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Ácidos nucléicos e o Dogma central da genética molecular Prof: Dr Marito Silva Trabalho processual??? • Fazer uma mapa conceitual • O mapa conceitual é um recurso gráfico usado para organizar definições e conceitos de uma maneira visualmente simples e estruturada A Genética é uma parte da Biologia que estuda, principalmente, como ocorre a transmissão de características de um organismo aos seus descendentes O que é a genética? E uma ciência que se volta para o estudo da hereditariedade, preocupando-se também com a análise dos genes. ➢ Genes: Sequência de DNA que codifica e determina as características dos organismos. É a unidade fundamental da hereditariedade. ➢ Em genética, hereditariedade é o conjunto de processos biológicos que asseguram que cada ser vivo receba e transmita informações genéticas através da reprodução • Para o pleno funcionamento dessa estrutura precisa-se dos genes. O que é a genética? • A GENÉTICA moderna, começou com o trabalho de Gregor Mendel, no início do século XIX Estudou a transmissão de características em ervilhas, e provou que há padrões de hereditariedade, os quais obedecem a regras Caracter recessivo e dominante Pai de genética O que é a genética? • O DNA foi isolado inicialmente pelo bioquimico suíço Fredrich Miescher 1860 de pus de curativos. • Ele foi chamado de ácido nucléico porque ele foi isolado no núcleo e era ácido. • Não era reconhecido como o material genético. Este papel pensava-se ser desempenhado pelas proteínas que, aparentemente, tinha maior potencial de variação. O que é a genética? • Muito tempo depois, em 1953, James Watson e Francis Crick mostraram que a base física da informação genética eram os ácidos nucleicos, especificamente o DNA. • 1953, James Watson e Francis Crick - postularam o modelo estrutura de dupla hélice, informação que desvendou o quebra cabeça. Aplicações da genética • Genética forense • Prevenção doenças • preservação de espécies ameaçadas de extinção • Estudo e criação de organismos geneticamente modificados e sua utilização para fins necessários • uso terapêutico das células-tronco. Tipos celulares • Dogma central da biologia molecular ➢ Toda a informação que uma célula necessita durante a sua vida está organizada em forma de código nas fitas dos ácidos nucleicos. Ácidos Nucléicos • Os ácidos nucleicos são macromoléculas, formadas por unidades monoméricas menores conhecidas como nucleotídeos. • Ocorrem em todas as células vivas e são responsáveis pelo armazenamento e transmissão da informação genética e, por sua tradução, que é expressa pela síntese precisa das proteínas. • Nos eucariontes ficam armazenados no núcleo das células e nos procariontes dispersos no hialoplasma Unidade básica do ácido nucléico: nucleotídeo Molécula formada por: • um açúcar do grupo das pentoses (monossacarídeos com cinco átomos de carbono); • um radical “fosfato”, derivado da molécula do ácido ortofosfórico (H3PO4 ); • uma base orgânica nitrogenada. Ligações de hidrogênio entre os nucleotídeos • Dogma central da biologia molecular ➢ Toda a informação que uma célula necessita durante a sua vida está organizada em forma de código nas fitas dos ácidos nucleicos. Aula 2 Continuação: Dogma central da biologia Processos de transcrição e tradução • Dogma central da biologia molecular ➢ Toda a informação que uma célula necessita durante a sua vida está organizada em forma de código nas fitas dos ácidos nucleicos. Transcrição do RNA • No núcleo ( eucariotos), no citoplasma ( procariotos) • Não ocorre em todo o genoma ➢ Regiões determinadas Genes • É o primeiro passo para a expressão génica, que significa a transformação do que é informação (DNA) para o que é característica do organismo. • Biossíntese do RNA ou Transcrição Biossíntese do RNA A síntese de RNA é semelhante à síntese de DNA ➢ Para a síntese de proteínas, a molécula de RNA correspondente é produzida pela transcrição do DNA • Uma das fitas do DNA fornece a informação genética • Através da enzima RNA polimerase, é transferida para uma sequência complementar de nucleotídeos no RNA • Chamado de RNA mensageiro (mRNA) ➢ Genes: Sequência de DNA que codifica e determina as características dos organismos. É