Teste de Coombs

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Imunologia Clínica
Prof. Esp. Caio Maia Nepomuceno
@Dr.CaioNepomuceno
Teste de coombs
Soro de Coombs: composto de imunoglobulina humana.
É um teste imuno-hematológico altamente sensível utilizado para pesquisar a presença de anticorpos anti-eritrocitátios expressos em pequenas quantidade.
Ou seja, permite a identificação de anticorpos fixados na hemácia ou livre, podendo ser Direto ou Indireta.
Teste de Coombs - Direto
Teste de Coombs direto
Pesquisa a detecção de anticorpos que se ligam à superfície das células vermelhas do sangue.
Usado para testar anemias hemolíticas autoimunes.
Amostra de sangue é tratada com um reagente que contém anticorpos anti-imunoglobulina humana.
Resultados:
Aglutinação – Positivo;
Não houve aglutinação – negativo;
Prática – Coombs Direto
Coombs direto
Realizar a coleta de sangue (1 para o grupo);
Preparar a suspensão de hemácias a 5%;
2.1. adicionar em um tubo de ensaio 10 ul de sangue total + 190 ul de solução salina.
3. Em um tubo de ensaio adicionar 50ul da amostra de suspensão de hemácias para iniciar a lavagem.
4. Lavagem das hemácias
4.1. 50ul de amostra + 1000ul de solução salina e centrifugar de 3000 a 3600 rpm por 15-20 segundos. Descartar o sobrenadante
4.2. Realizar em triplicata (3 vezes);
5. Adicionar duas gotas do reagente de coombs, homegeneizar e centrifigar.
6. Realizar a leitura
	Material de uso
	Tubo de ensaio
	Seringa e tubo Roxo
	Pipeta e ponteiras
	Centrifuga 
	Solução salina
Teste de Coombs - indireto
Teste de coombs - indireto
Realizado como objetivo de detectar anticorpos irregulares, aqueles diferentes de Anti A e Anti B, que são anticorpos naturais.
Esses anticorpos irregulares estão no plasma de doadores e receptores, após contato com sangue que contenha antígenos diferentes dos seus.
Usado no diagnostico de Eritroblastose Fetal e Determinação do fator RH.
Prática – Coombs inDireto
Coombs indireto
	Material de uso
	Tubo de ensaio
	Seringa e tubo Roxo
	Pipeta e ponteiras
	Centrifuga 
	Solução salina
Marcar dois tubos: I e II; em cada tubo adicionar 2* gotas de soro do paciente + 1 gota do reagente de hemácia de triagem I e II;
Acrescentar 2 gotas do reagente, homogeneizar e incubar a 370°C por 15 minutos.
Lavar as hemácias 3 vezes com salina.
Decantar completamente o sobrenadante, desprender o botão formado e adicionar 1 gota do soro antigamaglobulina anti-igG;
Homogeneizar e centrifugar por 15 segundos a 3400 rpm;
Realizar a leitura;
*1 gota = 50ul
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