MICROSCOPIA E METODOS DE ESTUDOS CELULARES

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<p>Microscopias e métodos de estudos celulares</p><p>Profª Keiko Perpetuo Sousa</p><p>Cirurgiã – dentista</p><p>CRO DF 11204</p><p>Microscopias</p><p>As células são pequenas e complexas, sendo difícil a observação de sua estrutura e composição</p><p>macromolecular. Ainda é mais difícil elucidar como funcionam seus diversos subcompartimentos;</p><p>Há uma grande variedade de procedimentos experimentais para esse estudo, sendo que as</p><p>possibilidades e limitações dessas técnicas têm determinado, em parte, nossa concepção atual da</p><p>célula e dos tecidos;</p><p>Portanto, para compreender melhor a célula, é necessária a compreensão geral dos métodos que</p><p>foram desenvolvidos para o seu estudo;</p><p>Através do estudo da microscopia iremos aprender os efeitos das interações de raios luminosos ou</p><p>eletromagnéticos com as células, ou compostos supramoleculares, obtendo assim informações</p><p>preciosas para a compreensão da biologia celular e molecular.</p><p>Microscopias</p><p>Anton van Leeuwenhoek – Holandês</p><p>• Em 1674 inventou um microscópio simples;</p><p>• Estudou glóbulos vermelhos do sangue, espermatozoides e microrganismos presentes na</p><p>água.</p><p>Microscopias</p><p>Definição</p><p>‘’MICRO’’: pequeno</p><p>‘’SCOPIO’’: do olhar</p><p>Microscopia: Ciência que estuda dos seres e objetos que não são</p><p>capazes de serem vistos a olho nu;</p><p>Mas por que precisamos dos microscópios?</p><p>Apenas os nossos olhos não bastão! Será que as lentes de aumento</p><p>são suficientes? NÃO</p><p>Precisamos de LUZ, pois enxergamos conforme a proporção de luz</p><p>disponível</p><p>• O primeiro microscópio era composto de uma lente única e a partir de então novos microscópios</p><p>foram surgindo cada vez mais elaborados e as aproximações passaram a ser feitas a partir da</p><p>combinações de objetivas ;</p><p>Tipos de microscópios</p><p>LUZ x ELÉTRONS</p><p>• Microscópio de luz (óptica): Os microscópios são equipamentos que têm por objetivo produzir</p><p>imagens aumentadas de objetos tão pequenos que são indistintos à vista desarmada, ou que, se</p><p>vistos, não revelariam aspectos texturais mais detalhados. Permite a observação de detalhes de</p><p>até 200 nanômetros. Os microscópios ópticos são, geralmente, utilizados em laboratórios de</p><p>análises;</p><p>A formação de imagens pelos microscópios fundamenta-se em um sistema de lentes combinadas, que</p><p>são colocadas de forma a ampliar a imagem do objeto;</p><p>Para que os objetos sejam vistos à microscopia, dois requisitos fundamentais têm de ser cumpridos: a</p><p>interação da luz com o espécime tem de gerar absorção ou refração dos raios de luz, criando</p><p>contrastes entre o objeto e o meio que o envolve;</p><p>Além do sistema óptico, o microscópio de luz é constituído de componentes mecânicos, que</p><p>estabilizam o sistema de lentes que produzirá a imagem.</p><p>Tipos de microscópios</p><p>A porção mecânica do microscópio é constituída de base ou pé, braço, platina, parafusos</p><p>macrométrico e micrométrico, revólver das objetivas e canhão da ocular. Todos esses componentes</p><p>podem varias na forma e isso é o que caracteriza o design dos diversos modelos de microscópios;</p><p>O importante a ser ressaltado é que a qualidade da imagem depende tanto da qualidade das lentes</p><p>como da porção mecânica.</p><p>Outros tipos de microscópios de luz (ópticos): microscópio ultravioleta, microscópio de fluorescência,</p><p>microscópio de contraste de fase e microscópio de polarização</p><p>Como utilizar o microscópio óptico?