Microscópio, lâminas e corantes histológicos

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Microscópio, corantes
e lâminas
Microscópio
Partes do microscópio
Como usar o microscópio?
Os oculares podem ter lentes com dois
aumentos: 10x e 16x.
Objetivos podem ter vários aumentos: 100x,
40x, 10x, 4x;
Para a objetiva branca (de imersão), com o
aumento de 100x, é necessário o uso do “óleo
de imersão”.
Corantes
As colorações sempre são as mesmas. Elas
são: hematoxilina-eosina (HE).
Hematoxilina: corante básico com atração a
substâncias ácidas.
• Essas substâncias ácidas recebem o
nome de basófilas (porque fixam
corantes básicos). 
• Azul ou roxo. 
Eosina: corante ácido com atração a
substâncias básicas.
• Essas substâncias ácidas recebem o
nome de acidófilas (porque fixam
corantes ácidos). 
• Rosa ou vermelha. 
Corante
Substânci
a corada
Afinidad
e
Coloração
Hematoxilin
a (básica)
Ácida Basófila Azul-púrpura
Eosina
(ácida)
Básica Acidófila Vermelho
Opostos se atraem.
Exemplo:
Quando uma célula apresenta o núcleo na
coloração azul-púrpura (basófilo), é porque a
célula é rica em DNA (ácido
desoxirribonucleioco), portanto é ácido e
atraído pela hematoxilina.
Mas quando o citoplasma da célula possui um
caráter mais básico, é, portanto, corado em
tonalidades de rosa pela eosina. E mesmo
assim, algumas regiões do citoplasma podem
se apresentar azuladas, pois em algumas
regiões há RNA (ácido ribonucleioco).
Imagem histológica da glândula tireoide,
corada por hematoxilina–eosina.
Em roxo, estão os núcleos das células
foliculares. Em rosa, o citoplasma das
células, assim como o colóide.
LARA MELO – ITPAC Palmas
Coloração em Prata
Utilizado em tecidos que não são corados pela
hematoxilina-eosina. Exemplo**:**
Fibras reticulares: formadas por colágeno do
tipo III e ricas em glicoproteínas e
proteoglicanos, que formam as redes.
• Estão presentes no fígado, medula
óssea, baço, linfonodos, etc. 
• Possuem argiorofilia (afinidade
pela prata). 
Imagem histológica do fígado, impregnado
por prata. Perceba que as fibras reticulares
estão enegrecidas.
Tricrômico de Masson
Tricrômico ultiliza-se três cores. Essa técnica é
utilizada principalmente em colágeno do tipo I.
Nessa técnica, as fibras colágenas assumem a
coloração azul.
Imagem histológica de fibras musculares
lisas em vermelho e fibras colágenas em
azul.
Coloração Gram
Utilizada para corar lâminas com determinadas
bactérias, por conta da composição da parede
bacteriana. São divididas entre dois grupos
bacterianos: GRAM + (positivas) e GRAM -
(negativas).
“Por que fazer uma coloração se elas já são
diferentes pela parede?” Porque, por mais
que a sua espessura e a sua composição
sejam diferentes, não é possível observar
esses detalhes na microscopia óptica.
• Foi por isso que Gram desenvolveu a
técnica que cora esses dois grupos
bacterianos, de colorações diferentes, de
acordo com sua parede, assim podemos
diferenciá-las pela cor apresentada na
lâmina. 
Bactérias GRAM positivas: Staphylococcus,
Enterococcus, Streptococcus.
Bactérias GRAM negativas: Escherichia
coli, Helicobacter pylori, Salmonella,
Shigella.
LARA MELO – ITPAC Palmas
Coloração de Giemsa
Utilizada para corar lâminas de sangue
periférico ou da medula óssea. Por meio
dessa coloração, é possível observar células
sanguíneas (plaquetas, eritrócitos e
leucócitos). Também utilizada para visualizar
protozoários do gênero Plasmodium (causador
da malária).
Quando se observa uma lâmina de sangue
periférico corada por Giemsa, as células
sanguínas estão em diferentes aspectos e
colorações, o que torna possível as diferenciar.
As plaquetas apresentam uma colocação
próxima ao azul.
Lâmina de esfregaço sanguíneo,
demonstrando um basófilo (coloração de
Giemsa).
LARA MELO – ITPAC Palmas
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	Coloração Gram
	Coloração de Giemsa