a unidade fundamental da hereditariedade. • Biossíntese do RNA • Região Promotora: local de ligação da RNA Polimerase • Exons: regiões codificantes – determinam a sequência dos aminoácidos na proteína • Íntrons: regiões não-codificantes – são retiradas durante o splicing ESTRUTURA DO GENE Biossíntese do RNA • Esse processo ocorre em três etapas principais, a iniciação, o alongamento e o término, cada um contendo fatores específicos. • INICIAÇÃO DA TRANSCRIÇÃO: ✓ Enzimas específicas desfazem da dupla-hélice do DNA. ✓ Este processo ocorre apenas no gene que deverá ser transcrito. ✓ A síntese de RNA começa em regiões do DNA chamadas de promotoras - seqüências específicas reconhecidas pela RNA-pol - que direcionam a transcrição dos genes. ✓ Essas sequências podem ser bastante variáveis, porém, mantêm conservadas regiões responsáveis pela função promotora. ✓ Nos eucariotos a principal região promotora é conhecida como TATA box. Biossíntese do RNA • Fatores de transcrição ✓ Proteínas especiais que regulam a transcrição ✓ Interagem com as regiões reguladoras e promotoras do gene ALONGAMENTO Enzimas envolvidas: ✓ NA Polimerase: adição de nucleotídeos (sentido 5’ 3’) ✓ Helicase: desnaturação do DNA (separação das fitas) ✓ DNA Girase remoção de supertorções no DNA ALONGAMENTO A RNA-pol atua apenas em uma das fitas de DNA. A fita utilizada é sempre a mesma e denominada fita codificante ou ativa. A RNA-pol encaixa ribonucleotídeos, produzindo uma única fita de RNA,complementar à fita de DNA que serve de molde. Por isso é importante que a RNA-pol atue em apenas uma fita, pois RNAs diferentes serão produzidos a partir da transcrição de fitas distintas do DNA. Biossíntese do RNA Biossíntese do RNA Término • O RNA recém-formado vai se desligando do DNA que lhe serviu de molde. • Quando chega ao final do gene (há uma seqüência que o indica) a RNA-pol se desprende do DNA e a molécula de RNA é liberada. • A molécula de DNA é pareada e se fecha. • OBSERVAÇÃO: para cada tipo de RNA há uma RNA-pol diferente. Para cada tipo de RNA há uma RNA-pol diferente. RNA polimerase ✓ Tipo I: maioria dos RNAs ✓ Tipo II: RNAm • ✓ Tipo III: RNAr e RNAt Biossíntese do RNA • Processamento do RNA ✓ É o conjunto de modificações que os transcritos primários sofrem para se converter em RNA funcionais ✓ Alguns RNA primários contêm segmentos sem significado funcional aparente, como os íntrons no RNAm e os espaçadores do RNAr 45S Biossíntese do RNA • Processamento do RNA ➢ Modificações necessárias para que o RNAm possa sair no núcleo e atuar no citosol ✓ Remoção dos íntrons ✓ Adição do cap (extremidade 5’) e da cauda poli A (extremidade 3’) Biossíntese do RNA • Processamento do RNA ✓ Remoção dos íntrons Biossíntese do RNA • Processamento do RNA ➢ Adição do cap (extremidade 5’) ✓ Nucleotídeo 7-metilguanosina ✓ Evita a degradação do extremo 5' do RNAm ✓ É necessário durante a remoção dos íntrons ✓ É necessário para conectar o RNAm ao ribossomo no começo da tradução Biossíntese do RNA • Processamento do RNA Biossíntese do RNA • Processamento do RNA ➢ Adição da cauda poli A (extremidade 3’) ✓ Poliadenilação: agregação de uma sequência de aprox. 250 adeninas ✓ Evita a degradação do extremo 3' do RNAm ✓ Ajuda o RNAm a sair do núcleo AAAAAA POLI A Biossíntese proteica Ou Tradução Biossíntese Proteica • É resultado do processo de tradução da informação contida no material genético da célula. • No Citoplasma (Eucariotos e Procariotos) • Realizada pelo RIBOSSOMO, que usa comomolde o mRNA • Regulação específica (depende do gene, do tipo celular, do estágio de desenvolvimento, etc...) • Biossíntese Proteica • Presentes no citoplasma • Livres • Associados à membrana do retículo endoplasmático e à membrana externa da carioteca Ribossomos • Ribossomos são organelas constituídas por moléculas de RNA ribossômico (RNAr) e proteínas Possuem duas subunidades: • Subunidade maior (60S) • Subunidade menor (40S) Biossíntese Proteica Ribossomos Se encaixam para formar um ribossomo completo durante a síntese proteica Biossíntese Proteica Biossíntese Proteica Biossíntese Proteica Biossíntese Proteica Biossíntese Proteica Biossíntese Proteica Biossíntese Proteica Biossíntese Proteica Biossíntese Proteica Biossíntese Proteica