</p><p>• 1.Ligar;</p><p>• 2. Descer a mesa ao máximo;</p><p>• 3. Colocar na objetiva de menor número;</p><p>• 4. Aumentar a intensidade se luz;</p><p>• 5. Colocar a lâmina para a análise;</p><p>• 6. Alcançar o foco entanto observa a lâmina pelas oculares ao mesmo tempo em que,</p><p>vagarosamente subindo a mesa movimentando o macrômetro;</p><p>• 7. Movimentar o micrométrico para alcançar o foco;</p><p>• 8. Após mudar de objetiva, SOMENTE achar o foco pelo micrométrico. *perigo de quebrar a</p><p>lamina;</p><p>• **Após o uso do microscópio para a análise, devemos voltar a objetiva ao menor aumento (vmr),</p><p>abaixar a mesa ao máximo, tirar a lâmina e não se esquecer de desligar o microscópio</p><p>Tipos de microscópios</p><p>LUZ x ELÉTRONS</p><p>• Microscópio eletrônico: O desenvolvimento da microscopia eletrônica teve início principalmente a</p><p>partir de estudos do comportamento ondulatório dos elétrons;</p><p>Sua capacidade de ampliação é superior a dos microscópios de luz;</p><p>Os tipos principais são: Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV) e Microscópio Eletrônico de</p><p>Transmissão (MET);</p><p>Tipos de microscópios</p><p>• Microscopia de transmissão: Este tipo permite examinar detalhes;</p><p>Para a observação neste tipo de microscópio é necessário que o material seja cortado em camadas</p><p>bem finas;</p><p>Além da grande resolução, os microscópios que utilizam essa tecnologia podem medir características</p><p>como dureza e elasticidade do material;</p><p>A formação final da imagem pode ser interpretada como sendo eletrodensa, ou seja, escura, quando</p><p>os elétrons encontram elementos como ferro, chumbo ou ouro e eletrolúcida ou clara, quando os</p><p>elétrons encontram elementos como hidrogênio, carbono, nitrogênio ou oxigênio;</p><p>Materiais biológicos são constituídos na grande maioria por elementos que se comportam como</p><p>elementos eletrolúcidos, de modo que é necessário contrastar o material.</p><p>Tipos de microscópios</p><p>• Microscopia de varredura: Capazes de produzir imagens em alta resolução;</p><p>Permitem obter imagens tridimensionais, sendo bastante utilizados para a observação da estrutura</p><p>superficial da amostra;</p><p>Essas imagens tridimensionais são obtidas quando não são utilizados os elétrons transmitidos, e sim</p><p>os elétrons secundários ou refletidos, que partem da superfície da amostra quando esta é</p><p>bombardeada pelo feixe eletrônico</p><p>Tipos de microscópios</p><p>• Microscopia de tunelamento: Esse tipo especial de microscópio eleva a potência visual do olho</p><p>humano em 1 milhão de vezes;</p><p>Desenvolvido na década de 1980, eles multiplicam em 100 vezes a capacidade dos microscópios</p><p>eletrônicos;</p><p>O princípio da microscopia de tunelamento parte do pressuposto de que todos os corpos têm</p><p>características ondulatórias e emitem energia.</p><p>Tipos de microscópios</p><p>LUZ x ELÉTRONS - RESUMO</p><p>• Microscópio óptico: Através de lentes e luz podemos observar as células de até 0,2 micrômetros;</p><p>• Microscópios eletrônicos: Utiliza feixes de elétrons para que vejamos as imagens</p><p>- Varredura: os feixes de elétrons batem na superfície dos objetos promovendo reflexão provendo</p><p>uma imagem semelhante ao que é visto no microscópio de transmissão, porém em 3D;</p><p>- Transmissão: os feixes de elétrons passa através do objetos e assim podemos ver o que há dentro</p><p>das células, como as organelas. Esse microscópios apresenta um aumento de até 500.000 vezes;</p><p>- Tunelamento: nos permite enxergar átomos e moléculas com poder de aumento em até</p><p>100.000.000 de vezes.</p><p>Tipos de microscópios</p><p>LUZ x ELÉTRONS - RESUMO</p><p>Aspectos de comparação Microscopia de luz convencional Microscopia eletrônica de</p><p>transmissão</p><p>Fonte Luz visível Elétrons</p><p>Lentes De vidro Eletromagnéticas</p><p>Limite de resolução 200nm 0,2nm</p><p>Formação de imagem Absorção Elétron-opacidade</p><p>Atividade da aula de aspectos gerais de estrutura celular</p><p>Respostas comentadas</p><p>1 - (MOJI-SP) A membrana plasmática, apesar de invisível ao microscópio óptico, está presente:</p><p>a) em todas as células, seja ela procariótica ou eucariótica.