Pratica Cultura de Superficies

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ROTEIRO DE AULA PRÁTICA 
 
TEMA: Cultura de Superfícies 
 
INTRODUÇÃO: 
Em geral, os ambientes são contaminados por microrganismos que podem ou não produzir doenças. Por 
ser o hospital um ambiente insalubre, as técnicas de assepsia, antissepsia e de esterilização são de extrema 
importância para reduzir os riscos de infecções. O controle de microrganismos corresponde a todas as 
formas de matar ou remover os microrganismos, reduzir o número e inibir seu crescimento. Os métodos de 
controle podem ser físicos ou químicos. São formas de controle de microrganismos: esterilização, 
desinfecção, antissepsia e assepsia. 
 
OBJETIVOS: 
- Identificar os microrganismos presentes nos diferentes tipos de superfície (bancada, jaleco, dispositivos 
eletrônicos pessoais). 
- Identificar as características morfotintoriais das bactérias encontradas nas superfícies e sua relação com o 
local de isolamento. 
 
PROCEDIMENTOS 
 
Procedimento: 
- Dividir a placa de ágar sangue em três partes com auxílio de uma alça de platina aquecida. Etiquetar 
lateralmente cada uma das três partes, identificando as superfícies das quais serão coletadas amostras de 
swab. 
- Friccionar um swab estéril, previamente umedecido em salina estéril, sobre a superfície (jaleco, bancada 
e dispositivo eletrônico pessoal) por 10 a 15 segundos. Utilizando a técnica de isolamento ou esgotamento, 
estriar em zigue-zague com o swab em uma parte da placa de ágar sangue. Incubar a placa em estufa a 
37ºC/24h. 
- Na semana seguinte realizar o esfregaço das diferentes colônias e corar pela técnica de Gram. 
Técnica de Gram: 
Cobrir o esfregaço com cristal violeta por 1’ 
Lavar com água 
Cobrir o esfregaço com lugol por 1’ 
Lavar com água 
Descorar o esfregaço com álcool-acetona (10’’) e lavar com água. 
Cobrir o esfregaço com fucsina por 30’’ 
Lavar com água destilada 
Secar ao ar ou com papel-filtro. 
 
Leitura: 
Microscopia (objetiva de imersão de 100x – aumento de 1000x, com uma gota de óleo de imersão). 
Analisar várias áreas do esfregaço, relatando a ausência ou presença de microrganismos, descrevendo as 
características morfotintoriais dos microrganismos presentes. 
 
REFERÊNCIAS: 
MORIYA, T.; MÓDENA, J.L.P. Assepsia e Antissepsia: técnicas de esterilização. In Simpósio: Fundamentos 
em Clínica Cirúrgica, 1ª parte, cap. 3. Ribeirão Preto: Medicina, n. 41, v. 3, p. 265-273. 2008. 
TRABULSI, Luiz Rachid; ALTERTHUM, Flávio, Microbiologia. São Paulo: Atheneu, 2015. 
http://www3.unoeste.br/site/biblioteca/consulta/informix/maisinfo.asp?TitCodigo=52133