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CENTRO UNIVERSITÁRIO LEONARDO DA VINCI NÚCLEO DE EDUCAÇÃO A DISTÂNCIA - NEAD RELATÓRIO DE PRÁTICA VIRTUAL IDENTIFICAÇÃO 1. Acadêmico: 2. Matrícula: 3. Curso: 4. Turma: 5. Disciplina: Microbiologia Clínica 6. Tutor(a) Externo(a): DADOS DA PRÁTICA 1. Título: Antibiograma 2. Semestre: 3. Data: INTRODUÇÃO O uso indiscriminado de antibióticos favorece o desenvolvimento de cepas resistentes e colabora para a seleção destas, eliminando a maioria das populações de bactérias que se apresentam sensíveis. Basicamente, são utilizados dois métodos para análise da suscetibilidade aos antimicrobianos: diluição em tubo e difusão em disco (Kirby-Bauer). Ainda, é possível avaliar a atividade microbiana de um antibiótico por meio da determinação da concentração inibitória mínima (MIC, do inglês minimum inhibitory concentration). Essa análise mostra a menor quantidade necessária do antibiótico para impedir o crescimento do microrganismo em questão e a determinação da concentração bactericida mínima (MBC, do inglês minimum bactericidal concentration), ou OBJETIVOS • aprender a realizar um teste antibiograma e correlacioná-lo ao aparecimento de cepas resistentes; • reconhecer o aparecimento de bactérias resistentes e super-resistentes; • aprimorar suas aptidões em técnicas laboratoriais; • exercitar a discussão de resultados com base em evidências. • discutir a presença de microbiota da pele e de bactérias no ambiente. MATERIAIS Jaleco; Luvas de procedimento; Máscara; Óculos; Caneta permanente; Swab; Estufa bacteriológica; Alça bacteriológica; Pinça metálica; Tubo de ensaio com solução salina; Escala de McFarland 0,5; Suporte para tubo de ensaio; Ágar Manitol; Ágar MacConkey; Placa meio Mueller Hinton; Bico de Bunsen; Multidisco Gram Positivo; Multidisco Gram Negativo; Acendedor mecânico. METODOLOGIA SEGURANÇA DO EXPERIMENTO Lave as mãos na “Pia” e coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”. PREPARANDO A SUSPENSÃO Identifique as placas de ágar Mueller Hinton com caneta permanente. Acenda o bico de Bunsen e flambe a alça bacteriológica. Posicione a placa de ágar Manitol próximo a chama do bico de Bunsen, destampe a placa e colete a amostra com a alça. Tampe a placa de coloque-a de volta na bancada. Mova o tubo de ensaio (1) com solução salina para o bico de Bunsen, retire a tampa e inocule a bactéria. Após finalizar a inoculação, flambe a alça, tampe o tubo, mova-o para o suporte e compare a turvação com a escala de McFarland 0,5. Repita esse processo inoculando a amostra da placa de ágar MacConkey no tubo de ensaio (2). SEMEANDO A AMOSTRA Inocule o swab no tubo de ensaio (1). Mova a placa de ágar Mueller Hinton (1) para o bico de Bunsen, retire a tampa e semeei a amostra na placa. Descarte o swab. Tampe a placa e coloque-a na bancada. Repita o mesmo procedimento inoculando o swab no tubo de ensaio (2) e semeando a placa de ágar Mueller Hinton (2). Retorne as placas para a bancada e aguarde 10 minutos para secar. ADICIONANDO OS ANTIBIÓTICOS Posicione a placa de ágar Mueller Hinton (1) próximo ao bico de Bunsen e retire a tampa da placa. Flambe a pinça metálica e adicione o multidisco de antibiótico para gram-positivos. Flambe novamente a pinça, tampe a placa e coloque-a na bancada. Posicione a placa de ágar Mueller Hinton (2) próximo ao bico de Bunsen, retire a tampa da placa e adicione o multidisco de antibiótico para gram-negativos. Flambe a pinça ao final do processo e coloque-a na bancada. Tampe a placa de ágar Mueller Hinton, mova a placa para bancada. Coloque as duas placas na estufa, ligue o equipamento e aguarde 24 horas. REALIZANDO A LEITURA Abra a estufa e mova as placas de ágar Mueller Hinton para bancada. Ative o menu de resultados da prática. Utilize a régua para verificar o tamanho do halo de inibição do antibiótico. Preencha a tabela de resultados com o valor encontrado e informe a classificação. Realize a leitura completa das duas placas de antibiograma. RESULTADOS E DISCUSSÕES Este experimento trata do antibiograma pelo método de disco-difusão (Kirby-Bauer): um procedimento microbiológico realizado para verificar a ação de substâncias antimicrobianas no crescimento de bactérias. Como parte das atividades, você terá que incubar culturas bacterianas em salina até atingir a turbidez de uma solução- CENTRO UNIVERSITÁRIO LEONARDO DA VINCI NÚCLEO DE EDUCAÇÃO A DISTÂNCIA - NEAD CENTRO UNIVERSITÁRIO LEONARDO DA VINCI NÚCLEO DE EDUCAÇÃO A DISTÂNCIA - NEAD REGISTRO FOTOGRÁFICO REFERÊNCIAS ALGETEC – Soluções Tecnológicas em Educação. LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS ANTIBIOGRAMA. Disponível em: https://uniasselvi.grupoa.education/sagah/object/default/74948715.Acesso em:16/04/24. padrão de McFarland, inocular essas suspensões em ágar Mueller-Hinton e analisar a sensibilidade ou a resistência das bactérias inoculadas frente aos antibióticos testados. https://uniasselvi.grupoa.education/sagah/object/default/74940703.Acesso