</p><p>b) apenas nas células animais.</p><p>c) apenas nas células vegetais.</p><p>d) apenas nas células dos eucariontes.</p><p>e) apenas nas células dos procariontes.</p><p>As células que não possuem membrana são as vegetais pois tem a parede celular (que faz uma função similar a</p><p>da membrana, sendo que sem a permeabilidade seletiva). Procarionte e eucariontes possuem membranas.</p><p>Procarionte (sem carioteca) e a Eucarionte (com carioteca)</p><p>Carioteca = Envoltório que protege o material genético, vulgo núcleo</p><p>Atividade da aula de aspectos gerais de</p><p>estrutura celular</p><p>Respostas comentadas</p><p>2 - (UF-AC) Quimicamente, a membrana celular é constituída principalmente por:</p><p>a) acetonas e ácidos graxos.</p><p>b) carboidratos e ácidos nucleicos.</p><p>c) celobiose e aldeídos.</p><p>d) proteínas e lipídios.</p><p>e) RNA e DNA</p><p>3 - (Fuvest-SP) Células animais, quando privadas de alimento, passam a degradar partes de si mesmas</p><p>como fonte de matéria-prima para sobreviver. A organela citoplasmática diretamente responsável por</p><p>essa degradação é:</p><p>a) o aparelho de Golgi</p><p>b) o centríolo</p><p>c) o lisossomo</p><p>d) a mitocôndria</p><p>e) o ribossomo</p><p>O lisossomo é uma organela celular rica em enzimas que está relacionada com o processo de digestão</p><p>intracelular.</p><p>Atividade da aula de aspectos gerais de estrutura celular</p><p>Respostas comentadas</p><p>4 - Segundo a Teoria celular:</p><p>I. Todos os seres vivos são constituídos por células.</p><p>II. As diferentes formas de vida apresentam a célula como unidade básica.</p><p>III. O interior de uma célula abriga atividades essenciais aos seres vivos.</p><p>IV. Uma célula é desenvolvida por uma célula preexistente.</p><p>Estão corretas as afirmativas:</p><p>a) I e II</p><p>b) III e IV</p><p>c) I, II e III</p><p>d) Todas as alternativas</p><p>Atividade da aula de aspectos gerais de estrutura celular</p><p>Respostas comentadas</p><p>5 - A organização celular de uma célula eucarionte é mais complexa que a estrutura de uma célula</p><p>procarionte. Na verdade, acredita-se que a célula eucarionte surgiu a partir de uma célula primitiva, que</p><p>seria a célula procariótica.</p><p>Células eucariontes apresentam estruturas que atuam como se fossem órgãos, realizando as atividades celulares</p><p>essenciais para a célula. As mitocôndrias, por exemplo</p><p>a) são responsáveis pela síntese de proteínas na célula.</p><p>b) realizam a respiração celular, que produz a maior parte de energia necessária para as funções vitais.</p><p>c) digerem moléculas orgânicas, como carboidratos, lipídios e proteínas.</p><p>d) atuam no armazenamento, modificação e liberação de substâncias.</p><p>Alternativa correta: B</p><p>A ERRADA. As proteínas são sintetizadas em organelas chamadas de ribossomos.</p><p>C ERRADA. As moléculas orgânicas são digeridas nos lisossomos, onde se encontram enzimas digestivas.</p><p>D ERRADA. Essas funções são desempenhadas pelo complexo de Golgi</p><p>Atividade da aula de aspectos gerais de estrutura celular</p><p>Respostas comentadas</p><p>O conteúdo do AVA faz parte da carga horária total obrigatória da disciplina</p><p>e será cobrada nas Avaliações e nas aulas seguintes;</p><p>• Material Didático do AVA : acessar o AVA e observar as ferramentas e</p><p>conteúdos;</p><p>ATENÇÃO</p><p>As atividades das unidades só podem ser enviadas uma única vez. Após o</p><p>envio, não há como ter outra tentativa! PRESTEM ATENÇÃO!!!</p><p>Atividade AVA</p><p>ACESSE:</p><p>Membrana plasmática</p><p>https://www.youtube.com/watch?v=qJXAkXa3-Mk</p><p>Próxima aula</p><p>016300118@prof.uninassau.edu.br</p><p>@keikoperpetuo</p><p>mailto:016300118@prof.uninassau.edu.br</p>