTODO DE FAUST & COLS (FLUTUAÇÃO POR SULFATO DE ZINCO)
Fundamento Indicação Procedimento
Flutuação de
cistos de
protozoários e
ovos leves de
helmintos
a) Cistos de protozoários
b) Ovos de Ancilostomídeos,
Enterobius vermicularis e
Trichuris trichiura
1- Diluir 1 a 2g de fezes em água
2- Filtrar com gaze em um tubo de centrífuga e centrifugar
3- Descartar o sobrenadante e ressuspender com água →
centrifuga novamente → até atingir a limpidez
4- Adicionar a solução de zinco→ centrifugar
5- Recolher a membrana superficial formada com uma alça
bacteriológica
6- Colocar o material sob a lâmina + lugol + lamínula
MÉTODO DE WILLIS
Fundamento Indicação Procedimento
A solução saturada
de cloreto faz
flutuar ovos de
helmintos leves
Ovos de
Ancilostomídeos,Trichuris trichiura e
ovos férteis de Ascaris
lumbricoides;
1- Homogeneizar 5 g de fezes
2- Completar o volume do frasco borel com a solução
saturada de NaCl;
3- Colocar uma lâmina sobre a boca do frasco de modo que
sua face seja banhada pelo líquido;
4- Esperar 30-40 min, suspender a lâmina e inverte-la
5- Adicionar uma gota de lugol + lamínula
MÉTODO DE TAMISAÇÃO (PESQUISA E IDENTIFICAÇÃO DE PROGLOTES)
Fundamento Indicação Procedimento
Captura de anéis
de tenídeos
- Anéis de escólex de tenídeos
- Vermes adultos de: A. lumbricoides, E. vermicularis,
T. trichiura, ancilostomídeos e H. nana
1- Emulsionar as fezes com água
2- Coar com a peneira metálica
3- Microscópio
MÉTODO DE GRAHAM (FITA GOMADA)
Fundamento Indicação Procedimento
Utilização da fita na
apreensão de estágios
evolutivos de parasitos
localizados na região
perianal
Enterobius vermicularis
Taenia spp
1- Utilizar um pedaço de fita adesiva, e colocar dois
pedacinhos de papel nas extremidades para facilitar o
manuseio;
2- Montar em um tubo de ensaio;
3- Levar a fita até a região perianal e pressionar em
diversos lados;
4- Colar a fita na lâmina
MÉTODO DE BAERMANN-MORAES (menos usado por conta do equipamento antigo)
Fundamento Indicação Procedimento
Hidro e
termotropismo
das larvas e
sedimentação
das larvas
Pesquisa de
larvas
Strongyloide
Stercoralis
1- Colocar 10g de fezes em uma gaze dobrada 4x e fazer uma “trouxa"
2- Encher o funil com água a 40-45ºC + fechar o bico do funil
3- Colocar a gaze apoiada na borda superior do funil
4- 12 horas de repouso
5- Escoar 2-5ml do sedimento em vidro relógio e ler no estereomicroscópio
6- Ou coletar em tubo cônico centrifugando e corando com lugol + lamínula
MÉTODO DE RUGAI (mais utilizado na rotina do que Baermann)
Fundamento Indicação Procedimento
Hidro e
termotropismo
das larvas e
sedimentação
das larvas
Pesquisa de
larvas
Strongyloide
Stercoralis
1- Transferir 10g de fezes para recipiente coberto com gaze e inverter-lo
formando uma “trouxa”
2- Colocar o material em um cálice de sedimentação com água a 40-45ºC,
em contato com as fezes
3- 1 hora de repouso
4- Desprezar o sobrenadante + coletar o sedimento com uma pipeta e
colocá-lo na lâmina
5- Usar lugol
MÉTODO DE HARADA-MORI
Fundamento Indicação Procedimento
Cultivo de
material fecal
em papel filtro
Pesquisa de
larvas
Strongyloide
Stercoralis e
ancilostomídeos
1- Distribuir 0,5g de fezes em papel filtro deixando as extremidades livres
2- Colocar o papel filtro no tubo de ensaio com água destilada
3- Tampar o tubo e deixar de 7 a 14 dias em temperatura ambiente
4- Coletar o sedimento e analisar em lupa
5- Fixar as larvas com formalina 10%, piperazina 5%, banho Maria 50ºC
ou lugol
6- Coletar o sedimento + lugol + lamínula
MÉTODO DE KATO-KATZ
Fundamento Indicação Procedimento
Peneiramento do
material fecal e
isolamento de
ovos após contato
com substância
conservante
Contagem de ovos para
diagnóstico e acompanhamento de
tratamento
→ Contar os ovos encontrados em
toda a lâmina e multiplicar por 23 =
nº de ovo por grama de fezes
– Pesquisa de helmintos e
Esquistossomose
1- Colocar amostra fecal sob papel absorvente
2- Comprimir a tela metálica fazendo com que a
amostra passe através das malhas
3- Transferir-las para o orifício do cartão sob a lâmina
4- Cobrir as fezes com uma lamínula de celofane
embebida em glicerina + verde malaquita→
invertendo e pressionando a lâmina
5- Diafanizar e corar + examinar